一種小棗的抗氧化多肽製備工藝的製作方法
2023-12-05 20:19:06 2
本發明涉及一種抗氧化多肽製備工藝，特別涉及一種小棗的抗氧化多肽製備工藝，屬於抗氧化多肽製造技術領域。
背景技術：
小棗為鼠李科落葉灌木或小喬木植物棗樹的成熟果實。我國栽培棗樹範圍極廣，北邊達到遼寧的錦州、北鎮一帶，以山東、河北、山西、陝西、甘肅、安徽、浙江產量最多。著名品種有金絲小棗，果實小，含糖量多。小棗能提高人體免疫力，並可抑制癌細胞，藥理研究發現，紅棗能促進白細胞的生成，降低血清膽固醇，提高血清白蛋白，保護肝臟。紅棗中還含有抑制癌細胞，甚至可使癌細胞向正常細胞轉化的物質；經常食用鮮棗的人很少患膽結石，這是因為鮮棗中豐富的維生素C，使體內多餘的膽固醇轉變為膽汁酸，膽固醇少了，結石形成的概率也就隨之減少；小棗中富含鈣和鐵，它們對防治骨質疏鬆產貧血有重要作用，中老年人更年期經常會骨質疏鬆，正在生長發育高峰的青少年和女性容易發生貧血，小棗對他們會有十分理想的食療作用，其效果通常是藥物不能比擬的；小棗對病後體虛的人也有良好的滋補作用；小棗所含的蘆丁，是一種使血管軟化，從而使血壓降低的物質，對高血壓病有防治功效；小棗還可以抗過敏、除腥臭怪味、寧心安神、益智健腦、增強食慾。小棗因為具有非常好的營養價值而受到人們的青睞，因此種植量非常大，每年在農戶手中有大量的殘次小棗因品相太差而無法銷售出去，被浪費丟棄，增加了農戶的種植成本，降低了農戶的收入。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是克服每年在農戶手中有大量的殘次小棗因品相太差而無法銷售出去，被浪費丟棄，增加了農戶的種植成本，降低了農戶的收入的缺陷，提供一種小棗的抗氧化多肽製備工藝。
為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：
本發明提供了一種小棗的抗氧化多肽製備工藝，製作步驟為：
1）小棗蛋白提取：將小棗置於烘箱內低溫烘乾，粉碎後，取一定量的小棗粉，按一定料液比加水，超聲波震蕩10小時，然後以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液用1mol/L的鹽酸溶液調整濾液pH為4～4.5，酸沉澱蛋白質，4000r/min離心20min獲得沉澱物，沉澱物用蒸餾水洗至中性，冷凍乾燥製得蛋白質粉備用；
2）小棗蛋白酶解：取適量小棗蛋白粉，以底物濃度為3%配製蛋白溶液，調節至所需的溫度55℃，添加鹽酸或氫氧化鈉調節pH=7，加鹼性蛋白酶和植物蛋白酶(共5000U/g)協同酶解（兩酶配比值為1:1），加酶的時候充分攪拌，保證酶與底物充分接觸，恆溫水浴鍋內震蕩，酶解時間5h，反應過程中需添加鹽酸或氫氧化鈉以保證pH值不變。酶解至預定時間後，置於90℃水浴中10min，滅酶，取上清液，真空濃縮。冷凍乾燥為小棗多肽，粉碎過篩後為小棗多肽粉。
作為本發明的一種優選技術方案，在所述小棗多肽粉製備過程中對酶解液中抗氧化多肽得率進行檢驗，其步驟為：所述酶解液中多肽得率用酸可溶性多肽計，將等體積的三氯乙酸（TCA，10%）加入到棗酶解液中，靜置0.5h後在4000r/min速度離心20min，取上清液用凱式定氮法測定氮的質量。計算結果如下：
抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H2SO4溶液，第一支比色管作試劑參比，其餘兩支再分別加入FeSO4和H2O2溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至並搖勻，常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A0，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:
清除率%=（As－A0）／（A－A0）×100%
經過計算，小棗蛋白酶解液的抗氧化多肽得率為55.03%，•OH清除率為80.31%。
作為本發明的一種優選技術方案，小棗多肽粉製備過程中產生的廢棄液在濃縮後還可以用於製備棗泥。
本發明所達到的有益效果是：小棗產量巨大，每年在農戶手中有大量的殘次小棗被浪費丟棄，本發明提取小棗蛋白進行酶解製備多肽，廢棄液在濃縮還可以用來製備棗泥，而製備出的抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，做成各種食品，不僅能起到抗氧化作用，而且被人體極易吸收，對健康有利。
具體實施方式
以下對本發明的優選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優選實施例僅用於說明和解釋本發明，並不用於限定本發明。
實施例1
本發明提供了一種小棗的抗氧化多肽製備工藝，製作步驟為：
1）小棗蛋白提取：將小棗置於烘箱內低溫烘乾，粉碎後，取一定量的小棗粉，按一定料液比加水，超聲波震蕩10小時，然後以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液用1mol/L的鹽酸溶液調整濾液pH為4～4.5，酸沉澱蛋白質，4000r/min離心20min獲得沉澱物，沉澱物用蒸餾水洗至中性，冷凍乾燥製得蛋白質粉備用；
2）小棗蛋白酶解：取適量小棗蛋白粉，以底物濃度為3%配製蛋白溶液，調節至所需的溫度55℃，添加鹽酸或氫氧化鈉調節pH=7，加鹼性蛋白酶和植物蛋白酶(共5000U/g)協同酶解（兩酶配比值為1:1），加酶的時候充分攪拌，保證酶與底物充分接觸，恆溫水浴鍋內震蕩，酶解時間5h，反應過程中需添加鹽酸或氫氧化鈉以保證pH值不變。酶解至預定時間後，置於90℃水浴中10min，滅酶，取上清液，真空濃縮。冷凍乾燥為小棗多肽，粉碎過篩後為小棗多肽粉。
在小棗多肽粉製備過程中對酶解液中抗氧化多肽得率進行檢驗，其步驟為：所述酶解液中多肽得率用酸可溶性多肽計，將等體積的三氯乙酸（TCA，10%）加入到棗酶解液中，靜置0.5h後在4000r/min速度離心20min，取上清液用凱式定氮法測定氮的質量。計算結果如下：
抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H2SO4溶液，第一支比色管作試劑參比，其餘兩支再分別加入FeSO4和H2O2溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至並搖勻，常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A0，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:
清除率%=（As－A0）／（A－A0）×100%
經過計算，小棗蛋白酶解液的抗氧化多肽得率為55.03%，•OH清除率為80.31%。
小棗多肽粉製備過程中產生的廢棄液在濃縮後還可以用於製備棗泥。
小棗產量巨大，每年在農戶手中有大量的殘次小棗被浪費丟棄，本發明提取小棗蛋白進行酶解製備多肽，廢棄液在濃縮還可以用來製備棗泥，而製備出的抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，做成各種食品，不僅能起到抗氧化作用，而且被人體極易吸收，對健康有利。
最後應說明的是：以上所述僅為本發明的優選實施例而已，並不用於限制本發明，儘管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，對於本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特徵進行等同替換。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。