磷吸收抑制用組合物的製作方法

2023-12-05 11:23:11 1

本發明涉及含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分的磷吸收抑制用的組合物。另外，本發明還涉及含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分的、用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防中的任一者或兩者的組合物。

背景技術：

作為強力的胃酸分泌抑制劑的質子泵抑制劑(protonpumpinhibitor/ppi)是世界中最為廣泛使用的口服藥之一，一般來說認為是安全的。另一方面有報告指出，使用ppi時，骨折風險會增加。對此，本發明者們報告了，通過對成長期的大鼠短期皮下給予ppi，降低了骨密度(bonemineraldensity/bmd)和骨強度(非專利文獻1、非專利文獻2)。但是，還沒有關於對人或動物長期皮下給予ppi時會對骨強度造成的影響的報告。

有報告指出，當經口攝入牛奶或發酵乳製品(發酵乳、奶酪等)時，對骨質疏鬆症的預防是有用的。對此，本發明者們報告了，當對成長期的大鼠短期皮下給予ppi時，通過短期經口給予乳酸菌發酵物，鈣的吸收部分地改善、增加了bmd和骨強度(非專利文獻1)。另一方面，通過經口給予低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides/gos)，在成長期的大鼠或者卵巢摘除大鼠中，促進了鈣的吸收、增加了bmd(非專利文獻3～5)。這裡，gos是難以在小腸中消化、而在大腸中發酵的難消化性的碳水化合物。對此，本發明者們報告了。當對成長期的大鼠短期皮下給予ppi時，通過短期經口給予乳酸菌發酵物與gos的組合，鈣的吸收倍增地得到改善、並增加了骨強度(非專利文獻2)。

現有技術文獻

非專利文獻

非專利文獻1：takasugietal.,br.j.nutr.,2011,106,1487-1494

非專利文獻2：takasugietal.,biol.traceelem.res.,2013,153,309-318

非專利文獻3：weareretal.,j.agric.foodchem.,2011,59,6501-6510

非專利文獻4：chonanetal.,j.nutr.sci.vitaminol.,1995,41,95-104

非專利文獻5：chonanetal.,biosci.biotechnol.biochem.,1995,59,236-239

技術實現要素：

發明要解決的技術問題

如上所述，對成長期的大鼠短期皮下給予ppi後，當短期經口給予乳酸菌發酵物與gos的組合時，改善了鈣的吸收、增加了骨強度。但是，當對大鼠長期給予ppi、對磷的代謝造成不良影響後，長期給予乳酸菌發酵物與gos的組合時，對該已惡化的磷代謝的影響並不清楚。因而，本發明者們對在長期皮下給予ppi、胃酸的分泌降低(胃液的ph上升)的狀態下，當長期給予乳酸菌發酵物與gos的組合時，對該已惡化的磷代謝的影響從實驗方面進行了研究。

即，本發明的課題在於，提供一種用於治療或預防骨質疏鬆症的組合物、以及用於改善磷的代謝(特別是用於抑制磷的過量攝入)的組合物，其含有由經長期的食用經驗驗證了安全性、味覺性優異的(營養)成分構成、可以長期攝取的、乳酸菌發酵物(發酵乳製品)與gos的組合作為有效成分。另外，本發明的課題還在於，提供一種用於治療或預防因磷的過量攝入所導致的疾病的組合物，其含有乳酸菌發酵物與gos的組合作為有效成分。

用於解決技術問題的方法

本發明者們為了解決上述技術問題進行了深入研究。具體而言，在大鼠中，在給予ppi、胃酸的分泌降低的狀態下、和未給予ppi的健康狀態下，長期經口給予乳酸菌發酵物(發酵乳製品)與gos的組合，對於對磷的代謝、鈣的代謝、骨強度等的影響從實驗方面進行了研究。作為其結果，本發明者們弄清楚了，在大鼠中，通過長期經口給予發酵乳製品與gos的組合，在胃酸的分泌降低的狀態和健康狀態的任一狀態下，骨強度均有所增加。另外還弄清楚了，通過長期經口給予發酵乳製品與gos的組合，在胃酸分泌降低的狀態下抑制了磷吸收的增加。因此，發現了通過長期經口給予發酵乳製品與gos的組合，能夠改善磷代謝的異常、能夠治療和/或預防因磷的過量攝入所導致的疾病。

本發明基於上述認知而完成，提供以下內容。

[1]一種磷吸收抑制用組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分。

[2]上述[1]所述的組合物，其中，低聚糖是含有半乳糖作為構成糖的低聚糖。

[3]上述[2]所述的組合物，其中，低聚糖為低聚半乳糖。

[4]上述[1]～[3]中任一項所述的組合物，其中，發酵乳製品是使用屬於乳酸桿菌屬(lactobacillus)的乳酸菌和/或屬於鏈球菌屬(streptococcus)的乳酸菌獲得的發酵乳製品。

[5]上述[1]～[4]中任一項所述的組合物，其中，發酵乳製品為酸奶和/或未熟奶酪。

[6]上述[1]～[5]中任一項所述的組合物，其用於對胃酸分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象經口給予(使其經口攝取)。

