治療眼部真菌和細菌感染的組合物的製作方法

2023-04-25 04:19:41 1

專利名稱：治療眼部真菌和細菌感染的組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種眼藥，尤其涉及一種用於治療真菌性角膜炎或細菌性角結膜炎的治療眼部真菌和細菌感染的組合物。
背景技術：
真菌性角膜炎是一種常見的致盲率很高的眼疾，藥物治療是真菌性角膜炎的主要治療方法。目前我國眼部真菌感染可供選擇的商品化藥物只有納他黴素滴眼液和氟康唑滴眼液兩種。美國愛爾康公司生產的納他黴素滴眼液是目前唯一經美國FDA批准的眼用抗真菌製劑，用於真菌感染的早期效果較好。但由於該藥不溶於水，其混懸液的角膜穿透性差，因此對角膜深部感染尤其合併前房積膿者效果不佳。氟康唑是目前國產的唯一商品化的抗真菌眼用製劑，眼局部應用對白色念珠菌性角膜炎效果好，但在我國白色念珠菌引起的角膜炎僅佔真菌性角膜炎的1％左右。由於該藥對我國真菌性角膜炎主要致病菌種鐮刀菌屬和麴黴菌屬(二者佔致病菌總體的71.7％-82.1％)具有耐藥性，療效極差，故其臨床應用非常局限。由於目前對真菌性角膜炎尚無高效、低毒、廣譜的抗真菌藥物，許多患者因治療無效而導致摘除眼球，給患者身心健康帶來極大的傷害。因此，急需研製開發高效、低毒、廣譜的服科抗真菌新藥，以明顯提高真菌性和細菌性角結膜炎治療效果。

