甲基裡帕色烯A在製備治療痛風藥物中的應用的製作方法
2023-11-30 04:27:51
本發明涉及醫藥
技術領域:
,具體的涉及甲基裡帕色烯A(methylripariochromeneA)在製備治療痛風藥物中的應用。
背景技術:
:高尿酸血症和痛風已成為現代生活的文明病之一,是一種由於體內嘌呤合成代謝增多,尿酸產生超量或因尿酸排洩不良而導致血中尿酸升高,高尿酸血症只是痛風疾病的一個生化標誌。痛風的臨床表現常分為急性期、間歇期、慢性期和腎臟病變等,主要表現為痛風性關節炎和痛風性腎病。腎臟病變的發生是長期高尿酸血症發展的結果,高尿酸血症患者腎臟病理檢查幾乎均有不同程度的損害,大約1/3患者在病程中出現腎臟症狀。關於高尿酸血症的治療,繼發性高尿酸血症主要針對其基礎疾病進行治療,而原發性高尿酸血症的治療,一般採用飲食、運動控制加以藥物治療。抑制尿酸生成藥物主要機制為抑制黃嘌呤氧化酶(XO)的活性。別嘌醇是這類藥的代表,一直以來都是抗痛風的臨床一線藥物,雖然降尿酸效果顯著,但對腎臟的保護功能甚弱。本發明涉及的化合物甲基裡帕色烯A,可從腎茶中提取得到。本發明將其用作製備抗通風藥物為首次公開。技術實現要素:本發明的目的在於提供甲基裡帕色烯A在製備治療痛風藥物中的應用,為了實現本發明的目的,擬採用如下技術方案:本發明一方面涉及甲基裡帕色烯A在製備治療痛風藥物中的應用,所述的化合物的結構式為:在本發明的一個優選實施方式中,所述的藥物中包括或者不包括其它活性成分。在本發明的一個優選實施方式中,所述的藥物不含有其它活性成分,還含有藥學上可接受的輔料。本發明為痛風病人提供了新的治療藥物,具有劑量低、療效好的特點。具體實施方式若未特別說明,實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。實施例1下面通過藥效學實驗來進一步說明其藥物活性。實驗例1:甲基裡帕色烯A抗急性痛風炎症實驗:1、方法①溶液配製5g尿酸加1000ml蒸餾水煮沸,加5%NaOH溶液調pH7.4,攪拌,冷卻析晶製成尿酸鈉結晶(MSU)。將制好的MSU10mg高壓滅菌,加不含血清的DMEM培養液10ml,研磨配成1mg/ml的DMEM溶液。實驗時,此溶液再加DMEM培養液配成不同濃度DMEM的MSU溶液。甲基裡帕色烯A2.5mg,用乙醇溶解,終濃度<0.02%,再加無血清的DMEM培養液,配製成濃度2.5ug/ml、25ug/ml、250ug/ml。陽性藥吲哚美辛2.0mg,方法同甲基裡帕色烯A,配製濃度20ug/ml。②血管內皮細胞的體外培養人臍靜脈血管內皮細胞HUVEC株,由廣西某醫學院提供,細胞經支原體檢測,無支原體汙染,細胞經0.25%胰蛋白酶消化,含10%小牛血清的DMEM培養液中和,離心(1000r/min×6min),去上清液,加含10%小牛血清的DMEM培養液,移入細胞培養瓶中,放37℃、5%CO2培養箱中傳代培養。③對MSU刺激HUVEC活力的影響HUVEC在培養瓶中培養,待生長至70%~80%融合時,以0.25%胰蛋白酶消化、離心,10%小牛血清DMEM培養液洗滌3次,用10%小牛血清DMEM培養液調成4×104/ml細胞懸液,植入96孔板(每孔200ul),培養24小時後輕吸出原培養液,進行以下實驗,每組各8孔,具體分組及加液如下:對照組(200ulDMEM培養液)、模型組(100ug/mlMSU溶液)、幹預A組(100ug/mlMSU溶液+2.5ug/ml甲基裡帕色烯A)、幹預B組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml甲基裡帕色烯A)、幹預C組(100ug/mlMSU溶液+250ug/ml甲基裡帕色烯A),加液後繼續放37℃、5%CO2培養箱中培養24小時,收集上清液,剩餘的HUVEC用於測定細胞活性,每孔再加5mg/mlMTT液20ul,繼續放37℃、5%CO2培養箱中培養4小時後,棄MTT液,加入二甲基亞碸200ul溶解,震蕩,於酶標儀讀取吸光度值,波長490nm。陽性藥組加液(100ug/mlMSU溶液+20ug/ml吲哚美辛),其他方法同上。數據統計學處理,細胞活力(%)=實驗組吸光度值/對照組吸光度值×100%,結果見表1。與對照組相比,模型組細胞活力顯著減小(P<0.01,P<0.05),陽性藥吲哚美辛及甲基裡帕色烯A幹預後細胞活力顯著提高(P<0.01,P<0.05),並強於對照組,其中,甲基裡帕色烯A各濃度組的細胞活力強於陽性藥吲哚美辛。表1甲基裡帕色烯A對MSU刺激的血管內皮細胞活力的影響(X±s)組別藥物濃度(微克/毫升)n/孔細胞活力(%)對照組08100模型組0886陽性藥物208106幹預A組2.58179幹預B組258212幹預C組2508207④對ICAM-1表達影響將處於對數生長期的HUVEC用0.25%的胰蛋白酶消化,輕輕吹打,製成細胞懸液,調整細胞密度為5×109/L,接種於細胞培養瓶中。待細胞長滿後(約24h),棄去上清液,分為下列組:對照組、模型組(100ug/mlMSU溶液)、甲基裡帕色烯A組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml甲基裡帕色烯A),繼續培養24小時,PBS收集細胞,離心去上清,加入CD54單克隆抗體,30min後,PBS洗滌,重懸細胞,應用流式細胞儀檢測其陽性細胞百分率(n=10000),重複3次,結果見表2。表2甲基裡帕色烯A對MSU刺激的血管內皮細胞ICAM-1表達的影響(X±s)組別藥物濃度ICAM表達對照組014±3模型組0238±66甲基裡帕色烯A組25138±44與模型組比較,**P<0.01*P<0.05,與對照組比較,##P<0.01#P<0.052、結果結果顯示,空白組HUVEC幾乎無ICAM-1表達,模型組ICAM-1的表達最高,與模型組相比,甲基裡帕色烯A對ICAM-1的表達有較強的抑制作用。結論:用MSU致HUVEC損傷的急性痛風模型評價顯示,甲基裡帕色烯A可保護MSU致HUVEC損傷,減少細胞凋亡,提高細胞活性,抑制ICAM-1表達,具有抗痛風活性,甲基裡帕色烯A可用於製備治療急性痛風炎症藥物。以上所述是本發明的優選實施例,應當指出,對於本
技術領域:
的普通技術人員來說,在不脫離本發明所述原理的前提下,還可以作出若干改進和潤飾,這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。當前第1頁1 2 3