[7]上述[1]～[6]中任一項所述的組合物，其用於在至少4周以上的時間內每日經口給予(使其經口攝取)。

[8]上述[1]～[7]中任一項所述的組合物，其作為食品添加劑(用於添加在食品中)使用。

[9]發酵乳製品和低聚糖在磷吸收抑制用組合物的製造中的用途。

發明效果

本發明的組合物可以抑制伴隨胃酸分泌降低的磷吸收的增加。因此，通過經口給予(有時也包含經腸給予的概念)本發明的組合物，在老年人等胃酸分泌降低的對象中，可以抑制磷吸收的增加、改善磷代謝的異常、使磷的過量攝入返回至正常範圍。另外，通過經口給予本發明的組合物，可以改善(治療或預防等)因磷的過量攝入所導致的疾病。本發明的組合物由於含有經長期的食用經驗驗證了安全性和味覺性優異的發酵乳製品和低聚糖作為有效成分(主成分)，因此沒有副作用的問題，可以長期地經口給予。

具體實施方式

本發明提供一種磷吸收抑制用組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分。另外，本發明涉及用於因磷的過量攝入所導致疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分。磷在體內的過量攝入例如是因胃酸的分泌降低所導致的ph上升而發生的。本發明的組合物顯著地抑制因胃酸的分泌降低所導致的ph上升而發生的磷在體內的過量攝入，改善磷代謝的異常。

本發明的磷吸收抑制用組合物還可表述為用於抑制磷吸收的組合物、磷吸收抑制劑等。並且，本發明的磷吸收抑制用組合物可以經口給予胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象。即，本發明涉及一種磷吸收抑制用組合物，其用於給予胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象。本發明的磷吸收抑制用組合物還可以表述為「一種磷吸收抑制用組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分，其是用於經口給予至通過包含在其給予(攝取)的對象中、判定胃液的分泌是否降低和/或胃液的ph是否上升的工序的方法判定為胃液的分泌降低的對象、和/或判定為胃液的ph上升的對象的組合物」。另外，本發明中「給予」還可換稱為「攝取」。

這裡，胃酸的分泌是否降低可以通過測定胃液的ph來判定。即，當測定胃液的ph、該ph上升時，可以判定為胃酸的分泌降低。本發明中，作為胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象，可舉出胃液的ph優選為9～2、更優選為8～2、進一步優選為7～2的對象，但並不限定於這些。其中，胃液的ph的測定方法是本領域技術人員公知的，例如已知將有線微小ph玻璃電極經鼻地插入到胃內進行測定的方法(pharma.medica.,2009,27,109-115)等。作為胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象，例如可舉出長期經口給予ppi的對象。即，本發明的磷吸收抑制用組合物可以用於經口給予至長期經口給予了ppi的對象。另外，作為其他胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象，例如可舉出老年人、胃切除患者、h2阻斷劑給予患者等。本發明中，作為長期，例如可優選舉出1周以上且30年以下、更優選可舉出2周以上且20年以下、進一步優選可舉出3周以上且10年以下，但並不限定於這些。

本發明中，磷吸收的抑制是指磷在體內的攝入減少，也可表述為「改善磷在體內的吸收過量的狀態」等。本發明的磷吸收抑制用組合物可以用於治療或預防因磷的過量攝入所導致的疾病(因磷的吸收亢進所導致的疾病)。

本發明含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分的、用於因磷的過量吸收所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物還可以表述為用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的(藥)劑。本發明的用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物可以經口給予至胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph上升的對象。即，本發明涉及一種用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物，其用於經口給予至胃酸的分泌降低的對象和/或胃液的ph增加的對象。本發明的用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物也可表述為「一種用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖作為有效成分，其是用於經口給予至通過包含在其給予(攝取)的對象中、判定胃液的分泌是否降低和/或胃液的ph是否上升的工序的方法判定為胃液的分泌降低的對象、和/或判定為胃液的ph上升的對象的組合物」。這裡，「因磷的過量攝入所導致的疾病」可以表述為「因磷的過量攝取所導致的疾病」、「因磷的吸收亢進所導致的疾病」等。本發明中作為「因磷的過量攝入所導致的疾病」，優選可舉出因胃酸的分泌降低、胃液的ph上升、ppi的長期(經口)給予等，磷的吸收變得過量，由此導致發病的疾病，但並不限定於這些。即，更具體而言，作為以胃酸的分泌降低、胃液的ph上升或ppi的長期給予等為原因的磷的過量攝入而導致發病的疾病，可舉出心血管疾病、異位性鈣化、骨質疏鬆症等，但並不限定於這些。

本發明者們發現通過長期地經口攝取發酵乳製品和低聚糖，能夠抑制磷的過量攝入。因此，本發明的組合物可以長期、每日地經口給予至需要其的對象(特別是胃酸的分泌降低的對象、胃液的ph上升的對象、長期給予了ppi的對象)。即，本發明涉及一種磷吸收抑制用組合物，其用於長期、每日地經口給予至需要其的對象。另外，本發明涉及一種用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物，其用於長期、每日地經口給予至需要其的對象。本發明中，作為長期，例如可優選舉出1周以上、更優選舉出2周、進一步優選舉出3周以上(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12周以上)，但並不限定於這些。本發明的組合物由於含有經長期的食用經驗驗證了安全性和味覺性優異的發酵乳製品和低聚糖作為有效成分(主成分)，因而沒有副作用的問題、可以長期地經口給予。因此，本發明中，其給予的期間沒有上限，若要進行舉例，優選可舉出30年以下、更優選可舉出20年以下、進一步可優選舉出10年以下，但並不限定於這些。

