一種用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑的製作方法

2023-12-03 06:38:51

專利名稱：一種用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物製劑，具體地說，涉及一種用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑。
背景技術：
子宮內膜炎是哺乳動物如奶牛、豬等的常見病。病因複雜，發病率高。奶牛子宮內膜炎的發病率在15% -20%之間，而豬場該病的發病率在30%左右。子宮內膜炎可造成子宮復舊時間延長，使發情周期紊亂。炎性滲出物可改變子宮內環境的酸鹼度，不利於精子和卵子的生存，使受胎率下降，導致不孕，同時還可長期刺激子宮內壁感受器，通過反射，使激素調節失調，引起卵巢疾病。另外還可繼髮乳房炎等。目前世界上治療子宮內膜炎均使用抗生素，但是抗生素治療存在許多不利因素。 如(1)容易使細菌產生耐藥性；( 單一藥物抗菌譜不廣；C3)容易造成抗生素殘留；(4)其它副作用。近年來由於抗生素的大量使用，耐藥菌株不斷出現，尤其是金黃色葡萄球菌對多種抗生素產生耐藥性，且耐藥性呈明顯上升趨勢，難於治療。歐美國家早在40多年前就投入大量人力、物力研究替代抗生素的藥物但至今尚無明確結果。溶葡萄球菌酶是一種革蘭氏陽性菌的溶菌素，能夠迅速裂解細菌殺死細菌，作用時間短，細菌不容易產生耐藥性，同時殺菌效果好，對耐甲氧苯青黴素(MRSA)的金黃色葡萄球菌同樣有較強的殺菌能力。1991年，美國普林斯頓Cyanamid公司農業研究所的Oldham ER等用溶葡萄球菌酶治療耐藥性金黃色葡萄球菌引起的奶牛乳腺炎，證明了溶葡萄球菌酶對於治療此病的有效性。次年他們又研究了局部使用重組溶葡萄球菌酶治療奶牛乳腺炎時引起體內的免疫反應，認為重組溶葡萄球菌酶作為體內注射劑是有效和安全的，並提出溶葡萄球菌酶可以替代傳統的抗生素。溶菌酶是一種能水解致病菌中黏多糖的鹼性酶。主要通過破壞細胞壁中的N-乙醯胞壁酸和N-乙醯氨基葡糖之間的β_1，4糖苷鍵，使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導致細胞壁破裂內容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活。能專一性的作用於目地微生物的細胞壁，對革蘭氏陽性菌、好氣性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣芽孢桿菌等都有抗菌作用。將溶菌酶和溶葡萄球菌酶按一定比例混合後製成複合酶，具有更廣的殺菌譜，抑殺菌效果優於單酶。中國專利ZL03142299. 3( —種用於預防和治療奶牛子宮內膜炎的製劑及其製備方法)，公開了用溶葡萄球菌酶、溶菌酶、抑菌肽和醫學上可以接受的載體製成的製劑，可以預防和治療奶牛子宮內膜炎。中國專利ZL200510028617.5(—種用於防治牛子宮內膜炎的溶葡萄球菌酶凍乾粉劑)，公開了採用溶葡萄球菌酶凍乾粉劑治療奶牛子宮內膜炎及其製備方法。然而凍乾粉劑在給藥前需要臨時以水復溶，給藥較為不便。而且以水溶液方式給藥，藥液黏度小，不易與子宮黏膜作用，在短時間內即被排出體外。