一種用表面增強拉曼光譜測定Mo（Ⅵ）的方法與流程
2023-04-23 10:58:56 4
本發明涉及分析化學領域，具體是一種用表面增強拉曼光譜測定mo（ⅵ）的方法。
背景技術：
鉬(mo)是生命體必需的一種微量元素，它參與人體內多種酶的組成及酶催化作用，在抗癌、心血管保護和結石等方面具有十分重要的作用。鉬的缺乏會導致人體患腎結石、心血管病、大骨節病、食道癌等多種病症；而過量的鉬攝入則會干擾人體正常的生理機能和身體發育；同時，鉬也是植物生長的營養元素之一，植物中鉬的含量高低取決於生長環境。因此，對食品、土壤、水質等樣品中鉬的檢測十分重要。
近年來有關測定鉬的報導很多，用於鉬含量的測定方法主要有顯色光度法、催化光度法、原子吸收法、螢光光度法、極譜法、電感耦合等離子體原子發射光譜法等。其中，催化動力學螢光分析法具有靈敏度高、選擇性好等優點，但上述方法大多反應體系較複雜，有的用到試劑組分較多，因而給配製溶液、實驗操作帶來不便，而且選擇性及靈敏度不高。
表面增強拉曼光譜具有快速、靈敏高、選擇性好等特點，在定性或半定量測定方法已有研究報導，但對於定量測定的方法不多。在如何獲得穩定性好、拉曼光譜活性高的液相納米基底有待探究。納米金是常用的拉曼光譜納米基底，但納米金因製備方法的不同，可以獲得球形、鏈形、棒形、花狀等不同的形貌，其顏色、粒徑、穩定性和拉曼活性等也有極大的差異。金納米花溶膠、鹼性豔藍r分子探針體系與表面增強拉曼光譜技術聯用建立一種測定mo（ⅵ）的表面增強拉曼光譜新方法尚未見報導。
技術實現要素：
本發明的目的是針對現有技術的不足，而提供一種用表面增強拉曼光譜測定mo（ⅵ）的方法。這種方法選擇性好、穩定性好、靈敏度高、反應體系簡單。
實現本發明目的的技術方案是：
一種用表面增強拉曼光譜測定mo（ⅵ）的方法，包括如下步驟：
（1）製備已知濃度的mo（ⅵ）標準溶液體系：於刻度試管中，依次加入50μl-150μl0.21mmol/lph5.0hac-naac緩衝溶液，20μl-100μl10µmol/l鹼性豔藍r，以及10μl-250μl1000nmol/l的鉬酸銨標準溶液，再加入100μl-600μl100.12μg/ml金納米花溶膠，混合均勻，用二次蒸餾水定容至2.0ml，靜置10分鐘；
（2）製備空白對照溶液體系：用步驟（1）的方法不加mo（ⅵ）標準溶液製備空白對照溶液體系；
（3）分別取按步驟（1）、(2）製備的mo（ⅵ）標準溶液體系及空白對照溶液體系適量置於石英比色皿中，在拉曼光譜儀上，設定儀器參數，掃描獲得體系的表面增強拉曼光譜，測定1615cm-1處的表面增強拉曼峰強度值為i，同時測定空白對照溶液體系的表面增強拉曼峰強度值為i0，計算δi=i0-i；
（4）以δi對mo（ⅵ）的濃度關係做工作曲線；
（5）依照步驟（1）的方法製備樣品溶液，其中加入的mo（ⅵ）標準溶液替換為樣品溶液，並按步驟（3）的方法測定樣品溶液的表面增強拉曼峰強度值為i樣品，計算δi樣品=i0-i樣品;
（6）依據步驟（4）的工作曲線，計算出樣品溶液mo（ⅵ）的含量。
所述的金納米花溶膠的製備是：在三角燒杯中加入二次蒸餾水45ml，在磁力攪拌下，依次加入1ml60mmol/l檸檬酸三鈉，500μl10mg/mlhaucl4，100μl58μg/ml球形納米金為晶種，再加入1ml1mmol/ln2h4，繼續攪拌10分鐘，得到紅棕色的金納米花溶膠，用水定容到50ml,以au計算濃度為100.12μg/ml。
