一種用於結核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒的製作方法

2023-05-03 00:34:16 1

專利名稱：一種用於結核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒的製作方法
技術領域：
本發明涉及ー種生物檢測試劑的研發，更具體涉及ー種用於結核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒，屬於分子生物學技術領域。。
背景技術：
結核病(Tuberculosis,TB)是由結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的ー種慢性人畜共患病，能夠感染人和多種哺乳動物以及禽類。其中導致人類感染的結核菌大多數是人結核分枝桿菌，也有10%以上是由牛分枝桿菌引起的。各個器官都可被侵犯，但以肺器官被侵染為多見。其病理特徵是在多種組織器官中形成肉芽腫和乾酪樣、鈣化結節病變。
據世界衛生組織(WHO)報告，目前全球已有20億人感染結核菌，現有活動性肺結核患者約2000萬，毎年新發病800-1000萬，每年約有300萬人死於結核病，毎年死於結核病的成年人多於愛滋病，瘧疾和熱帶病死亡人數的總和。據WHO估算，到2005年全球結核病新病例將達1020萬例。全球90%的結核病在發展中國家，中國結核病患者數居世界第ニ，僅次於印度。結核桿菌不僅感染人，也感染許多動物(見表I)尤其是奶牛。這對以奶牛業為主的發達國家造成嚴重經濟損失。儘管ー些國家已有效地控制或消滅了此病，但在有些國家和地區仍呈地區性散發和流行。我國結核病疫情嚴重，且分布較廣。表I各種不同結核桿菌對人和動物的致病性
權利要求
1.用於結核桿菌目視檢測引物組，引物針對結核分支桿菌的FadB4基因設計，共包括4條，引物序列如下 引物名稱引物序列(5』-3 )F3TTCCCGGACGCACTGCB3GCTCGGGCGACAATACCGFIPTCGAACCACTCCGGCGATCTC-TAACCCGTGGCCGTTACCBIPCCGGATAACAGCCAAGTGCGT-CGACTTCGGCCATGCC
2.包含權利要求I所述的用於結核桿菌目視檢測引物組的試劑盒，所述試劑盒中任選包括，dNTPs, Bst DNA 聚合酶，SYBR Green I 染料。
3.權利要求2所述的試劑盒在PCR擴增中的應用。
4.權利要求2所述的試劑盒在檢測人結核分枝桿菌標準株H37Rv、弱毒株H37Ra、卡介苗BCG、牛分枝桿菌、龜分枝桿菌、禽分枝桿菌基因組以及大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、棒狀桿菌、李氏桿菌和/或布魯氏菌S19中的應用。
5.權利要求2所述的試劑盒在食品檢測中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種用於結核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒，本發明的結核桿菌引物組及其試劑盒可直接目視檢測結核桿菌基因組結果，可以用於從痰樣中鑑別診斷結核分支桿菌。適應於臨床結核樣本的檢測，為臨床結核病患者的診斷提供輔助。
文檔編號C12R1/32GK102776275SQ20121013311
公開日2012年11月14日 申請日期2012年5月3日 優先權日2012年5月3日
發明者喬軍, 孫志華, 張豫, 張輝, 曹旭東, 王勇, 陳創夫 申請人:石河子大學