注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法及含量測定方法

2023-05-14 20:18:11 1

注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法及含量測定方法
【專利摘要】本發明屬於藥物分析領域，具體涉及注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法及含量測定方法。本發明目的是提供一種操作簡便，迅速、精確的方法用於檢測注射用鹽酸克林黴素中的雜質林可黴素、克林黴素B和7-差向克林黴素，採用液相色譜檢測上述雜質，關鍵在於控制HPLC檢測條件：流動相為磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40，雜質林可黴素、克林黴素B和7-差向克林黴素檢測波長為208～212nm。通過控制關鍵檢測參數實現簡便，迅速、精確檢測的目的，本發明方法操作簡便；測定結果準確可靠；專屬性更強；主峰保留時間在10-12分鐘，檢測時間較短；為檢測雜質、控制產品質量提供了一種全新的選擇。
【專利說明】注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法及含量測定方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於藥物分析領域，具體涉及注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法及含量測定方法。
【背景技術】
[0002]鹽酸克林黴素屬林可黴素類抗生素，為林可黴素的衍生物。抗菌譜與林可黴素形同，抗菌活性較林可黴素強4~8倍。對革蘭氏陽性菌如葡萄球菌屬(包括耐青黴素株)、鏈球菌屬、白喉桿菌、炭疽桿菌等有較高抗菌活性。對革蘭氏陰性厭氧菌也有良好抗菌活性，擬桿菌屬包括脆弱擬桿菌、梭桿菌屬、消化球菌、消化鏈球菌、產氣莢膜桿菌等大多對本品高度敏感。革蘭氏陰性需氧菌包括流感嗜血桿菌、奈瑟菌屬及支原體屬均對本品耐藥。本品與青黴素、氯黴素、頭孢菌素類和四環素類之間無交叉耐藥，與大環內酯類有部分交叉耐藥，與林可黴素有完全交叉耐藥性。本品的作用機制是與細菌核糖體50S亞基結合，組織肽鏈的延長，從而抑制細菌細胞的蛋白質合成。本品系抑菌藥，但在高濃度時，對某些細菌也具有殺菌作用。
[0003]鹽酸克林黴素中目前歐洲藥典報導的雜質共有3種，分別為:
[0004]雜質1-林可黴素，化學式見式I ;雜質I1-克林黴素B，化學式見式II ;雜質II1-7-差向克林黴素，化學式見式III。
[0005]
【權利要求】
1.注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法，其特徵在於:所述雜質為林可黴素，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ； 理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備: 精密稱取林可黴素對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含林可黴素40-60 μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；優選稀釋至每Iml含林可黴素50μ g的溶液。
2.注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法，其特徵在於:所述雜質為克林黴素B，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ； 理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備: 精密稱取克林黴素B對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素Β90-110μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；優選稀釋至每Iml含克林黴素BlOO μ g的溶液。
3.注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法，其特徵在於:所述雜質為7-差向克林黴素，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ；理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Irnl含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備: 精密稱取克林黴素對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素90-110 μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；優選稀釋至每Iml含克林黴素100 μ g的溶液。
4.根據權利要求1、2或3所述的注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法，其特徵在於:HPLC檢測條件中流動相磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為55:45。
5.根據權利要求1、2或3所述的注射用鹽酸克林黴素雜質的檢測方法，其特徵在於:HPLC檢測條件中所述的流速為1.0ml/min ;柱溫為35°C。
6.注射用鹽酸克林黴素雜質的含量測定方法，其特徵在於:所述雜質為林可黴素，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ； 理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備: 精密稱取林可黴素對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含林可黴素40-60 μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；優選稀釋至每Iml含林可黴素50μ g的溶液。
7.注射用鹽酸克林黴素雜質的含量測定方法，其特徵在於:所述雜質為克林黴素B，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ； 理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備:精密稱取克林黴素B對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素B90-110 μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；優選稀釋至每Iml含克林黴素BlOO μ g的溶 液。
8.注射用鹽酸克林黴素雜質的含量測定方法，其特徵在於:所述雜質為7-差向克林黴素，採用液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下: 固定相:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 流動相:磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為50-60:50-40 ;其中，磷酸二氫鉀溶液是磷酸二氫鉀6-8g，加水溶解稀釋至1000ml，用25%的氫氧化鉀溶液調節pH值至7_8 ；
流速:0.8-1.2ml/min ；
柱溫:30-40 0C ； 檢測波長:208-212nm，檢測波長優選210nm ； 理論板數按克林黴素峰計算不低於4000 ； 實驗材料的處理: (1)供試品溶液的製備:精密稱取注射用鹽酸克林黴素，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素0.8-1.2mg的溶液,作為供試品溶液； (2)對照品溶液的製備: 精密稱取克林黴素對照品適量，加流動相溶解並稀釋至每Iml含克林黴素90-110 μ g的溶液，搖勻，作為對照品溶液；稀釋至每Iml含克林黴素100 μ g的溶液。
9.根據權利要求6、7或8所述的注射用鹽酸克林黴素雜質的含量測定方法，其特徵在於:HPLC檢測條件中流動相磷酸二氫鉀溶液-甲醇體積比為55:45。
10.根據權利要求6、7或8所述的注射用鹽酸克林黴素雜質的含量測定方法，其特徵在於:HPLC檢測條件中所述的流速為1.0ml/min ;柱溫為35°C。
【文檔編號】G01N30/02GK103487518SQ201310392499
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月2日 優先權日:2013年9月2日
【發明者】孫毅, 田阿娟, 王婕 申請人:成都百裕科技製藥有限公司