發明內容
為了解決目前治療真菌性角膜炎的眼藥種類少、功能單一的問題，本發明的目的是提供一種同時具有高效抗真菌和抗細菌雙重活性、提高真菌性和細菌性角結膜炎治療效果的治療眼部真菌和細菌感染的組合物。
本發明的技術方案是以下述方式實現的一種治療眼部真菌和細菌感染的組合物，它是以用於殺死致真菌性角膜炎和細菌性角結膜炎微生物的汞類防腐劑作為主要活性成分、配以輔料組成，其特徵在於a.汞類防腐劑的量為組合物總重量的0.001-0.1wt％；
b.輔料為滲透壓調節劑，滲透壓調節劑的量為組合物總重量的0.01-5wt％。
c.用溶解所述汞類防腐劑和輔料所需要的水配製至總量為100％。
所述汞類防腐劑為硫柳汞、硫柳汞的重量為組合物總重量的0.011～0.1wt％。
所述汞類防腐劑為硝酸苯汞或醋酸苯汞，硝酸苯汞或醋酸苯汞的重量為組合物總重量的0.0051-0.05wt％。
所述汞類防腐劑為硝酸苯汞鹼、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞或苯磺硫汞鈉；硝酸苯汞鹼、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞或苯磺硫汞鈉的重量為組合物總重量的0.001-0.1wt％。
活性成份中還有抗真菌劑藥物，抗真菌劑藥物的重量為組合物總重量的0.05-5wt％。
活性成份中還有抗病毒藥物，抗病毒藥物的重量為組合物總重量的0.05-2wt％。
活性成份中還有抗細菌藥物，抗細菌藥物的重量為組合物總重量的0.05-10wt％。
活性成份中還有非甾體消炎劑，非甾體消炎劑的量是組合物總重量的0.05-2wt％。
輔料中還有抗氧化劑、pH調節劑、黏度增加劑和/或表面活性劑；抗氧化劑的量為組合物總重量的0.01％-2wt％；pH調節劑的量為組合物總重量的0.001％-3wt％；黏度增加劑的量為組合物總重量的0.05-3wt％；表面活性劑的量為組合物總重量的0.05-3wt％。所述的抗氧化劑為沒食子酸丙酯、依地酸二鈉、依地酸鈣鈉或檸檬酸中的一種、兩種或兩種以上，所述的pH值調節劑為氫氧化鈉、硼酸、硼砂、磷酸二氫鈉或磷酸氫二鈉中的一種、兩種或兩種以上；所述的滲透壓調節劑為氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硼酸、甘露醇、丙二醇或丙三醇中的一種、兩種或兩種以上；所述的黏度增加劑為透明質酸鈉、聚乙烯醇、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、卡波姆、或聚維酮中的一種、兩種或兩種以上；所述的表面活性劑為聚山梨醇酯-80和烷基乙氧基化物中的一種或兩種。
所述抗真菌劑為兩性黴素B、納他黴素、酮康唑、咪康唑、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、益康唑、沙泊康唑、特比萘芬、布替萘芬、萘替芬、氟胞嘧啶及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述抗細菌劑為妥布黴素、新黴素、阿米卡星、卡那黴素、慶大黴素、西索米星、奈替米星、氯黴素、阿奇黴素、克林黴素、林可黴素、利福平、諾氟沙星、洛美沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、氟羅沙星、環丙沙星、培氟沙星、加替沙星、莫西沙星、甲硝唑、替硝唑、奧硝唑、塞克硝唑、磺胺醋醯鈉、苯扎氯銨、苯扎溴銨、苄索氯銨、地喹氯銨、六氯酚、聚六亞甲基雙胍、洗必泰、杜滅芬、黃連素、魚腥草及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述抗病毒劑為阿昔洛韋、更昔洛韋、噴昔洛韋、泛昔洛韋、環胞苷、阿糖胞苷、阿糖腺苷、磷甲酸、利巴韋林、西多福韋、溴夫定、咪喹莫特、普多非洛、碘苷、曲氟尿苷、羥苄唑、嗎啉胍、幹擾素及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述非甾體消炎劑為雙氯芬酸鈉、吲哚美辛、普拉洛芬、氟比洛芬、非諾洛芬、酮洛芬、吡羅昔康、苄達明、託美丁、酮咯酸及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種。
本發明的組合物通過藥學上常規的加工方法可製備成用於治療眼部真菌及細菌感染的滴眼液、眼用凝膠劑、眼用原位膠化劑、眼用微乳劑等。
醫藥領域的技術人員熟知硫柳汞、硝酸苯汞、硝酸苯汞鹼、醋酸苯汞、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞、苯磺硫汞鈉很久以來廣泛用於眼藥等藥物製劑的防腐劑，其安全性及病人很好的耐受性已得到確認。然而，迄今為止，把這些汞類防腐劑作為抗真菌抗細菌主要活性成分開發成本發明的眼部用抗真菌抗細菌藥組合物還是未知技術。
本發明所述的治療眼部真菌和細菌感染的組合物，拋開醫學領域傳統的觀念，將汞類防腐劑作為抗真菌抗細菌的主要活性成分進行開發，出人意料地產生了非常高的抗真菌和抗細菌活性，對真菌性角膜炎治療效果非常好，從而為患者和醫生提供了一種新的具有抗真菌和抗細菌雙重作用、安全、高效、廉價和方便的眼部用組合物。
本發明的積極效果是臨床應用證明本發明的治療眼部真菌和細菌感染的組合物治療真菌性角膜炎療效明顯優於0.1％二性黴素B滴眼液，其不良反應小，未見明顯毒性反應。
經本發明製備的抗真菌抗細菌組合物，工藝簡單，成本低，抗真菌抗細菌效力強，療效好，副作用小，性質穩定，應用範圍廣，尤其適於眼科真菌性及細菌性疾病的治療。
具體實施例方式以下的例子旨在說明本發明，不應構成對本發明的範圍的限制，本發明的保護範圍是由權利要求的範圍所限定的實施例1 含0.011％硫柳汞的眼用組合物

實施例2 含0.02％硫柳汞的眼用組合物


實施例3含0.03％硫柳汞的眼用組合物

實施例4 含0.012％硫柳汞和0.5％氟康唑的眼用組合物


實施例5 含0.018％硫柳汞和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例6含0.016％硫柳汞的眼用組合物


實施例7 含0.019％硫柳汞的眼用組合物

實施例8 含0.0051％硝酸苯汞的眼用組合物


實施例9 含0.006％硝酸苯汞和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例10含0.0055％硝酸苯汞的眼用組合物


實施例11 含0.002％硝酸苯汞鹼的眼用組合物

實施例12含0.01％硝酸苯汞鹼的眼用組合物


實施例13 含0.003％硝酸苯汞鹼和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例14含0.006％硝酸苯汞鹼和0.5％氟康唑的眼用組合物


實施例15 含0.02％硝酸苯汞鹼的眼用組合物

實施例16含0.0051％醋酸苯汞的眼用組合物


實施例17 含0.0053％醋酸苯汞和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例18含0.0055％醋酸苯汞的眼用組合物


