一種分離純化虎杖中大黃素的方法

2023-04-24 10:29:26

專利名稱：一種分離純化虎杖中大黃素的方法
技術領域：
本發明屬於中藥材有效成份提取及純化領域，具體涉及從中藥虎杖中分離純化獲得高純度大黃素的方法。
背景技術：
虎杖為寥科植物虎杖的根莖和根。主要分布於華東、中南、西南及河北、陝西、甘肅等地。虎杖包含許多化學成分，如蒽醌類、二苯乙烯類、黃酮類等。其中，蒽醌類化合物是虎杖的重要活性成分，主要含有大黃素、大黃酸、大黃素甲醚、大黃酚等。研究發現大黃素具有抗菌、瀉下、保肝、抗腫瘤等作用。近來研究還發現以大黃素為主的總蒽醌提取物對中樞神經系統有一定影響，因而在臨床上被廣泛應用。目前對虎杖蒽醌類成分的提取純化方法有較多報導，但實際操作中不易分離得到高純度的藥用成分，如何最大限度的保留其有效成分，除去無效成分，提高虎杖的藥用附加值，已成為虎杖研究的重點。本專利提供的分離方法，是在大量的實驗中總結出來的提取分離工藝，能獲得純度較高的有效成分。

發明內容
本發明旨在提供一種分離純化虎杖中大黃素的方法，該方法包括以下步驟:
(1)將虎杖藥材粉碎；
(2)用乙醇熱回流提取，合併提取液，過濾，得粗提液
(3)將步驟(2)中粗提掖濃縮至大孔樹脂上樣濃度
(4)將(3)得到的濃縮液上大孔樹脂柱；
(5)用水洗脫除雜後，用乙醇梯度洗脫；
(6)收集乙醇洗脫液減壓濃縮真空乾燥，得到大黃素粗品。(7)將步驟(6)得到的粗品經過柱層析提純，洗脫液濃縮，丙酮重結晶，得橙色針狀結晶。其中步驟(I)中虎杖粉碎後的粒度為30-60目。步驟(2)中乙醇的濃度為40%_95%。步驟(3)中加水量為浸膏重量的8-10倍。步驟(4)中所述大孔樹脂為D-101型大孔樹脂，大孔樹脂與步驟(I)中所述虎杖的重量比為0.5-5:1。步驟(5)中洗脫溶劑採用與蒸餾水除雜、95%乙醇洗脫，合併95%乙醇洗脫液。步驟(7)中層析柱所用矽膠為200 - 300目的粗孔矽膠，矽膠用量與大黃素粗品是比例為30:1。用氯仿和甲醇的混合試劑進行洗脫，薄層展開劑也用氯仿和甲醇混合試劑。所述氯仿和甲醇的混合試劑中，氯仿:甲醇為7:3時取得最佳分離效果。步驟(7)重結晶中所用試劑為丙酮。本發明方法簡單，原料易得，產品純度可達99%，產品得率高。
具體實施例方式1.將烘乾的虎杖用粉碎機粉碎，加入原料重量8倍的80%乙醇對原料回流提取3次，每次提取lh，濾過，合併濾液，將濾液減壓濃縮回收乙醇，檢測濃縮濃度至大孔樹脂上樣濃度，即大黃素的濃度為2.5mg/ml ；
2.將濃縮液加入到大孔樹脂中進行飽和吸附，最大上樣量為1.5倍樹脂床體積，先用4倍樹脂床的水洗脫除去雜質，再用95%乙醇作為洗脫劑，洗脫劑用量為5倍樹脂床體積，對洗脫劑進行回收溶劑和濃縮處理，乾燥，得大黃素粗品；
3.大黃素粗品以氯仿溶解，與矽膠按1:1混合，另取200 - 300目的矽膠2kg，幹法上柱，矽膠裝柱的過程中不斷用橡膠 棒敲擊柱體，儘量減少矽膠柱出現斷層。再將大黃素粗品與矽膠混合物裝入矽膠柱，然後用氯仿和甲醇(氯仿:甲醇=7:3)進行洗脫，洗脫過程中不斷點樣進行檢測。當含有大黃素的洗脫液從矽膠柱中流出時開始收集，直至洗脫液中不含有大黃素時停止收集，將收集的洗脫液蒸餾、乾燥，反覆用丙酮進行重結晶，得橙色針狀結晶物。
權利要求
1.一種分離純化虎杖中大黃素的方法，其特徵是通過以下步驟實現: (1)回流提取取虎杖藥材粉碎，然後用乙醇浸泡，回流提取，得粗提液； (2)大孔樹脂吸附將上述粗提液，通過大孔樹脂柱進行飽和吸附，先水洗除雜，再用乙醇洗脫，減壓濃縮，回收乙醇，得大黃素粗品； (3)將上述粗品經過矽膠柱層析，用洗脫液洗脫，收集洗脫液減壓蒸餾，丙酮重結晶即得橙色針狀結晶。
2.根據權利要求1所述的一種分離純化虎杖中大黃素的方法，其特徵在於步驟(I)中虎杖不需進行酶解，直接用乙醇對粉碎好的虎杖原料進行提取。
3.根據權利要求1所述的一種分離純化虎杖中大黃素的方法，其特徵在於步驟(2)中大孔樹脂選用D-1Ol大孔樹脂。
4.根據權利要求1所述的一種分離純化虎杖中大黃素的方法，其特徵在於步驟(3)中，採用混合試劑進行洗脫，薄 層展開劑用氯仿:甲醇。
全文摘要
本發明涉及一種虎杖中有效成分大黃素的提取方法，屬於中藥有效成份提取純化領域。將中藥虎杖乾燥粉碎後用乙醇回流提取，過濾、濃縮、得濃縮液，經大孔樹脂分離純化後，收集洗脫液，回收溶劑即得大黃素粗品，粗品再經矽膠柱層析純化得大黃素純品，採用紫外分光光度法測定其中大黃素含量大於99%。本方法操作簡單、成本低、對環境無汙染。
文檔編號C07C46/10GK103073409SQ201210543029
公開日2013年5月1日 申請日期2012年12月16日 優先權日2012年12月16日
發明者王慧竹, 陳帥, 王曉林, 劉立業, 薛健飛 申請人:吉林化工學院, 王慧竹