硫環紅素a在製備抗菌藥物中的應用的製作方法
2023-04-25 04:52:21
硫環紅素a在製備抗菌藥物中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了從豚草的鬚根中分離得到的硫環紅素A在製備抗菌藥物中的應用。硫環紅素A的製備方法包括以下步驟：包括超臨界萃取、聚醯胺柱層析、氧化鋁柱層析以及重結晶等步驟。製備得到的硫環紅素A可用於製備抗菌藥物。
【專利說明】硫環紅素A在製備抗菌藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於醫藥領域，涉及硫環紅素A及其製備方法和在製備抗菌藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]硫環紅素A (Thiarubrin A)，分子式為C13H8S2,分子量為228.34，結構式為:
硫環紅素A是從菊科(Compositae)豚草Ambrosia artemisiifolia L.的鬚根中分離得到的一種活性物質。硫環紅素A對白色念珠菌和蘇煙色麴菌有強的抗菌作，作用濃度與兩性黴素B相當；對白色念珠菌、枯草桿菌及線蟲有細胞毒活性；具有光敏毒性；具有抗病毒作用，在UV-A存在下對鼠巨細胞病毒MCMV和Sindbis病毒敏感；在微分子濃度和紫外光輻射下，有好的抗HIV活性。
[0003]通過文獻檢索，國內尚未見硫環紅素A用於製備抗菌藥物或保健品。
【發明內容】
[0004]為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療細菌感染疾病，應用硫環紅素A製備抗菌藥物或保健品。
[0005]硫環紅素A 的結構分析:MS m/z (rel.1nt.):228 (M+, 100),83 (25),119 (13)，183 (20),184 (49)。
[0006]上述硫環紅素A的製備方法，包括以下步驟:
1)超臨界萃取:取豚草的鬚根粉碎，投入到超臨界CO2萃取釜中，再加入適量有機溶劑作為夾帶劑，通入CO2，在萃取壓力20-35MPa，萃取溫度30_50°C條件下進行萃取，CO2流速為10-30L/h，進行萃取l_3h，收集萃取物；
2)聚醯胺柱層析:將萃取物加入聚醯胺樹脂柱中，控制流速0.5-1.5BV/h，先用水洗脫至無色，再用30-90%乙醇梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮至相對密度1.08-1.12，得硫環紅素A粗提物；
3)氧化鋁柱層析:將硫環紅素A粗提物用3-4倍量的酸性氧化鋁吸附，50°C以下低溫烘乾，幹法裝柱，用混合溶劑梯度洗脫，收集含高含量硫環紅素A的流分，減壓濃縮至小體積，結晶，得粗晶；
4)重結晶:將粗晶用乙酸乙酯-丙酮混合溶液重結晶，得到高純度的硫環紅素A單體化合物。
[0007]步驟(1)所述夾帶劑為60-90%的乙醇或丙酮溶液,加入量為相當於原料重量的5-15%。
[0008]步驟(3)所述的混合溶劑為石油醚、乙酸乙酯、甲醇、丙酮、乙醇的混合溶液。
[0009] 本發明用於製備抗菌藥物時，其口服或非口服給藥均是安全有效的。口服給藥可以製成任何常規劑型，如:散劑、顆粒、膠囊、片、口崩片、滴丸、軟膠囊等；非口服給藥，可製成各種常規劑型，如注射液等。
[0010]本發明用於製備抗菌藥物時，在其口服配方中添加腸吸收促進劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0011]本發明用於製備抗菌藥物時，其輔料及製備方法可選用任何藥學可接受的形式。
[0012]本發明的劑量可根據服用方式、病人的年齡、病情嚴重程度等因素而改變，成人口服劑量為l-200mg/日，成人注射劑量為l_50mg/日。
[0013]下面將結合【具體實施方式】進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
【具體實施方式】
[0014]實施例1:
將豚草的鬚根粉碎，取5kg投入超臨界萃取罐內，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0.3kg (原料重量的6%)，在萃取壓力25MPa，萃取溫度45°C，CO2流量18L/h條件下萃取2h，得掌石蕊萃取物，萃取物用熱水分散，上聚醯胺樹脂柱，流速1.0BV/h,先用水洗至水洗液無色,再用30%乙醇洗脫，最後用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至相對密度為1.08，得到硫環紅素A粗提物，將硫環紅素A粗提物用3倍量的酸性氧化鋁吸附，於50°C低溫烘乾，幹法上柱，用不同比例的石油醚、石油醚-乙酸乙酯、乙醇梯度洗脫，薄層層析檢查，收集高含量硫環紅素A流分，減壓濃縮至小體積，結晶，將粗晶用乙酸乙酯-丙酮重結晶，得到548mg硫環紅素A單體化合物，其含量為95.7%
為了更好的理解本發明的實質，下面將用硫環紅素A的藥理實驗及藥理來說明其在製藥和保健品中的用途。
[0015]1、受試提取物:硫環紅素A提取物
(I)性狀:結晶，味苦。
[0016](2)規格:含硫環紅素A≥90%ο
[0017](3)溶劑:乙醇或甲醇。
[0018](4)儲存條件:4°C，密封保存。
[0019]2、抗菌作用
(O實驗材料:供試菌種，白色念珠菌，由南京大學生命科學學院實驗室提供，LS-Sll全自動立式電熱壓力蒸汽滅菌器，上海博訊實業有限公司醫療設備廠；GZX-9246MBE電熱恆溫鼓風乾燥箱，上海博訊實業有限公司醫療設備廠。
[0020](2)實驗方法與結果:採用液體培養基法，取硫環紅素A，用甲醇配置成不同濃度(2-50 μ g/ml)的溶液，分別加入液體培養基和白色念珠菌菌懸液，同時以水和甲醇作為對照，加入白色念珠菌菌懸液，攪拌均勻，於37°C恆溫震蕩8小時，測定吸光度值，各樣品吸光值均出現較大程度下降，結果如下:
表1硫環紅素A的抗菌實驗結果(液體培養法)
【權利要求】
1.結構式如下所示的硫環紅素A在製備抗菌藥物中的應用。
【文檔編號】A61P31/04GK104069100SQ201410266221
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月16日 優先權日:2014年6月16日
【發明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司