實施例19 含0.0051％硼酸苯汞的眼用組合物

實施例20 含0.0053％硼酸苯汞和0.5％氟康唑的眼用組合物


實施例21 含0.0055％硼酸苯汞的眼用組合物

實施例22 含0.01％叔丁酚汞的眼用組合物


實施例23 含0.02％叔丁酚汞和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例24 含0.025％叔丁酚汞的眼用組合物


實施例25 含0.01％氰氧化汞的眼用組合物

實施例26 含0.02％氰氧化汞和0.5％氟康唑的眼用組合物


實施例27 含0.025％氰氧化汞的眼用組合物

實施例28 含0.01％苯磺硫汞鈉的眼用組合物


實施例29 含0.02％苯磺硫汞鈉和0.5％氟康唑的眼用組合物

實施例30 含0.025％苯磺硫汞鈉的眼用組合物


本發明的局部用組合物的有效性能通過以下試驗證明一、確定對真菌的最小抑菌濃度(MIC)值最小抑菌濃度(MIC)表示在生長介質中抑制真菌生長的有效成分的最小濃度。參照美國臨床實驗室標準化委員會制定的用於絲狀真菌的體外藥敏試驗方案(M38-A)，用微量液基稀釋法測定實驗藥物抗絲狀真菌的MIC，對照藥是氟康唑和兩性黴素B。表1示本發明中具有抗真菌作用的防腐劑的MIC(μg/ml)。
表1 本發明中有抗真菌作用防腐劑對眼科致病真菌的最小抑菌濃度(MIC)(μg/ml)


注氟康唑(FCZ) 兩性黴素B(AMB) 硫柳汞(THI) 硝酸苯汞(PHN) 硝酸苯汞鹼(PHNB) 醋酸苯汞(PHA) 硼酸苯汞(PHB) 叔丁酚汞(MER) 氰氧化汞(MO) 苯磺硫汞鈉(THS)從表1可以看出，本發明具有抗真菌抗細菌作用的汞類防腐劑對所有供試絲狀真菌都有非常強的抑制活性。
二、確定對細菌的最小抑菌濃度(MIC)值用微量液基稀釋法測定實驗藥物抗眼部細菌感染致病菌的MIC，對照藥是氧氟沙星和妥布黴素。表2示本發明中具有抗細菌作用防腐劑MIC(μg/ml)。
表2 本發明中有抗細菌作用防腐劑對眼科致病細菌的最小抑菌濃度(MIC)(μg/ml)


注氧氟沙星(OFL) 妥布黴素(TOB) 硫柳汞(THI) 硝酸苯汞(PHN) 硝酸苯汞鹼(PHNB) 醋酸苯汞(PHA) 硼酸苯汞(PHB) 叔丁酚汞(MER) 氰氧化汞(MO) 苯磺硫汞鈉(THS)從表2可以看出，本發明具有抗真菌和抗細菌作用的防腐劑對所有供試細菌都有非常強的抑制作用。
三、真菌性角膜炎藥效學實驗1.材料和方法菌液的製作煙麴黴菌在薩布羅氏培養基25℃培養3天，用1ml生理鹽水衝洗菌面，液體轉研磨器研勻後稀釋，紅血球計數器計數，配製成濃度為500萬個孢子/ml的混懸液。
動物白色健康家兔36隻，體重2-2.5公斤，雌雄不限。
方法經地卡因局麻後，每眼角膜基質層注射菌液0.1ml，使之形成直徑約2mm白色丘疹樣隆起，48小時後，螢光素染色，裂隙燈下觀察角膜病變，根據病灶大小，搭配均勻分三組，每組12隻。第一組用0.03％硫柳汞滴眼液滴眼，第二組用0.5％氟康唑滴眼液滴眼，第三組用生理鹽水滴眼，均為一天六次。分別於給藥第5、10、15天裂隙燈下觀察病情變化，比較三組角膜潰瘍癒合情況及併發症；在每一觀察時間點處死4隻家兔，立即取角膜，2隻家兔的4個角膜進行培養，觀察是否有真菌生長，另2隻家兔的4個角膜經95％乙醇固定、脫水、石蠟包埋、切片、染色後，光鏡下觀察組織學改變及真菌孢子和菌絲。
2.結果臨床症狀接種48小時後，36隻家兔72隻眼全部發病，表現為結膜充血水腫，隨後出現角膜點狀、條索狀浸潤病灶，角膜潰瘍，前房積膿，角膜新生血管、免疫環、角鞏膜葡萄腫、角膜穿孔等改變。
治療結果接種菌後治療15天的結果見表3，可見0.03％硫柳汞治療組有明顯治療作用，角膜病變治癒較早，合併症少。
表3 0.03％硫柳汞治療兔真菌性角膜炎作用