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在於提供一種用於哺乳動物子宮內膜炎的生物殺菌泡騰栓劑，以克服現有技術存在的使用不便，治療中用藥物多次過量衝洗子宮致子宮復原受到影響，子宮內藥物分布面積小，留存時間短，與黏膜液化的相互作用弱，不利於滲入到子宮黏膜的缺點。本發明的構思是這樣的泡騰栓屬於栓劑中的一種特殊劑型，由藥物與基質、適量輔料、表面活性劑及酸鹼系統(泡騰崩解劑)混合製成。泡騰栓遇體液或水，其中的酸和鹼起化學反應產生二氧化碳氣體而使泡騰栓泡騰崩解，溶解釋藥，並與表面活性劑作用形成泡沫。起初在栓劑表面淺層發生中和反應，產生的二氧化碳氣體逸出使其形成很多孔洞，以利於水分深入栓劑內層， 使酸鹼系統繼續反應產生大量二氧化碳。一方面形成一定的壓力，令其他崩解劑膨脹使栓劑脹裂，另一方面二氧化碳氣體逸出，有利於水分繼續進入栓劑內部，促使整個栓劑在較短時間內泡騰崩解、溶解釋藥。栓劑的基質分為水溶性和油溶性。在基質篩選方面，考慮到無水環境有利於酶活性的長期保持，而水溶性基質在製備過程中或多或少需加入水分，本發明選擇了對酶活性長期保持更為有利的油溶性基質。半合成脂肪酸甘油酯作為最常用的栓劑油溶性基質具有成本較低，熔點恆定等優點，因此被選用。在對複合酶泡騰栓酸鹼系統進行篩選時發現，大多數常用的酸鹼對酶的活性有抑制作用，可能是鹽析作用或者是發泡過程過於劇烈導致蛋白質結構發生改變引起酶的失活。而表面活性劑也是影響蛋白質的因素之一。吐溫-80是泡騰製劑最常用的表面活性劑， 具有用量少，起泡迅速，泡沫細膩持久的優點。但在對輔料進行篩選的過程中發現，吐溫-80 會降低複合酶的活性。為保持泡騰過程中酶的活性，保證藥效，本發明對崩解系統和表面活性劑進行了考察並引入了 HPMC和F68這兩種目前在泡騰製劑中較少應用的輔料。羥丙基甲基纖維素(HPMC)為纖維素衍生物，應用於食品及藥劑已有40年以上的歷史，收載於美國藥典19-23版，是具有較為廣泛的優良性能的藥用高分子材料。HPMC在藥劑中已普遍用作增稠劑、薄膜包衣劑、緩釋製劑致孔材料、親水凝膠劑，也可作固體分散劑材料，以提高藥品的穩定性和難溶性藥物的生物利用度等。在泡騰製劑的生產上，HPMC常被用作泡騰片崩解劑以加快藥物釋放，在泡騰栓中則鮮有使用。本發明中HPMC除了作為輔助崩解劑加快栓劑的崩解釋放外，其作為表面活性劑還能夠促進藥物的吸收，增加泡沫的體積和細膩程度，從而增加其與子宮黏膜的接觸面積，並使其更易滲入普通製劑不易到達的褶皺深處。HPMC作為一種高分子材料，具有一定的保持蛋白質穩定的作用，有助於保持酶的活性。而其具有的黏性能夠使有效成分在更長的時間內粘附於子宮內壁，避免過快地被排出體外。泊洛沙姆188 (F68)在製藥領域常用作乳劑、軟膏劑和混懸劑的潤滑劑，片劑或膠囊的增溶劑和分散劑，也可作為固體分散劑的載體，並且是目前應用於靜脈注射的唯一人工的乳化劑，平均分子量為7680-9510。F68作為一種表面活性劑，在細胞保護方面也顯示出獨特的作用。F68的HLB值為四，具有較強的表面活性作用。在本發明中，其作為表面活性劑能夠產生更多的泡沫，不僅能增加藥物與黏膜的接觸面積，而且可以增強制劑向子宮內膜的滲透，增強其殺菌作用的發揮，同時增強酶的穩定性。另外F68具有一定形成凝膠的做用，與HPMC共同作用形成的凝膠能夠延長複合酶在子宮內保留的時間。