上述金納米花溶膠的製備方法是現有技術。
實現本發明目的的原理是：
在hac-naac緩衝溶液體系中，鹼性豔藍r會吸附在金納米花溶膠表面使其具有很強的表面增強拉曼信號，當在體系中加入不同量的mo（ⅵ）時，mo（ⅵ）與探針分子鹼性豔藍r反應生成一種紫色物質，這種紫色物質既不能使金納米花聚集，也沒有拉曼信號。但發生此反應後，體系中鹼性豔藍r的量逐漸降低，拉曼信號強度逐漸降低，且隨著mo（ⅵ）濃度的增加，在1615cm-1波數處的拉曼信號線性降低。
這種方法的優點是：與現有的方法相比，本測定方法選擇性好、體系穩定性好、靈敏度高，簡便快捷。
附圖說明
圖1為實施例中的部分表面增強拉曼光譜圖。
圖中，(a)ph5.0hac-naac緩衝溶液+0.2μmol/l鹼性豔藍r+25.03μg/ml金納米花溶膠;(b)a+20nmol/l鉬酸銨;(c)a+50nmol/l鉬酸銨;(d)a+80nmol/l鉬酸銨;(e)a+100nmol/l鉬酸銨;(f)a+125nmol/l鉬酸銨。
具體實施方式
下面結合實施例和附圖對本發明內容作進一步的闡述，但不是對本發明的限定。
實施例：
一種用表面增強拉曼光譜測定mo（ⅵ）的方法，包括如下步驟：
（1）製備已知濃度的mo（ⅵ）標準溶液體系：於7支刻度試管中，依次加入100μl0.21mmol/lph5.0hac-naac緩衝溶液，40μl10µmol/l鹼性豔藍r，再分別加入10µl、20µl、40µl、100µl、160µl、200µl、250µl1000nmol/l的鉬酸銨標準溶液，以及500μl100.12μg/ml金納米花溶膠，混合均勻，用二次蒸餾水定容至2.0ml，靜置10分鐘；
（2）製備空白對照溶液體系：用步驟（1）的方法不加mo（ⅵ）標準溶液製備空白對照溶液體系；
（3）分別取按步驟（1）、(2）製備的mo（ⅵ）標準溶液體系及空白對照溶液體系的溶液適量置於石英比色皿中，在dxrsmart拉曼光譜儀上，設定儀器參數，雷射功率為5.0mw,採集時間為3s，掃描獲得體系的表面增強拉曼光譜,見圖1，測定1615cm-1波數處的表面增強拉曼峰強度值為i，同時測定空白對照溶液體系的表面增強拉曼峰強度值為i0，計算δi=i0-i；
（4）以δi對mo（ⅵ）的濃度關係做工作曲線，獲得線性回歸方程為δi1615cm-1=3.47c+13.04，其中mo（ⅵ）濃度c的單位為nmol/l，測定線性範圍為5.0-125nmol/l，檢出限為0.3nmol/lmo（ⅵ）；
（5）樣品測定：取尿樣3個，分別取10ml於蒸發皿中，加入2ml濃硝酸，蓋上一大漏鬥，緩慢加熱，蒸至近幹。再加入2ml濃硝酸，繼續蒸乾，稍冷，加入少量二次蒸餾水溶解內容物，定量轉移至25ml容量瓶中，定容，搖勻，即為尿樣樣品溶液。取0.5ml處理的尿樣樣品溶液，按步驟（1）-（3）的方法測定樣品溶液的表面增強拉曼峰強度值為i樣品，計算δi樣品=i0-i樣品;
（6）依據步驟（4）的工作曲線，計算出被測樣品mo（ⅵ）的含量，尿樣1為15.3nmol/l，尿樣2為18.9nmol/l，尿樣3為16.7nmol/l；
取按步驟（5）製備的3種尿樣樣品溶液，平行三份，加入濃度為10nmol/l的mo（ⅵ）標準溶液，進行加標回收實驗，求得回收率分別為98.2%、99.4%、101.2%，相對標準偏差為3.1%、3.5%、2.7%。