病理改變0.03％硫柳汞治療組出現角膜炎性滲出、新生血管、壞死、小膿腫、孢子及菌絲等改變的眼數明顯少於0.5％氟康唑滴眼液組和生理鹽水組，3組的病理變化見表2。
表4 0.03％硫柳汞治療兔真菌性角膜炎光鏡所見

角膜真菌培養0.03％硫柳汞治療組出現角膜真菌培養陽性的眼數明顯少於0.5％氟康唑滴眼液組和生理鹽水組，3組角膜真菌培養結果見表5表5 0.03％硫柳汞治療兔真菌性角膜炎角膜真菌培養

藥物毒性0.03％硫柳汞滴眼液對兔眼角膜和結膜無明顯損傷和毒性作用，兔眼易接受。
上述動物試驗研究證明本發明的治療眼部真菌和細菌感染的組合物治療兔真菌性角膜炎療效明顯優於0.5％氟康唑滴眼液，其不良反應小，未見特殊毒性反應。
四、0.03％硫柳汞治療真菌性角膜炎療效觀察1.臨床資料一般資料全部患者共65例(65眼)，男性49例，女性16例，年齡13～67歲。有植物或農作物外傷史者44例。發病到治療時間7～30天。所有病例均經角膜刮片鏡檢及真菌培養陽性確診，真菌培養結果顯示65例真菌中鐮刀菌40例，麴黴菌9例，交鏈互隔菌7例，青黴菌4例，彎抱黴菌2例，白色念珠菌2例，枝頂抱黴菌1例。將患者隨機分為治療組(35例)和對照組(30例)。
治療方法治療組用0.03％硫柳汞滴眼液滴眼，每天6～8次，持續用藥至活動性炎症消退。對照組以0.1％二性黴素B滴眼液滴眼，滴眼時間同治療組。兩組病例均常規應用1％阿託品滴眼液滴眼，每日1次。
療效判定治癒為疼痛症狀消失，角膜潰瘍癒合，前房積膿消失，螢光素染色陰性；好轉為疼痛症狀明顯減輕，角膜潰瘍部分癒合，前房積膿減少或消失；無效為疼痛症狀無改善，角膜潰瘍擴大或穿孔，前房積膿加重。
統計分析採用x2檢驗及兩樣本均數t檢驗。
2.結果治療組治癒31例(88.6％)，好轉2例(5.7％)，無效2例(5.7％)，總有效率94.3％。療程10～50天。對照組治癒8例(26.7％)，好轉5例(16.7％)，無效17例(56.7％)，總有效率43.4％，療程20～72天。0.03％硫柳汞滴眼液治療組治癒率明顯高於對照組，差異有非常顯著性(P＜0.001)；總有效率明顯高於對照組，差異有非常顯著性(P＜0.001)；治療組療程較對照組縮短，差異有顯著性(P＜0.05)。
權利要求
1.一種治療眼部真菌和細菌感染的組合物，它是以用於殺死致真菌性角膜炎和細菌性角結膜炎微生物的汞類防腐劑作為主要活性成分、配以輔料組成，其特徵在於a.汞類防腐劑的量為組合物總重量的0.001-0.1wt％；b.輔料為滲透壓調節劑，滲透壓調節劑的量為組合物總重量的0.01-5wt％。c.用溶解所述汞類防腐劑和輔料所需要的水配製至總量為100％。
2.根據權利要求1所述的治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於所述汞類防腐劑為硫柳汞、硫柳汞的重量為組合物總重量的0.011～0.1wt％。
3.根據權利要求1所述的治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於所述汞類防腐劑為硝酸苯汞或醋酸苯汞，硝酸苯汞或醋酸苯汞的重量為組合物總重量的0.0051-0.05wt％。
4.根據權利要求1所述的治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於所述汞類防腐劑為硝酸苯汞鹼、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞或苯磺硫汞鈉；硝酸苯汞鹼、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞或苯磺硫汞鈉的重量為組合物總重量的0.001-0.1wt％。
5.根據權利要求1-4所述的任一治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於活性成份中還有抗真菌劑藥物，抗真菌劑藥物的重量為組合物總重量的0.05-5wt％。
6.根據權利要求1-4所述的任一治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於活性成份中還有抗病毒藥物，抗病毒藥物的重量為組合物總重量的0.05-2wt％。
