松香誘導生物轉化製備活性酚類化合物的方法

2023-09-19 01:48:55

專利名稱：松香誘導生物轉化製備活性酚類化合物的方法
技術領域：
本發明涉及-
-株從雲南松林腐殖質中篩選獲得的毛黴科iM^/oAsis屬A5+菌株
及其培養發酵優化條件，並用於松香誘導生物轉化製備活性酚類化合物0，0-1，1' -二 (2-羥基-3，4，5-三甲基)苯基氧橋和4，5，6-三甲基-1，2-鄰苯二酚的方法，通過下列技術方案實現。 本發明的目的在於提供一種松香誘導來生產活性酚類化合物的方法，其特徵在於經過下列各步驟
A.將微生物菌株A5+在PDA培養基中進行常規培養，獲得活化菌株，再接入PDB培養基中進行發酵48 72h;
B.配製轉化產物的誘導物；
C.將步驟B中所配製的誘導物加入步驟A中發酵後的菌株，進行生物轉化；
D.將C的轉化液進行過濾濃縮，得到轉化產物粗提物浸膏；
E.轉化產物粗提物浸膏用50 90%的無水乙醇進行梯度醇沉，乙醇相濃縮；其次再用石油醚萃取，水相濃縮；接著用乙酸乙酯多級萃取3次，乙酸乙酯相濃縮；最後經過薄層層析、矽膠柱層析LH-20凝膠層析和高效液相色譜法分離純化得到粉狀化合物SX-I為0，0
-1, 1'-
(2-羥基-3，4，5-三甲基)苯基氧橋和結晶化合物SX-2為4，5，6-三甲
基-1，2-鄰苯二酚。
權利要求
1.一種松香誘導來生產活性酚類化合物的方法，其特徵在於經過下列各步驟A.將微生物菌株A5+在PDA培養基中進行常規培養，獲得活化菌株，再接入PDB培養基中進行發酵48 72h ；B.配製轉化產物的誘導物；C.將步驟B中所配製的誘導物加入步驟A中發酵後的菌株，進行生物轉化；D.將C的轉化液進行過濾濃縮，得到轉化產物粗提物浸膏；E.轉化產物粗提物浸膏用50 90%的無水乙醇進行梯度醇沉，乙醇相濃縮；其次再用石油醚萃取，水相濃縮；接著用乙酸乙酯多級萃取3次，乙酸乙酯相濃縮；最後經過薄層層析、矽膠柱層析LH-20凝膠層析和高效液相色譜法分離純化得到粉狀化合物SX-I為0，0 -1，1' -二(2-羥基-3，4，5-三甲基)苯基氧橋和結晶化合物SX-2為4，5，6-三甲基-1，2-鄰苯二酚。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述PDA培養基為200g/L的馬鈴薯+20g/ L的葡萄糖+1. 5% 覬的瓊脂，pH值為6，於110 125°C下高壓滅菌15 30min。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述PDB培養基為200g/L的馬鈴薯+20g/ L的葡萄糖，pH值為6，於110 125°C下高壓滅菌15 30min。
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述誘導物為按每200mL的PDA培養基中加松香0. 1 0. 3g，助溶劑95%的乙醇5 SmL取樣，將松香充分溶解在乙醇中所得的溶液為誘導物。
5.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述生物轉化的條件為在溫度沈 30°C、攪拌速率為120 128rpm下，反應72 96h。
6.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述微生物菌株A5+為毛黴菌亞門 (Mucoromycotina)、毛黴目(Mucorales)、毛黴禾鬥(Mucorales incertae sedis)。
全文摘要
本發明提供一種松香誘導來生產活性酚類化合物的方法，通過將微生物菌株A5+在PDA培養基中進行常規培養，獲得活化菌株，再接入PDB培養基中進行發酵48～72h；將誘導物加入發酵後的菌株，進行生物轉化；轉化液進行過濾濃縮，得到轉化產物粗提物浸膏；轉化產物粗提物浸膏用梯度醇沉，用石油醚、乙酸乙酯萃取，最後經過薄層層析、矽膠柱層析LH-20凝膠層析和高效液相色譜法分離純化得到O,O-1,1′-二(2-羥基-3,4,5-三甲基)苯基氧橋和4,5,6-三甲基-1,2-鄰苯二酚。本發明的生物轉化法具有高效性、高選擇性，反應條件溫和，幾乎不會對環境帶來汙染；比提取法費用低，節省成本；所得酚類化合物的活性有抗氧化性、抑菌、抗病毒、抗癌、抗輻射和抗過敏等作用。
文檔編號C12R1/645GK102181488SQ20111005972
公開日2011年9月14日 申請日期2011年3月14日 優先權日2011年3月14日
發明者餘旭亞, 孟慶雄, 曹建新, 李巧峰, 王亞明 申請人:昆明理工大學