九節茶水提物的質量控制方法
2023-09-18 05:58:55
專利名稱：九節茶水提物的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及藥品化學分析方法，具體地說是中藥材九節茶水提物的質量控制方法。
背景技術：
中成藥「清熱消炎寧」是由中藥材「九節茶」經水提加工製成的中成藥，具有清熱解毒、消炎止痛、舒筋活絡功效，用於流行性感冒、咽喉炎、肺炎、菌痢、急性胃腸炎、闌尾炎、燒傷、瘡瘍膿腫、蜂窩織炎。由於療效確切、無不良反應，備受醫、患者的歡迎。但是，作為九節茶的水提取物製成的製劑如「清熱消炎寧」膠囊的質量控制方法存在著不少的缺點它僅有鑑別反應，僅是一種產品中是否有糖、黃酮的定性鑑別，這種鑑別反應是非專屬性反應，不能很好地反映產品是否用了九節茶為原料製成的。為此，有必要尋找一種能控制清熱消炎寧產品質量的方法。
指紋圖譜是能評價中藥製品質量的一種操作簡便，穩定、精密度高、重現性好的實際可行的方法。
發明內容
本發明的目的是建立一種方法簡便、穩定、精密度高、重現性好的指紋圖譜的方法及其標準指紋圖譜來控制九節茶的水提取物或用水提物製成的「清熱消炎寧」膠囊的質量。
本發明的技術方案是用中藥製藥工業中常規的水提工藝，取中藥材九節茶為原料取九節茶水提物或取九節茶水提物製成的清熱消炎寧膠囊採用高效液相色譜法確立的指紋圖譜來控制質量，其方法按如下步驟進行步驟一、供試品溶液的製備取九節茶，加水煎煮二次，合併濾液，濃縮成稠膏，低溫乾燥，粉碎成細粉，取細粉配成每1ml中含10mg細粉的水溶液，或直接取清熱消炎寧膠囊的內容物配成每1ml中含10mg細粉的水溶液；步驟二、對照品溶液的製備取異嗪皮啶配成每1ml中含0.1mg濃度的水溶液；步驟三、指紋圖譜的建立分別精密取供試品溶液和參照物溶液各10μl，分別注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，記錄色譜圖，確定標準指紋圖譜(見附圖1)應有八個以上特徵指紋峰，以異嗪皮啶的色譜峰的保留時間為1計算相對相對保留時間，各特徵峰相對保留時間分別為0.22+0.01、0.27±0.01、0.49±0.01、0.55±0.01、1.00(S)、1.12±0.03、1.23±0.01、1.45±0.01；供試品指紋圖譜與標準指紋圖譜的相似度不得小於0.90。
採用不同的高效液相色譜儀及選用色譜條件的不同其標準指紋圖譜的八個特徵峰的出峰時間、保留時間、峰面積會有所不同，本發明經多次、反覆的試驗和條件摸索，確立較佳的色譜條件是十八烷基矽烷鍵合矽膠為固定相；0.1％乙酸甲醇溶液-0.1％乙酸水溶液為流動相，線性梯度洗脫；流速為0.5ml/min；檢測波長340nm；柱溫為40℃；以異嗪皮啶計算，理論塔板數不低於20000。
本發明的優越性是建立了九節茶水提物的標準指紋圖譜，方便辨別清熱消炎寧產品的正假，可以有效地控制產品的質量；該方法重現性、穩定性好，操作方法簡便、精密度高。
下面結合實施例及其附圖詳細闡述本發明的技術方案。
圖1、為九節茶水提物的標準指紋圖譜。
圖2、為參照物異嗪皮啶的高效液相色譜圖。
圖3、13批供試樣品的指紋圖譜。
圖4、5批供試樣品的指紋圖譜。
具體實施方案實施例1、標準指紋圖譜的建立。
具體操作方法如下步驟一、供試品的溶液製備樣品1，取九節茶2192kg，水煎兩次，每次兩小時，濾過合併濾液，濃縮成稠膏，低溫乾燥，磨成細粉，得細粉219kg，取細粉0.25g用水溶解後定容至25ml，即得1ml中含10mg細粉的水溶液；樣品2～14，取廣州敬修堂(藥業)股份有限公司生產的13批清熱消炎寧膠囊，批號為011114、011241、011242、020101、020102、020103、020104、020105、020106、020107、020108、020109、020110，各取膠囊內容物細粉0.25g用水溶解後定容至25ml，即得；步驟二、參照物溶液的製備精密稱取中國生物製品檢定所提供的異嗪皮啶標準品1mg，置於10ml量瓶中，用水溶解並稀澤至刻度，即得1ml中含0.1mg濃度的水溶液；步驟三、標準指紋圖譜的建立採用Agilent 1100高效液相色譜儀，用Agilent Hypersil ODS柱(5-Micron，4.0mm×250mm)，十八烷基矽烷鍵合矽膠為固定相，0.1％乙酸甲醇溶液-0.1％乙酸水溶液為流動相，線性梯度洗脫；流速為0.5ml/min；檢測波長340nm；柱溫為40℃；以異嗪皮啶計算，理論塔板數為24576。