7.根據權利要求1-4所述的任一治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於活性成份中還有抗細菌藥物，抗細菌藥物的重量為組合物總重量的0.05-10wt％。
8.根據權利要求1-4所述的任一治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於活性成份中還有非甾體消炎劑，非甾體消炎劑的量是組合物總重量的0.05-2wt％。
9.根據權利要求1-4所述的任一治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於其特徵在於輔料中還有抗氧化劑、pH調節劑、黏度增加劑和/或表面活性劑；抗氧化劑的量為組合物總重量的0.01％-2wt％；pH調節劑的量為組合物總重量的0.001％-3wt％；黏度增加劑的量為組合物總重量的0.05-3wt％；表面活性劑的量為組合物總重量的0.05-3wt％。所述的抗氧化劑為沒食子酸丙酯、依地酸二鈉、依地酸鈣鈉或檸檬酸中的一種、兩種或兩種以上，所述的pH值調節劑為氫氧化鈉、硼酸、硼砂、磷酸二氫鈉或磷酸氫二鈉中的一種、兩種或兩種以上；所述的滲透壓調節劑為氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硼酸、甘露醇、丙二醇或丙三醇中的一種、兩種或兩種以上；所述的黏度增加劑為透明質酸鈉、聚乙烯醇、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、卡波姆、或聚維酮中的一種、兩種或兩種以上；所述的表面活性劑為聚山梨醇酯-80和烷基乙氧基化物中的一種或兩種。
10.根據權利要求5、6、7或8所述的治療眼部真菌和細菌感染的組合物，其特徵在於所述抗真菌劑為兩性黴素B、納他黴素、酮康唑、咪康唑、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、益康唑、沙泊康唑、特比萘芬、布替萘芬、萘替芬、氟胞嘧啶及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述抗細菌劑為妥布黴素、新黴素、阿米卡星、卡那黴素、慶大黴素、西索米星、奈替米星、氯黴素、阿奇黴素、克林黴素、林可黴素、利福平、諾氟沙星、洛美沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、氟羅沙星、環丙沙星、培氟沙星、加替沙星、莫西沙星、甲硝唑、替硝唑、奧硝唑、塞克硝唑、磺胺醋醯鈉、苯扎氯銨、苯扎溴銨、苄索氯銨、地喹氯銨、六氯酚、聚六亞甲基雙胍、洗必泰、杜滅芬、黃連素、魚腥草及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述抗病毒劑為阿昔洛韋、更昔洛韋、噴昔洛韋、泛昔洛韋、環胞苷、阿糖胞苷、阿糖腺苷、磷甲酸、利巴韋林、西多福韋、溴夫定、咪喹莫特、普多非洛、碘苷、曲氟尿苷、羥苄唑、嗎啉胍、幹擾素及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種；所述非甾體消炎劑為雙氯芬酸鈉、吲哚美辛、普拉洛芬、氟比洛芬、非諾洛芬、酮洛芬、吡羅昔康、苄達明、託美丁、酮咯酸及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種。
全文摘要
本發明公開了一種治療眼部真菌和細菌感染的組合物，它是將具有抗真菌和抗細菌雙重作用的汞類防腐劑硫柳汞、硝酸苯汞、硝酸苯汞鹼、醋酸苯汞、硼酸苯汞、叔丁酚汞、氰氧化汞、苯磺硫汞鈉及任一所述化合物的鹽及衍生物中的至少一種作為主要活性組分，和由抗氧化劑、pH調節劑、滲透壓調節劑組成的輔料以及溶解上述汞類防腐劑和輔料所需要的載體——水，共同組成本發明的治療眼部真菌及細菌感染的組合物，該組合物可以是多種眼用劑型，對真菌性角膜炎治療效果非常好，從而為患者和醫生提供了一種新的具有抗真菌和抗細菌雙重作用、安全、高效、廉價和方便的眼部用組合物。
文檔編號A61P27/00GK1887352SQ20061004840
公開日2007年1月3日 申請日期2006年7月13日 優先權日2006年7月13日
發明者徐豔, 王軼星, 廖生娟, 徐軍, 呂振月 申請人:徐豔