四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用的製作方法

2023-12-04 02:59:36 1

四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，所述四葉參可以選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發酵物。本發明通過動物水平實驗證明了四葉參蜂蜜組合物具有催乳的功效，經發酵得到的四葉參發酵物，具有生物利用度高，吸收完全等優點，可以促進四葉參催乳功效的最大發揮。四葉參蜂蜜組合物和發酵物均可以顯著增加大鼠的泌乳量，提高血清催乳素的水平，促進催乳素的分泌，同時還通過毒性實驗證明四葉參對動物體的生長無不良反應，所以將四葉參用於製備催乳製劑具有良好的市場應用前景。
【專利說明】四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用
【技術領域】
[0001 ] 本發明具體涉及四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用。
【背景技術】
[0002]產後缺乳是指分娩後乳腺泌乳量小，不能滿足餵養嬰兒的需要。母乳餵養有利於嬰兒的健康，但近年來，由於高齡產婦增多，加之剖宮產率的上升，以及妊娠期營養不足、精神過度緊張等諸多因素，產後缺乳的現象呈上升趨勢，尤其在城市婦女中該症狀較為常見。2012年衛生部發布信息顯示，我國母乳餵養率僅為30%。所以，如何有效地治療產後缺乳，是迫切需要解決的問題。 [0003]乳汁的合成及泌乳是一個複雜的生理過程，包括多種內分泌的參與和影響，其中垂體分泌的催乳素(PRL)在泌乳啟動和維持中起著重要作用。在妊娠期因雌激素和孕激素的作用，血中催乳素濃度是正常時的10~20倍以上，促使乳腺進一步發育，但由於雌激素、孕激素與催乳素競爭同乳腺受體的結合，此時雖然催乳素濃度較高，但孕婦並不泌乳。胎盤娩出後，雌激素、孕激素水平迅速下降，解除了對丘腦下部及垂體的抑制作用，催乳素抑制因子(PIF)分泌減少，PRL與乳腺受體結合，開始泌乳。產後缺乳的成因主要是情緒緊張或疲勞過度影響垂體前葉催乳素的分泌，導致乳汁減少或斷奶。另外，營養不足、出血過多、藥物影響等因素也可導致乳汁分泌減少。
[0004]針對產後缺乳的治療，西醫目前尚缺乏有效的治療措施，臨床報導不多。據調研，泰必利、維生素E、甲氧氯普胺(滅吐靈)、奮乃靜等藥物有催乳的作用。但這些西藥副反應明顯，泰必利的不良反應為思睡、輕度頭昏、乏力，偶見噁心、胸悶、興奮、皮疹等，大劑量(400mg/d)維生素E長期(>10d)使用，可能產生胃腸不適、倦怠無力、生殖功能障礙、高血壓、骨骼肌無力、靜脈炎、以及免疫功能下降等不良反應。一項隨機雙盲安慰劑對照試驗結果顯示:滅吐靈IOmg tidX IOd與安慰劑對照組相比並不增加乳汁量，因此其催乳作用尚需進一步研究證實。多潘立酮可導致心律失常甚至心源性猝死，且乳汁進入嬰兒體內會造成不可預料的不良影響，目前美國食品藥品管理局已禁止使用多潘立酮用於催乳。以上藥物由於療效不確切，可能存在不良反應，一直未被廣大患者接受，均未能廣泛應用於臨床。
[0005]而中醫藥治療產後缺乳有著悠久的歷史，臨床實踐中也取得了較好的療效，也得到了現代藥理實驗的驗證。據報導，通草、王不留行和葛根等中藥具有提高缺乳模型大鼠血紅蛋白量、紅細胞數，提高血中PRL水平和降低多巴胺DA水平，增加乳腺細胞的數量並且其組織形態學未發現變化，增加大鼠泌乳量和仔鼠體重等作用。傳統醫學認為乳汁由衝任氣血生化，下則為經，上則為乳。若氣血虧虛，津液不足，則致乳汁減少或不足；或七情所傷，肝氣鬱結可致乳脈不行而缺乳。宋.陳自明《婦人大全良方.產後乳少或止方論》謂..「婦母乳汁，乃氣血所化，若元氣虛弱，則乳汁短少，初產乳房欣脹，此乳未通，……若累產無乳，此內亡津液」，明確提出了缺乳的病機。金.張子和《儒門事親.卷五》雲:「婦人本生無乳者不治，或因啼哭悲怒鬱結，氣溢閉塞，以致乳脈不行」。故產後缺乳多因「氣血生化之源不足，機體虛弱或因肝鬱氣滯，乳汁運行受阻所致」，氣血虧虛，肝鬱氣滯，經絡閉塞為缺乳的主要病機。可見，在中醫藥治療產後缺乳方面，形成了ー套比較完整的理論體系，對產後缺乳的病因、病機、治療都有獨特的見解。中醫藥治療產後缺乳具有廣闊的應用前景。