本發明的技術方案如下一種治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑，其組成及重量百分含量包括，溶葡萄球菌酶0. 004 0.01%，溶菌酶0. 1 4%，半合成脂肪酸甘油酯10 80%，泊洛沙姆 188 (F68) 1 20 %，HPMCl 20 %，碳酸氫鈉5 50 %，磷酸二氫鈉5 50 %。所述及的治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑，其優選配方的組成及重量百分比包括溶葡萄球菌酶0. 004 0. 008 %，溶菌酶2 4%，半合成脂肪酸甘油酯20 70 %，泊洛沙姆188 (F68) 2 10 %，HPMC2 10 %，碳酸氫鈉10 30 %，磷酸二氫鈉10 30 %。具體製法如下按上述比例稱取溶葡萄球菌酶、溶菌酶、F68、HPMC、碳酸氫鈉、磷酸二氫鈉。所有物料均粉碎，過80目篩，混勻，加入到50°C熔融的半合成脂肪酸甘油酯中，迅速倒入栓劑模型中成型即可。將溶葡萄球菌酶和溶菌酶複合製備成泡騰栓劑，子宮內給藥。不僅給藥方便，而且複合酶泡騰栓能夠在體液的作用下泡騰崩解，使藥物混合於泡沫中快速釋放。與凍乾粉劑及普通栓劑相比，泡騰栓中藥物與黏膜的接觸面積更大，而其中添加的表面活性劑及高分子材料有助於增加藥物與黏膜的接觸，使藥物能滲入黏膜褶皺深部，延長藥物與黏膜作用時間，提高局部組織藥物濃度，進而增強治療效果，有效殺滅引起子宮內膜炎的各種病原菌。此外，泡騰栓劑含有的酸性成份，可形成抑制厭氧菌生長的偏酸性環境，更有利於殺滅厭氧菌。HPMC和F68崩解後形成凝膠，能維持酶活的穩定並延長有效成分在子宮內的保留時間，最大限度發揮藥物的作用，獲得更好的治療效果。本發明公開的溶葡萄球菌酶栓劑具有如下特點1、釋放迅速，37°C下15min釋放完全。所產生的氣泡細小而持久，使藥物均勻分布在大量泡沫中很快打散分布在子宮內膜各空隙處，使藥物迅速發揮療效。2、克服了酶遇常規崩解劑和表面活性劑失去活性的情況，殺菌效果強。該製劑對哺乳動物子宮內膜炎病菌具有很強的殺菌作用。體外實驗可以有效殺滅革蘭氏陽性菌和陰性菌。3、穩定性好。本品在25°C常溫保存2年，生物活性基本沒有改變。在製劑的儲存和運輸方面優於凍乾粉。4、本發明為生物製劑，克服了傳統化學類製劑對子宮黏膜具有刺激性，細菌容易產生耐藥性的缺點。易被機體所接受，無毒副作用。5、採用局部給藥的方式，給藥方便。與凍乾粉相比不需要另外溶解，給藥方便。
具體實施例方式實施例1複合酶栓劑製備方法1 (配方1)1、組成和配比溶葡萄球菌酶0.007%、溶菌酶0. 1%、F6820%、HPMC 10%、碳酸氫鈉10%、磷酸二氫鈉30%、半合成脂肪酸甘油酯29. 893%。2、配製
稱取溶葡萄球菌酶0. 007g、溶菌酶0. lg、F6820g、HPMC 10g、碳酸氫鈉10g%、磷酸二氫鈉30g。以上原料粉碎過80目篩，混勻，與四.8938熔融半合成脂肪酸甘油酯均勻混合，迅速倒入栓劑模具中成型即可。實施例2複合酶栓劑製備方法2 (配方2)1、組成和配比溶葡萄球菌酶0.004%、溶菌酶2%、F6810%、HPMC 20%、碳酸氫鈉20%、磷酸二氫鈉10%、半合成脂肪酸甘油酯37. 996%。2、配製稱取溶葡萄球菌酶0. 004g、溶菌酶2g、F6810g、HPMC 20g、碳酸氫鈉20g%、磷酸二氫鈉10g。以上原料粉碎過80目篩，混勻，與37. 