促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸b積累的誘導法
2023-10-07 06:26:34 3
促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸b積累的誘導法
【專利摘要】本發明公開了一種促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法,包括以下步驟:1)、丹參毛狀根的初培養:在每100mL的6,7-V培養基中接種0.3~0.4g丹參毛狀根,於100~150rpm、24~26℃的培養條件下黑暗培養17~19天;2)、丹參毛狀根的繼續培養:然後添加5-氮雜胞苷溶液,使6,7-V培養基中5-氮雜胞苷的終濃度為9~11μM;於100~150rpm、24~26℃的培養條件下黑暗培養5~7天。本發明通過使用5-氮雜胞苷處理丹參毛狀根,從而促進丹參毛狀根中次生代謝產物迷迭香酸和丹酚酸B的積累。
【專利說明】促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法。
【背景技術】
[0002] 丹參(Salviamiltiorrhiza)為唇形科植物丹參的根及根莖,有活血祛瘀,清熱安 神、養血益氣之功效。丹酚酸是丹參有效成分之一,主要包括迷迭香酸和丹酚酸B等。由於 在治療心血管系統疾病中的突出表現和無毒負作用的特點,丹參的應用和研宄也越來越廣 泛。
[0003] 目前現有的丹參毛狀根可採用6, 7-V培養基進行培養。一般稱取新鮮丹參毛狀根 0. 15?0. 2g接種於50mL的6, 7-V培養基中進黑暗培養。丹參毛狀根在生產丹參有效成分 方面有著巨大潛力,但活性成分含量較低已成為制約丹參毛狀根應用的瓶頸。
[0004] 含30g/L蔗糖的6, 7-V培養基的配方如表1所示,pH值為5. 8,121°C滅菌20min。
[0005] 表1、6, 7-V培養基的配方
[0006]
【權利要求】
1. 促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法,其特徵是包括以下步驟: 1) 、丹參毛狀根的初培養: 在每lOOmL的6, 7-V培養基中接種0. 3?0. 4g丹參毛狀根,於100?150rpm、24? 26°C的培養條件下黑暗培養17?19天; 2) 、丹參毛狀根的繼續培養: 然後添加5-氮雜胞苷溶液,使6, 7-V培養基中5-氮雜胞苷的終濃度為9?11 yM ;於 100?150rpm、24?26°C的培養條件下黑暗培養5?7天。
2. 根據權利要求1所述的促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法,其特 徵是: 5_氮雜胞苷溶液的配製方法為: 將0. 1221g的5-氮雜胞苷溶於5ml無菌水中,用0. 22 ym無菌濾頭過濾除菌,得5-氮 雜胞苷溶液。
3. 根據權利要求1或2所述的促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法, 其特徵是: 步驟2)中5-氮雜胞苷的終濃度為10 y M。
4. 根據權利要求3所述的促進丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導法,其特 徵是: 所述步驟1)和步驟2)的培養條件均為:110rpm,25°C ; 步驟1)的黑暗培養時間為18天,步驟2)的黑暗培養時間為6天。
【文檔編號】A01H4/00GK104472363SQ201410735636
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月5日 優先權日:2014年12月5日
【發明者】梁宗鎖, 楊東風, 黃志成, 郭萬裡, 祁哲晨, 張曉丹 申請人:浙江理工大學