一種dl-高半胱氨酸可視識別的新方法

2023-09-17 16:44:00 1

一種dl-高半胱氨酸可視識別的新方法
【專利摘要】本發明涉及使用一類鉗型有機鋅金屬絡合物在DL-高半胱氨酸的同時存在下，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現了對DL-高半胱氨酸的裸眼可視識別的新方法。該鉗型有機鋅金屬絡合物1，表達式為NNN-Zn-Cl2,NNN表示與鋅配位的三連吡啶配體。鉗型有機鋅金屬絡合物1與兩倍摩爾當量的DL-高半胱氨酸合用時，經過一系列的實驗操作，能夠重新形成金屬水凝膠；鉗型有機鋅金屬絡合物1與兩倍摩爾當量的L-半胱氨酸或穀胱甘肽合用時，經過一系列的實驗操作，只有白色沉澱生成，並沒有金屬水凝膠形成。本發明利用鉗型有機鋅金屬絡合物1及兩倍摩爾當量的DL-高半胱氨酸同時存在時，經過上述一系列的制膠實驗操作，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現了對DL-高半胱氨酸與L-半胱氨酸或穀胱甘肽的快速、簡便、裸眼可視識別。
【專利說明】—種DL-高半胱氨酸可視識別的新方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於生物小分子可視識別應用【技術領域】，具體涉及使用一類鉗型有機鋅金屬絡合物在DL-高半胱氨酸的同時存在下，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現了對DL-高半胱氨酸的裸眼可視識別的新方法。
技術背景
[0002]DL-高半胱氨酸和L-半胱氨酸是生物體內僅有的兩種含有巰基的胺基酸，它們都具有非常重要的生理功能。例如，DL-高半胱氨酸在生物體內的總濃度是疾病的重要標誌，在臨床上，高半胱氨酸已被公認作為心血管疾病，特別是冠狀動脈粥樣硬化和心肌梗塞的危險指標，它的濃度升高程度與疾病的危險性成正比。而L-半胱氨酸，作為一種主要的抗氧化劑，參與生物體內細胞的還原過程，具有抗衰老，調節肝臟內磷脂的代謝和保護肝臟細胞免受毒物損害等生理功能。L-半胱氨酸在生物體濃度的過低則會引起兒童生長緩慢，脫髮，消瘦，肝損害等綜合症。除此之外，作為由L-半胱氨酸和其他胺基酸結合形成的一種含有巰基的三肽，穀胱甘肽廣泛也存在於生物體內，具有抗氧化，抗癌，整合解毒等作用，提高生物體的免疫能力。基於以上，我們可以發現，這些巰基生物小分子各自在生物體內的濃度要求是不一樣的，因而，分別檢測識別這些含巰基生物小分子，特別是DL-高半胱氨酸，具有非常重要的臨床和理論研究意義。然而，由於DL-高半胱氨酸和L-半胱氨酸，穀胱甘肽具有類似的結構式(圖1)，如何快速、簡單的從這三種結構類似的化合物中識別出DL-高半胱氨酸，則是一項非常具有挑戰性的工作。目前用於檢測識別DL-高半胱氨酸的方法主要有紫外-可見吸收光譜，螢光光譜，色譜分離，質譜，毛細管電泳，免疫分析等方法。然而，這些方法都需要使用精密的大型儀器及繁瑣的檢測步驟。除此之外，還沒有簡單、直接、快速、有效地識別DL-高半胱氨酸的方法，特別是裸眼可視識別的相關報導。所以如何快速簡便識別DL-高半胱氨酸有著非常重要的理論和實際應用意義。就目前現狀而言，對於生物小分子化合物進行快速簡便的裸眼可視識別仍是分析化學，生物化學的難題之一。
[0003]
【權利要求】
1.DL-高半胱氨酸可視識別的新方法，其特徵在於具體步驟如下: (1)在一個5mL白色樣品瓶中，依次加入10 mg鉗型有機鋅金屬絡合物、兩倍摩爾當量的單一種類的L-半胱氨酸，DL-高半胱氨酸或穀胱甘肽，以及2.5 mL水，樣品瓶用聚氟乙烯的蓋子蓋好密封后用熱風槍加熱；當裡面的溶液變得透明，即鉗型有機鋅金屬絡合物完全溶解時停止加熱；將樣品瓶冷卻靜置一段時間至溶液凝聚形成穩定的水凝膠； (2)再向樣品瓶裡加入0.5摩爾當量的乙二胺四二酸二鈉，蓋好聚氟乙烯的蓋子後用熱風槍加熱至膠體變為透明溶液時停止加熱，將樣品瓶冷卻靜置一段時間後，經樣品瓶倒置實驗發現樣品瓶裡凝膠塌陷生成了清亮的溶液； (3)再次向樣品瓶中加入與0.5摩爾當量的無水氯化鋅，再次用聚氟乙烯的蓋子蓋好樣品瓶後，用熱風槍加熱樣品瓶；當裡面的溶液變得透明時停止加熱，冷卻靜置一段時間後，將樣品瓶倒置，觀察樣品瓶裡是否有金屬水凝膠再次形成； (4)鉗型有機鋅金屬絡合物與兩倍摩爾當量的DL-高半胱氨酸同時存在時，經過上述一系列的實驗操作，能夠重新形成穩定的金屬水凝膠；而與兩倍摩爾當量的L-半胱氨酸或穀胱甘肽同時存在時，經過上述一系列的實驗操作，只有能夠生成白色沉澱，並沒有觀察到金屬水凝膠形成； 其中，所述的鉗型有機鋅金屬絡合物為結構式如下:
【文檔編號】G01N33/68GK103901211SQ201410090374
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年3月13日 優先權日:2014年3月13日
【發明者】塗濤, 房微魏, 劉叢, 朱海波, 陸正未 申請人:復旦大學