996g熔融半合成脂肪酸甘油酯均勻混合， 迅速倒入栓劑模具中成型即可。實施例3複合酶栓劑製備方法3 (配方3)1、組成和配比溶葡萄球菌酶0. 01%、溶菌酶4%、F681%、HPMC 1 %、碳酸氫鈉30%、磷酸二氫鈉 20%、半合成脂肪酸甘油酯43. 99%。2、配製稱取溶葡萄球菌酶0. Olg、溶菌酶4g、F681g、HPMC lg、碳酸氫鈉30g%、磷酸二氫鈉20g。以上原料粉碎過80目篩，混勻，與43. 99g熔融半合成脂肪酸甘油酯均勻混合，迅速倒入栓劑模具中成型即可。實施例4栓劑的體外藥效學實驗1、實驗器材實驗菌株金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)；大腸桿菌(ATCC 11229)；磷酸鹽緩衝溶液(PBS 0. 03mol/L pH7. 2)2、實驗方法取實施例1、實施例2、實施例3製備的栓劑各一枚，於37°C水浴釋放。取出待冷卻後棄去上層基質及泡沫，取下層水溶液以MH肉湯稀釋成系列濃度，待測。將實驗菌24h斜面培養物用PBS洗下，製成0. 5麥氏比濁標準的菌懸液，用MH肉湯將上述菌懸液進行1 100稀釋。將栓劑釋放所得系列濃度溶液以1 1的比例與菌懸液混合。最終每管溶葡萄球菌酶濃度為10、5、2. 5,1. 25,0. 625,0. 31,0. 15U/mL，菌懸液濃度為5X 105CFU/mL。置37°C培養18 M小時，觀察澄清度。3、實驗結果表1各配方複合酶泡騰栓劑體外抑菌效果
權利要求
1.一種用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑，特徵在於，以重量百分比計，其組成包括，溶葡萄球菌酶0. 004 0.01%，溶菌酶0. 1 4%，半合成脂肪酸甘油酯10 80%，泊洛沙姆188 (F68) 1 20 %，HPMCl 20 %，碳酸氫鈉5 50 %，磷酸二氫鈉5 50 %。
2.如權利要求1所述的用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑，其特徵在於，優選配方的組成及重量百分比包括溶葡萄球菌酶0. 004 0. 008%，溶菌酶2 4%，半合成脂肪酸甘油酯20 70%，泊洛沙姆188(F68)2 10%，HPMC2 10%，碳酸氫鈉10 30%，磷酸二氫鈉10 30%。
全文摘要
本發明屬於醫藥技術領域，具體的說涉及一種用於治療哺乳動物子宮內膜炎的栓劑。本發明公開的製劑組成及其重量百分含量包括溶葡萄球菌酶0.004～0.01％，溶菌酶0.1～4％，半合成脂肪酸甘油酯10～80％，泊洛沙姆188(F68)1～20％，HPMC1～20％，碳酸氫鈉5～50％，磷酸二氫鈉5～50％。本發明製劑通過給藥進入哺乳動物子宮後，能夠在體液的作用下泡騰崩解，使藥物混合於泡沫中快速釋放，藥物與子宮黏膜的接觸面積更大，使藥物能滲入黏膜褶皺深部，延長藥物與黏膜作用時間，提高局部組織藥物濃度，進而增強治療效果，有效殺滅引起子宮內膜炎的各種病原菌。
文檔編號A61K9/02GK102552888SQ20101058468
公開日2012年7月11日 申請日期2010年12月10日 優先權日2010年12月10日
發明者李國棟, 汪益涵, 陸錦春, 黃青山 申請人:上海高科生物工程有限公司, 上海高科聯合生物技術研發有限公司, 崑山博青生物科技有限公司