【發明內容】

[0006]本發明提供了四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，本發明通過尋找天然無毒、安全可靠的催乳藥物來源，解決了人工合成催乳藥副作用大的問題。
[0007]為實現上述發明目的，本發明採用下述技術方案予以實現:
[0008]本發明提供了四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用。
[0009]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發酵物。
[0010]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參為嶗山四葉參。
[0011]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參蜂蜜組合物的製備方法為:將四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合併，離心分離得上清液，減壓濃縮乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物，將四葉參提取物與槐花蜂蜜質量比8:1混合,得四葉參蜂蜜組合物。
[0012]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參發酵物的製備方法為:將四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合併，離心分離得上清液，離心後上清液經減壓濃縮至適量體積，滅菌；加入佔四葉參質量比為10%的嗜熱鏈球菌ST4菌粉，42°C發酵10h，發酵液減壓乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
[0013]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參可以提高泌乳量。
[0014]對上述技術方案的進ー步改進:所述四葉參能提高血清催乳素水平。
[0015]與現有技術相比，本發明的優點和積極效果是:本發明通過動物水平實驗證明了四葉參蜂蜜組合物具有催乳的功效，經發酵得到的四葉參發酵物，具有生物利用度高，吸收完全等優點，可以促進四葉參催乳功效的最大發揮。四葉參蜂蜜組合物和發酵物均可以顯著增加大鼠的泌乳量，提高血清催乳素的水平，促進催乳素的分泌，同時還通過毒性實驗證明四葉參對動物體的生長無不良反應，所以將四葉參用於製備催乳製劑具有良好的市場應用前景。
[0016]結合附圖閱讀本發明的【具體實施方式】後，本發明的其他特點和優點將變得更加清
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【專利附圖】

