雷公藤酮的製備方法及抗生育用途的製作方法
2023-12-05 18:09:46 1
專利名稱：：雷公藤酮的製備方法及抗生育用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及雷公藤酮的製備方法及抗生育用途。從植物雷公藤[TripterygiumWilfordiiHook.f.]的根莖葉中提取出的化合物雷公藤酮(triptonide)，其化學結構已在《TheJournalofAmericaChemicalscience》，197294(20)7194上發表，結構式如下但其製備方法麻煩且得率低，它的抗腫瘤作用有過報導，但報導中未涉及其抗生育作用。現有的雄性抗生育藥物棉酚，有一定的毒副作用在抗生育劑量下，全部服用者均可引起血鉀降低，其中1-10%服藥者在半年內可發生低血鉀症及癱瘓;1/4服藥者生育力改變為不可逆;可引起30%服藥者不同程度腎小管損害，病理亦有同樣表現，在國際上基本否定其作為雄性抗生育藥物的應用。因此，研製新的雄性抗生育化合物已成為當務之急。本發明的目的是提供出雷公藤酮新的製備方法及它在雄性抗生育方面的新用途。其製法如下將雷公藤根或莖葉用乙醇提取，提取物用柱層析分離，或將雷公藤原料用水煮，水煮液再用氯仿萃取，濃縮氯仿液，濃縮液用柱層析分離，以有機溶劑洗脫，收集含雷公藤酮的部分，再次層析分離，然後重結晶，即可得雷公藤酮純品。以上有機溶劑可以是氯仿，乙醚，環乙烷-丙酮，石油醚-丙酮，丙酮-苯，甲醇-氯仿，丙酮-氯仿，乙醇-氯仿，乙酸乙酯-氯仿，環乙烷-氯仿等。該化合物的藥理作用如下1、初篩昆明種健康雄性小鼠，27.6±0.5克，每組10隻，每日灌胃給藥0.56、0.28、0.14mg/kg一次，連續32天，第26天與正常成年雌性小鼠1∶1合籠，第33天解剖雄鼠取一側輸精管全長，用0.5ml生理鹽水衝洗精子於試管內，在白細胞計數板上觀察精子活力及作精子相對計數。分籠後8天解剖雌鼠，觀察胚胎數(活胎及吸收胎)。結果表明三個給藥組均使睪丸減重、精子計數減少及活力降低，呈量效關係，並皆導致不育(見表1)。表1、藥物對小鼠生殖參數的影響(X±SE)＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.0012、復篩在雄性成熟SO大鼠，每日經口灌服雷公藤酮0.2mg/kg，每周6次，6-7周後交配試驗表明，9/10鼠已不育(對照鼠10/10能育，兩者差別非常顯著，P＜0.001)，附睪尾精子數和活率也顯著下降(P＜0.001)，詳見表2。此劑量對體重、性行為、血清睪酮、各種副性腺重量均無明顯影響。睪丸組織學除見少數脫落精子細胞及一鼠10%曲細精管輕度受損外，餘無明顯改變。附睪上皮正常，管腔見少量脫落精子細胞。心、肝、肺、脾、胃、腎等身體臟器組織學均正常。對照鼠一切如常。共進行兩批實驗，每批20鼠(給藥及對照各半)，結果基本一致。表2、雷公藤酮對大鼠生育的影響(X±S、O)附睪尾精子交配雌鼠級別(N)密度活率106/ml0/0懷孕率活胎仔/孕鼠死胎仔/孕鼠對照(10)103±683±410/1013.7±2.80雷公藤(10)52±15＊15±11＊1/10＊2＊0＊P＜0.001，與對照組相比本發明所提供的化合物具有明確的雄性抗生育作用，同時，在抗生育劑量下沒有明顯的細胞毒性，沒有其他副作用，有較好的藥用前景。本發明提供的製備方法，得率較現有文獻的方法高，易於實施。以下為製備實施例。實施例1，將雷公藤原料(根或莖或葉)以酒精(70-95%乙醇)浸取對浸取液濃縮後的濃縮物100g進行矽膠柱層析(矽膠100g，用1%乙醇-氯仿溼法裝柱)。以1%乙醇-氯仿洗脫，收集合併含雷公藤酮的組分。將上述含雷公藤酮的組分再進行一次柱層析，以乙醚為洗脫劑，以100ml小瓶收集，將含雷公藤酮的部分合併濃縮，以氯仿重結晶兩次得純雷公藤酮。實施例2，取雷公藤原料(根或莖葉)水煮去渣，氯仿萃取後濃縮，然後按實施例1的方法進行製備。柱層析洗脫溶劑亦可用苯-丙酮，環乙烷-丙酮，乙醚-甲醇，乙酸乙酯-石油醚等。權利要求1.雷公藤酮的製備方法，其特徵是對直接用酒精提取雷公藤原料的提取物或用水煮雷公藤原料再以氯仿萃取的物質進行層析分離，以有機溶劑或複合有機溶機進行洗脫，收集合併含有雷公藤酮的組分，然後結晶。2.由權利要求1規定的雷公藤酮製備方法，其特徵是所說的有機溶劑或複合有機溶劑指氯仿、乙醚、甲醇-氯仿，丙酮-氯仿，乙醇-氯仿，乙酸乙酯-氯仿，環乙烷-氯仿，環乙烷-丙酮，石油醚-丙酮，丙酮-苯，乙酸乙酯-石油醚或乙醚-甲醇。3.雷公藤酮的用途，其特徵是將該化合物作為雄性抗生育藥物，由口服或注射用藥。全文摘要本發明提供化合物雷公藤酮的製備方法與抗生育用途。其方法為，將植物雷公藤用溶劑提取，再將提取物進行層析，以有機溶劑進行洗脫，然後結晶。所得到的雷公藤酮具有顯著的雄性抗生育功效，沒有明顯的毒副作用。其抗生育作用是明確和可逆的，是一種有前景的雄性抗生育化合物。文檔編號C07D493/22GK1060845SQ90105750公開日1992年5月6日申請日期1990年10月13日優先權日1990年10月13日發明者鄭家潤,錢紹禎,呂燮餘,馬鵬程,張崇璞,陳沄,顧克顯,許燁申請人:中國醫學科學院皮膚病研究所,江蘇省計劃生育科學技術研究所