從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法
2023-10-04 13:08:09 1
專利名稱：從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法
技術領域：
本發明涉及從魔芋中提取有效物質的方法，特別是一種從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法。
背景技術：
魔芋是有益的鹼性食品，對食用動物性酸性食品過多的人，搭配吃魔芋，可以達到食品酸、鹼平衡，對人體健康有利；目前世界各地對魔芋的保健、醫療作用作了許多臨床試驗研究，結論基本一致，其中主要成分魔芋葡甘聚糖屬水溶性半纖維素，其突出的營養保健 功能在於能發揮膳食纖維對營養不平衡的調節作用，它與白菜、芹菜等蔬菜類中所含非水溶性的纖維，進入人體後原形排出者不同，它能參與人體的代謝作用及影響腸道菌向有利於健康的方向變化；魔芋除含有大量葡甘聚糖外，還含有生物鹼、果膠、17種人體所需的胺基酸和10種礦物質微量元素以及豐富的食物纖維，是生物界唯一含有大量葡甘聚糖的植物，對高血脂、高膽固醇、糖尿病、肥胖病、便秘症等現代富貴病具有很好的防治作用，是中老年人理想的健康食品，深受世界保健食品市場的青睞；在日本，魔芋早已成為席席必備的佳餚，被譽為「魔力食品」。魔芋葡甘聚糖還具有增稠、乳化、膠凝、粘結、保水等性能，其粉即可作為主料做成各種食品，也可作為食品添加劑以改善其它食品的品質，在食品工業中被用作增稠劑、懸乳齊U、乳化劑、穩定劑、品質改良劑等食品添加劑，廣泛應用於糧食製品、肉製品、飲料、調味品、豆製品中；另外還可用於化妝品、紡織業、建築業、食用膜、環境保護、文物保護等領域。由於魔芋的廣泛用途以及世界各地對魔芋的認識，使得魔芋的市場需求越來越大，目前已形成日本市場、韓國及東南亞市場、歐美市場等三大市場。2006年國內外需鮮魔芋90萬噸，而產量僅52萬噸，遠遠無法滿足需要。從20世紀80年代開始，中國魔芋開始了產業化發展，種植面積和加工生產量都在飛速發展，在生產的同時產生的大量魔芋飛粉，由於魔芋飛粉抗營養且含有異味，一般都廢棄不用，不僅浪費，而且汙染環境。但是，魔芋飛粉中神經醯胺的含量達O. 15%-0. 20%，與大豆、小麥等其他來源相比，含量相對較高。神經醯胺是生物體內重要的功能物質，具有抗腫瘤、抗肝病毒、降血脂、降血糖、減肥、抗衰老、美白等作用，廣泛應用於醫藥保健品中，具有很高的實際應用價值。所以從魔芋飛粉中提取神經醯胺是一個很好的增加經濟效益和社會效益的途徑。在現有技術中，有很多提取魔芋神經醯胺的方法，專利申請號2011103279658公布了「一種從魔芋飛粉中製備神經醯胺的方法」，該方法用乙醇浸泡提取、石油醚萃取、用石油醚-乙酸乙酯通過矽膠柱梯度洗脫、然後用乙醇-水通過C18鍵合矽膠ODS柱梯度洗脫，最後得到神經醯胺含量達95%以上的樣品，該方法雖然很好，但是由於最初提取方法問題，使得提取率不高；專利申請號2010105989816公布了 「魔芋神經醯胺極其提取方法」，該方法採用乙醇多次浸提，然後用乙酸乙酯萃取濃縮，再用乙醇、乙酸乙酯和石油醚反覆溶解、萃取、濃縮，最後得到的神經醯胺產品含量太低。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種綜合提取方法，提高對神經醯胺的提取率，然後採用適當的溶媒組合及其比例通過矽膠柱進行梯度洗脫提取高純度的神經醯胺產品；以提高經濟效益。為解決上述技術問題，本發明所採用的技術方案是一種從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、乾燥、再次梯度洗脫和乾燥八大工序完成，具體方法如下。⑴選料收集魔芋飛粉，去掉雜質。⑵綜合提取將魔芋飛粉用70%的乙醇溶液按照固液比為I :5-6的標準在70°C溫度下攪拌浸泡10-20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然後再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液；然後再將濾渣用95%的乙醇溶液按照固液比為I :4-5的標準在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然後再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液，最後將兩次上清液合併。.M農縮蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉蒸發儀濃縮至黏稠狀。⑷萃取將濃縮液用3-5倍體積的石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40-50min，然後靜置分層30min，收集石油醚相；然後再重複兩次；合併石油醚相，濃縮，獲得神經醯胺浸膏。(5)梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用洗脫劑平衡後，將神經醯胺浸膏上樣，採用石油醚-乙酸乙酯溶劑溶解並梯度洗脫，洗脫液的梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液。(6)乾燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後乾燥得神經醯胺粗品。(7)再次梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用洗脫劑平衡後，將神經醯胺粗品用洗脫劑溶解後上樣，採用乙醇-水為溶劑溶解並梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液。(8)乾燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後真空冷凍乾燥得神經醯胺粉粒；經HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經醯胺的含量達95. 5%。本發明的有益效果是採用適當的乙醇濃度、固液比、溫度、浸泡方法和時間、以及超聲波提取，可以提高神經醯胺成分從魔芋飛粉中滲透出來的分量，提高提取率；再通過多次萃取和採用適當的溶媒組合及其比例通過矽膠柱進行梯度洗脫，可以提高神經醯胺的純度，本發明從魔芋飛粉中提取神經醯胺的提取率達75%，純度達95. 5%。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步說明。實施例I。取魔芋飛粉1kg，用70%的乙醇溶液5kg在70°C溫度下攪拌浸泡lOmin，再用600W功率的超聲波提取40min，然後再攪拌浸泡lOmin，然後將提取浸出液離心，取上清液；然後再將濾渣用95%的乙醇溶液4kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然後再攪拌浸泡lOmin，將提取浸出液離心，取上清液，最後將兩次上清液合併；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉蒸發儀濃縮得到黏稠狀物質50. 5g ;然後用100毫升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40min，然後靜置分層30min，收集石油醚相；然後再重複兩次；合併石油醚相，濃縮，獲得神經醯胺浸膏23. 7g ;將矽膠溼法裝柱並用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經醯胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，採用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後乾燥得神經醯胺粗品7. 