取參照物溶液10μl注入高效液相色譜儀，得高效液相色譜圖，見附圖2；
取供試品溶液10μl注入高效液相色譜儀，得高效液相色譜圖；用供試品溶液樣品1，在一天內連續進樣共5次，記錄各色譜峰的保留時間和面積，以異嗪皮啶為參照，計算相對保留時間和峰面積比值以及RSD如表1和表2表1相對保留時間變異情況
表2峰面積比值精密度
由表可知，各色譜峰相對保留時間和峰面積比值的RSD均小於2％，說明儀器穩定；供試品溶液在常溫下一天之內具有很好的穩定性。
樣品2～14的指紋圖譜見附圖3。指紋峰保留時間見表3；指紋峰的相對保留時間見表4；指紋峰的峰面積值見表5；指紋峰面積比值見表6；
表3清熱消炎寧指紋峰保留時間(min)
表4清熱消炎寧指紋峰相對保留時間
從13批清熱消炎寧產品的分析結果來看，指紋峰保留時間和相對保留時間比較穩定表5清熱消炎寧指紋峰面積值
表6清熱消炎寧指紋峰面積比值
從上述結果可以知道，相對保留時間、峰面積比值的RSD都較小，說明該方法的重現性良好。
根據上述樣品的測試，確定標準指紋圖譜，見附圖1，有八個以上特徵指紋峰，以異嗪皮啶的色譜峰的保留時間為1計算相對相對保留時間，各特徵峰相對保留時間分別為0.22±0.01、0.27±0.01、0.49±0.01、0.55±0.01、1.00(S)、1.12±0.03、1.23±0.01、1.45±0.01；13批樣品的指紋圖譜與標準指紋圖譜的相似度，以計算機輔助相似度計算機軟體計算，結果如表7表7.13批清熱消炎寧指紋圖譜相似度計算結果
從表可知，各批次產品指紋圖譜整體相似度較高，均在0.9以上。
實施例2、考察5批工業生產樣品的指紋圖譜的色譜峰相對保留時間和峰面積比值的變異情況及與標準指紋圖譜的相似度。
操作方法步驟一、供試品溶液的製備分別取廣州敬修堂(藥業)股份有限公司生產的批號為C07202、C07203、C08205、C08206、C08207的清熱消炎寧，取膠囊內容物細粉0.25g用水溶解後定容至25ml，即得，共配製5份供試品；步驟二和三同實施例15份樣品的指紋圖譜見附圖4，其色譜峰相對保留時間和峰面積比值的變異情況和相似度，如表8～10。
表8相對保留時間重現性
表9峰面積比值重現性
從上述結果可以知道，相對保留時間、峰面積比值的RSD都較小，說明該方法的重現性良好。
相似度結果如下
權利要求
1.一種九節茶水提物的質量控制方法，其特徵是採用指紋圖譜控制質量，按如下步驟進行步驟一、是供試品溶液的製備取九節茶，加水煎煮二次，合併濾液，濃縮成稠膏，低溫乾燥，粉碎成細粉，取細粉配成每1ml中含10mg細粉的水溶液，或直接取清熱消炎寧膠囊的內容物配成每1ml中含10mg細粉的水溶液；步驟二、是參照物溶液的製備取異嗪皮啶配成每1ml中含0.1mg濃度的水溶液；步驟三、是指紋圖譜的建立分別精密取供試品溶液和參照物溶液各10μ1，分別注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，記錄色譜圖，確定標準指紋圖譜應有八個以上特徵指紋峰，以異嗪皮啶的色譜峰的保留時間為1計算相對相對保留時間，各特徵峰相對保留時間分別為0.22±0.01、0.27±0.01、0.49±0.01、0.55±0.01、1.00(S)、1.12±0.03、1.23±0.01、1.45±0.01；供試品指紋圖譜與標準指紋圖譜的相似度不得小於0.90。
2.根據權利要求1所述的九節茶水提物的質量控制方法，其特徵是步驟三中的色譜條件是十八烷基矽烷鍵合矽膠為固定相；0.1％醋酸甲醇溶液為流動相，線性梯度洗脫；流速為0.5ml/min；檢測波長340nm；柱溫為40℃；以異嗪皮啶計算，理論塔板數不低於20000。
全文摘要
九節茶水提物的質量控制方法，涉及藥品化學分析方法。是一種採用高效液相色譜法建立的指紋圖譜控制產品質量，標準指紋圖譜應有八個以上特徵指紋峰，以異嗪皮啶的色譜峰的保留時間為1計算相對相對保留時間，各特徵峰相對保留時間分別為0.22±0.01、0.27±0.01、0.49±0.01、0.55±0.01、1.00(S)、1.12±0.03、1.23±0.01、1.45±0.01；供試品指紋圖譜與標準指紋圖譜的相似度不得小於0.90。該方法可以有效地控制產品的質量，重現性、穩定性好，操作方法簡便、精密度高。
文檔編號G01N30/00GK1563975SQ200410026578
公開日2005年1月12日 申請日期2004年3月24日 優先權日2004年3月24日
發明者黃海濤, 彭紅英, 陳風庭, 陸頌規, 鄭少鑫 申請人:廣州敬修堂(藥業)股份有限公司