一種鱖魚幼魚肌肉生長促進劑的製作方法

2023-05-14 20:41:46 1

專利名稱：一種鱖魚幼魚肌肉生長促進劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種新潁的具有抑制肌肉生成抑制素(myostatin, MSTN)表達的化學合成劑，其在鱖魚幼魚肌肉生長中起促進作用。
背景技術：
肌肉生成抑制素(myostatin，MSTN)作為一種新的生長因子在1997年被發現，被命名為生長分化因子-8 (⑶F-8)。McPherron和Grobet等報導Myostatin編碼序列發生突變的牛肌肉質量增加顯著，呈現所謂的「雙肌現象」。敲除myostatin基因的轉基因小鼠的骨骼肌重量比正常的小鼠增加2-3倍。近年來人們試圖找到myostatin的抑制物來降低myostatin對肌肉成長抑制功能的發揮。Bogdanovich和Kim等分別在雞和小鼠體內注射myostatin蛋白抗體，實驗結果發現雞、小鼠的體重和肌肉量都增加。Lee等在2010年報導將虹鱒魚浸泡在含有體外表達MSTN抑制物的溶液中，魚體重能夠提高42%。Amali等在2004年通過給斑馬魚注射morpholino抑制MSTN表達觀察到魚體皆增大現象。鱖魚{Siniperea chuatsi)屬鱸形目，鯧科，鱖屬。鱖魚是原產於我國各主要江河湖泊的名貴食用魚。鱖魚味道鮮美，肉質細嫩，營養價值高，深受廣大消費者歡迎。上世紀80年代鱖魚人工繁殖成功並進行大規模推廣養殖，使之成為我國主要名貴養殖魚類之一。目前我國鱖魚養殖年產量超過20萬噸，其產值每年在100億人民幣以上，而且近幾年其價格穩中有升，人工養殖獲經濟效益較大，現已成為水產品市場中重要中高檔產品。如何提高鱖魚養殖產量滿足市場需求穩定鱖魚價格已成為當務之急，也是保持我國鱖魚養殖業沿著優質高效方向持續快速健康發展的必要前提。開發MSTN抑制劑是促魚肉生長新途徑，因此本發明通過化學合成一對特異抑制鱖魚MSTN表達的核苷酸短鏈，從抑制肌肉生成抑制素方面來促進鱖魚魚肉生長，為保持我國鱖魚高效健康養殖持續發展奠定基礎。

發明內容
針對現有技術的不足，本發明提供了一種鱖魚幼魚肌肉生長促進劑，解決了上述背景技術中的問題。本發明所解決的技術問題採用以下技術方案來實現:
一種用於鱖魚幼魚肌肉生長促進劑，其成分是經過標記與化學修飾的化學合成的雙鏈小RNA分子，
雙鏈小 RNA 分子的正向序列為:5' -AACAUUCAACGCGTCGGTGAGTT-3'；
雙鏈小 RNA 分子的反向序列為:5' -AsAsCUCACCGACGCGTTGAATsGsTsTs-CholS'，
反向序列進行化學修飾，反向序列的3'端膽固醇修飾-Chol，反向序列的5'端兩個硫代修飾AsAs,反向序列的3'端四個硫代修飾TsGsTsTs,反向序列的鹼基全部甲基化修飾。與現有技術相比，本發明的有益效果是:
(I)本發明是綜合運用分子生物學、動物營養學和化學合成原理，對影響鱖魚肌肉生長深入研究基礎上，研究開發的具有聞效、穩定等特點的肌肉生長促進劑。(2)本發明生產工藝成熟、產品質量穩定、價格合理、核心技術先進和經濟效益顯著，是目前比較理想的鱖魚肌肉生長促進劑，具有廣闊的市場前景。(3)本發明的突出優點是人工合成了促進鱖魚幼魚肌肉生長的新型小RNA化合物，製作的肌肉生長促進劑能夠明顯促進養殖鱖魚的生長，抑制MSTN表達，同時在使用肌肉生長促進劑後鱖魚肉質不受影響。


圖1為肌肉生長促進劑對鱖魚肌肉MSTN表達的影響(n=5)的柱形圖。
具體實施例方式為了使本發明的技術手段、創作特徵、工作流程、使用方法達成目的與功效易於明白了解，下面進一步闡述本發明。實施例1
肌肉生長促進劑對鱖魚生長的影響
通過鱖魚肌肉局部注射的方式，發揮肌肉生長促進劑在促肌肉生長中的作用。以不注射任何試劑為陰性對照組，以注射PBS為陽性對照組，以注射肌肉生長促進劑為試驗組，試驗組注射劑量為20μ g/g體重，連續注射三天，每天一次，注射完成後一周測定魚體生長指標，具體結果如表1:注射肌肉生長促進劑的試驗組鱖魚體長增加和增重比陽性和陰性對照組顯著提高。陽性和陰性對照組鱖魚體長和體重增加差異不顯著。因此注射肌肉生長促進劑能改善鱖魚生長性能。表I肌肉生長促進劑對鱖魚生長性能的影響(平均值土標準差)n=權利要求
1.一種用於鱖魚幼魚肌肉生長促進劑，其特徵在於，其成分是經過標記與化學修飾的化學合成的雙鏈小RNA分子， 雙鏈小 RNA 分子的正向序列為:5' -AACAUUCAACGCGTCGGTGAGTT-3'； 雙鏈小 RNA 分子的反向序列為:5' -AsAsCUCACCGACGCGTTGAATsGsTsTs-CholS'， 反向序列進行化學修飾，反向序列的3'端膽固醇修飾-Chol，反向序列的5'端兩個硫代修飾AsAs,反向序列的3'端四個硫代修飾TsGsTsTs,反向序列的鹼基全部甲基化修飾。 ·
全文摘要
本發明公開了一種用於鱖魚幼魚肌肉生長促進劑，其成分是經過標記與化學修飾的化學合成的雙鏈小RNA分子，雙鏈小RNA分子的正向序列為5′-AACAUUCAACGCGTCGGTGAGTT-3′；雙鏈小RNA分子的反向序列為5′-AsAsCUCACCGACGCGTTGAATsGsTsTs-Chol3′，反向序列進行化學修飾，反向序列的3′端膽固醇修飾-Chol，反向序列的5′端兩個硫代修飾AsAs，反向序列的3′端四個硫代修飾TsGsTsTs，反向序列的鹼基全部甲基化修飾。本發明的突出優點是人工合成了促進鱖魚幼魚肌肉生長的新型小RNA化合物，製作的肌肉生長促進劑能夠明顯促進養殖鱖魚的生長，抑制MSTN表達，同時在使用肌肉生長促進劑後鱖魚肉質不受影響。
文檔編號A23K1/18GK103211099SQ201310120108
公開日2013年7月24日 申請日期2013年4月9日 優先權日2013年4月9日
發明者褚武英, 張建社, 李玉瓏 申請人:長沙學院