12g ;再次梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用乙醇-水洗脫劑平衡後，將神經醯胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解後上樣，採用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後真空冷凍乾燥得神經醯胺粉粒I. 21g ;經HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經醯胺的含量為95. 5%，原飛粉中神經醯胺的含量為O. 152%，提取率為76. 02%。 實施例2。取魔芋飛粉100kg，用70%的乙醇溶液600kg在70°C溫度下攪拌浸泡15min，再用600W功率的超聲波提取40min，然後再攪拌浸泡15min，然後將提取浸出液離心，取上清液；然後再將濾渣用95%的乙醇溶液500kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然後再攪拌浸泡15min，將提取浸出液離心，取上清液，最後將兩次上清液合併；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉蒸發儀濃縮得到黏稠狀物質4. 97kg ;然後用10升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取45min，然後靜置分層30min，收集石油醚相；然後再重複兩次；合併石油醚相，濃縮，獲得神經醯胺浸膏2. 25kg ;將矽膠溼法裝柱並用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經醯胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，採用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後乾燥得神經醯胺粗品657g ;再次梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用乙醇-水洗脫劑平衡後，將神經醯胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解後上樣，採用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後真空冷凍乾燥得神經醯胺粉粒118g ;經HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經醯胺的含量為95. 1%，原飛粉中神經醯胺的含量為O. 152%，提取率為73. 82%。實施例3。取魔芋飛粉1000kg，用70%的乙醇溶液5500kg在70°C溫度下攪拌浸泡20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然後再攪拌浸泡20min，然後將提取浸出液離心，取上清液；然後再將濾渣用95%的乙醇溶液4500kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min,然後再攪拌浸泡20min，將提取浸出液離心，取上清液，最後將兩次上清液合併；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉蒸發儀濃縮得到黏稠狀物質48. 9kg ;然後用100升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取50min，然後靜置分層30min，收集石油醚相；然後再重複兩次；合併石油醚相，濃縮，獲得神經醯胺浸膏22. 2kg ;將矽膠溼法裝柱並用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經醯胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，採用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後乾燥得神經醯胺粗品6. 37 kg ;再次梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用乙醇-水洗脫劑平衡後，將神經醯胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解後上樣，採用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液，然後蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後真空冷凍乾燥得神經醯胺粉粒1151g ；經HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經醯胺的含量為94. 8%，原飛粉中神經醯胺的含量為O. 152%，提取率為71. 79%。
權利要求
1.從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、乾燥、再次梯度洗脫和乾燥八大工序完成，其特徵在於具體方法如下 ⑴選料收集魔芋飛粉，去掉雜質； ⑵綜合提取將魔芋飛粉用70%的乙醇溶液按照固液比為I :5-6的標準在70°C溫度下攪拌浸泡10-20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然後再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液；然後再將濾渣用95%的乙醇溶液按照固液比為I :4-5的標準在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然後再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液，最後將兩次上清液合併； 濃縮蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉蒸發儀濃縮至黏稠狀； ⑷萃取將濃縮液用3-5倍體積的石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40-50min，然後靜置分層30min，收集石油醚相；然後再重複兩次；合併石油醚相，濃縮，獲得神經醯胺浸膏； (5)梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用洗脫劑平衡後，將神經醯胺浸膏上樣，採用石油醚-乙酸乙酯溶劑溶解並梯度洗脫，洗脫液的梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液； (6)乾燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後乾燥得神經醯胺粗品; ⑴再次梯度洗脫將矽膠溼法裝柱並用洗脫劑平衡後，將神經醯胺粗品用洗脫劑溶解後上樣，採用乙醇-水為溶劑溶解並梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合併具有相同成分的流出液； ⑶乾燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集後真空冷凍乾燥得神經醯胺粉粒。
全文摘要
從魔芋飛粉中提取神經醯胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、乾燥、再次梯度洗脫和乾燥八大工序完成；其有益效果是採用適當的乙醇濃度、固液比、溫度、浸泡方法和時間、以及超聲波提取，可以提高神經醯胺成分從魔芋飛粉中滲透出來的分量，提高提取率；再通過多次萃取和採用適當的溶媒組合及其比例通過矽膠柱進行梯度洗脫，可以提高神經醯胺的純度，本發明從魔芋飛粉中提取神經醯胺的提取率達75%，純度達95.5%。
文檔編號C07C235/08GK102675139SQ20121013320
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月3日 優先權日2012年5月3日
發明者周麟 申請人:重慶市彭水縣天嬌農業開發有限公司