【附圖說明】
[0017]圖1為本發明中正常組乳腺組織光鏡切片。
[0018]圖2為本發明中模型組乳腺組織光鏡切片。
[0019]圖3為本發明中四葉參蜂蜜組合物組乳腺組織光鏡切片。
[0020]圖4為本發明中四葉參發酵組乳腺組織光鏡切片。
[0021]圖5為本發明中陽性組乳腺組織光鏡切片。
[0022]圖6為本發明中正常組垂體組織光鏡切片。
[0023]圖7為本發明中模型組垂體組織光鏡切片。[0024]圖8為本發明中四葉參蜂蜜組合物組垂體組織光鏡切片。
[0025]圖9為本發明中四葉參發酵組垂體組織光鏡切片。
[0026]圖10為本發明中陽性組垂體組織光鏡切片。
[0027]圖11為本發明中驗證四葉參具有催乳作用的實驗流程圖。
【具體實施方式】
[0028]下面結合附圖和【具體實施方式】對本發明的技術方案作進一步詳細的說明。 [0029]實施例1
[0030]本發明通過實驗驗證四葉參具有催乳作用的實驗流程圖如圖11所示。
[0031]一、四葉參催乳作用的藥效學研究
[0032]1、試驗材料
[0033](I)四葉參，青島流清河森寶生物科技開發有限公司提供，青島大學醫學院周三副教授鑑定。
[0034](2)槐花蜂蜜:500克/瓶，蒙陰深山蜜坊蜂業有限公司生產，產品標準號:符合蜂蜜國標GB18796要求。
[0035](3)嗜熱鏈球菌ST4菌粉:200克/袋，內蒙古普澤生物製品有限責任公司生產，活菌數 I X 101ICFU/ 克，執行標準 Q/PZSW 0014S-2010。
[0036](4)乳泉顆粒:15克/袋，四川志遠廣和有限公司生產，生產批號:060101，批准文號:國家準字Z51020010。
[0037](5)甲磺酸溴隱亭片:2.5mg/片，匈牙利吉瑞大藥廠生產，進口藥品註冊證號:H20110116，進口藥品註冊標準JX20100204，生產批號:T29400A。臨用前用生理鹽水配製成0.05mg/ml的藥液。
[0038](6)大鼠(Rat)催乳素(PRL) ELISA試劑盒，試劑盒貨號:CK_E30594R。
[0039](7)生理鹽水:500ml，4.5g，山東齊都藥業有限公司生產，國家準字號:H37020766，產品批號:8B13010402。
[0040](8) SD大鼠，雌雄兼有(雌:雄=3:1)，72隻，雌鼠體重250g左右，雄鼠體重350-400g,由青島市藥檢所實驗動物中心提供，清潔級動物，合格證號:0014107。
[0041]2、試驗方法
[0042](I)分組方法:選用成年健康清潔級SD大鼠72隻，雌雄比例3:1合籠飼養，雌鼠未經孕產，18d後，取出雄鼠，同時將雌鼠每籠一隻飼養。取產仔時間前後相差不超過24h的40隻母鼠作為實驗對象，使每隻母鼠帶仔鼠8隻，多餘的棄掉。
[0043]將篩選出的40隻母鼠按體重隨機分為5組:正常組、模型組、四葉參蜂蜜組合物組、四葉參發酵組及陽性對照藥物乳泉顆粒組。
[0044](2)造模方法:各組於產後第2d起溴隱亭灌胃造模(正常組除外)，連續7d。
[0045](3)給藥方法:於產後第2天起，正常組以每天每隻10ml/kg的蒸餾水灌胃，每天I次；四葉參蜂蜜組合物組於產後第2d起給予四葉參蜂蜜組合物15g.kg—1 (相當於含生藥量)ig ;四葉參發酵組於產後第2d起給予四葉參發酵物15g.k^1 (相當於含生藥量)ig ;陽性對照組乳泉顆粒灌胃，連續7d。各組動物均予正常飲食。
[0046](4)四葉參蜂蜜組合物製備方法:取四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，6倍蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾,將兩次濾液合併，3000rpm離心15分鐘，分離上清液，減壓濃縮乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物。將四葉參提取物與槐花蜂蜜質量比8:1混合，得四葉參蜂蜜組合物。
[0047] 四葉參發酵物製備方法:取四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，6倍蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾,將兩次濾液合併,3000rpm離心15分鐘，離心後上清液經減壓濃縮至適量體積。120°C，20min滅菌。加入嗜熱鏈球菌ST4菌粉10%(每100克四葉參幹品加入IOg菌粉)，42°C發酵10h。發酵液減壓乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
[0048]甲磺酸溴隱亭片臨用前用生理鹽水配製成0.05mg/ml的藥液,齊Li量為0.5mg/kg,按每天每隻10ml/kg灌胃造模(正常組除外)，連續7d。
[0049](5)計算泌乳量及仔鼠體重:每日晨9時用精密電子天平稱每窩仔鼠體重，然後將仔鼠與母鼠分離，以每窩仔鼠總重量(g)/每窩仔鼠個數為平均體重，觀察平均每隻仔鼠每日體重的變化；仔鼠與母鼠分離4h後，再次稱量全窩仔鼠體重作為餵乳前體重值，隨即將仔鼠送回母鼠身邊哺乳餵養；3h後第三次稱量全窩仔鼠體重作為餵乳後體重值。並每日稱量母鼠的體重，連續觀察7d。
[0050]計算每日母鼠3h平均泌乳量[(餵乳後體重值-餵乳前體重值)/仔鼠個數]，仔鼠體重增長率[(當日離乳體重值-第I日離乳體重值)/第I日離乳體重值]。所得數據進打t檢驗。
[0051](6)催乳素(PRL)的測定:於給藥後第8d，將5組大鼠腹主動脈取血2ml。室溫靜置2h、3500r/min離心15min,分離血清。用酶免法測定催乳素。
[0052](7)觀察乳腺及垂體的病理組織學變化--第8d，將5組母鼠處死，腦垂體稱重，剝離乳腺，取乳腺及垂體，用10%甲醛分別固定，IOd後石蠟包埋切片，HE染色，於光學顯微鏡下進行乳腺及垂體的組織形態學檢查。
[0053]根據以上數據，通過計算母鼠泌乳量、母鼠體重變化、檢測血清催乳素(PRL)水平，觀察乳腺及垂體的病理組織學變化等指標，研究四葉參的催乳作用。
[0054]3、實驗結果
[0055]採用SPSS13.0統計軟體進行數據處理，各組數據均採用均數土標準差(x土 s)表示，組間差異性比較，採用t檢驗。
[0056]( I)四葉參對大鼠泌乳量的影響
[0057]表1.四葉參對產後缺乳模型大鼠的泌乳量的影響
【權利要求】
1.四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用。
2.根據權利要求1所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發酵物。
3.根據權利要求1或2所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參為嶗山四葉參。
4.根據權利要求2所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參蜂蜜組合物的製備方法為:將四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合併，離心分離得上清液，減壓濃縮乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物，將四葉參提取物與槐花蜂蜜按質量比8:1混合，得四葉參蜂蜜組合物。
5.根據權利要求2所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參發酵物的製備方法為:將四葉參切成薄片，乾燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合併，離心分離得上清液，離心後上清液經減壓濃縮至適量體積，滅菌；加入佔四葉參質量比為10%的嗜熱鏈球菌ST4菌粉，42°C發酵10h，發酵液減壓乾燥成幹浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
6.根據權利要求1所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參可以提高泌乳量。
7.根據權利要求1所述的四葉參在製備用於催乳的製劑中的應用，其特徵在於:所述四葉參能提高血清催乳素水平。
【文檔編號】A61K35/64GK103585248SQ201310624182
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月28日 優先權日:2013年11月28日
【發明者】彭曉娉, 錢學豔, 周三, 高華, 劉明 申請人:青島大學