本發明的組合物使用低聚糖作為其一部分進行製備。本發明中，低聚糖是指少糖類，是指2～20個糖進行糖苷鍵合而成的化合物。本發明中，作為低聚糖，例如可舉出低聚乳果糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、大豆低聚糖、黑麴黴低聚糖、龍膽低聚糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、海藻糖、帕拉金糖等，但並不限定於這些。其中，本發明的組合物為酸性時，優選使用難以發生因酸分解等導致的腐敗的性質的低聚糖。

本發明中，優選使用含有半乳糖作為構成糖的低聚糖(低聚半乳糖等)。構成糖中含有半乳糖的低聚糖是指2～20個糖進行糖苷鍵合而成的化合物，是指構成該化合物的糖中含有1個或多個半乳糖的化合物。低聚半乳糖含有在母乳中，具有增加腸內雙歧桿菌的效果，已知是難以被消化吸收的糖。低聚半乳糖是在特定保健用食品(標準基準型)制度的標準基準下定義為「在β-半乳糖苷酶(β-d-galactosidegalactohydrolase、e.c.3.2.1.23、隱球菌屬酵母來源)的作用下由乳糖生成的、在乳糖的半乳糖殘基上糖苷鍵合有1個或多個半乳糖的低聚糖，其以4'-半乳糖基乳糖(gal(β1-4)gal(β1-4)glc)為主成分」(平成17年(2005年)7月1日食品安全第0701007號厚生勞動省醫藥食品局食品安全部長通知、「關於伴隨特定保健用食品(標準基準型)制度的創建的標準基準的設定等」)。本發明中，低聚半乳糖只要符合該定義，則並無特別限定。

本發明中，作為低聚半乳糖，例如可舉出以乳糖(gal(β1-4)glc)為基本結構，具有在其上鍵合有1個～多個半乳糖殘基的結構的低聚糖，或半乳糖與葡萄糖進行β-1,3鍵合等而成的2糖類(轉移2糖類)、gal-(gal)n-glc(n＝1～18)、gal-(gal)n-gal(n＝1～18)等，但並不限定於這些。

低聚半乳糖可通過商業(工業)的製造方法獲得。此外，作為低聚半乳糖的製造方法，例如可舉出使乳糖作用於半乳糖轉移能力高的β-半乳糖苷酶(主要來源於羅倫隱球酵母(cryptococcuslaurentii)、環狀芽孢桿菌(bacilluscirculans)等微生物等)的方法(澤入淑人、ガラクトオリゴ糖の機能と食品への応用、foodstyle21,1998,2,76-78)，但並不限定於此。

本發明的組合物使用發酵乳製品作為其一部分進行製備。本發明中，發酵乳製品是指使用乳酸菌、雙歧桿菌、丙酸菌等(發酵物等)使奶或者含有與其同等程度的脫脂奶固體成分的奶等發酵而獲得的所有產品。本發明中，作為「奶或含有與其同等程度的脫脂奶固體成分的奶等」，例如可舉出牛奶、水牛奶、山羊奶、羊奶、馬奶等家畜乳(全脂奶)、它們的部分脫脂奶、脫脂奶、還原全脂奶、還原部分脫脂奶、還原脫脂奶、全脂奶粉、部分脫脂奶粉、脫脂奶粉、全脂濃縮乳、部分脫脂濃縮乳、脫脂濃縮乳、酪蛋白、乳清、乳清蛋白、乳清相關製品(乳清蛋白濃縮物(wpc)、乳清蛋白分離物(wpi)等)、乳蛋白濃縮物(mpc)、黃油、白脫牛奶、奶油等中的1種或2種以上的組合，並不限定於這些。另外，本發明中，發酵乳製品優選發酵乳(酸奶等)、奶酪(熟化奶酪、未熟奶酪(新鮮奶酪)、加工奶酪等)、奶酪食品、乳清(whey)發酵物，更優選可舉出發酵乳、奶酪，進一步優選可舉出酸奶、未熟奶酪，特別優選可舉出酸奶，但並不限定於這些。

作為「乳清相關製品」，例如可舉出對乳清進行濃縮處理而得到的濃縮乳清，對乳清進行乾燥處理而得到的乳清粉末，利用超濾(ultrafiltration：uf)法對乳清的主要蛋白等進行濃縮處理後進行乾燥處理而得到的乳清蛋白濃縮物(wheyproteinconcentrate：以下也稱作「wpc」)，利用微細過濾(microfiltration：mf)法或離心分離法等將乳清的脂肪除去後、利用uf法進行濃縮處理後進行乾燥處理而得到的脫脂wpc(低脂肪-高蛋白)，利用離子交換樹脂法或凝膠過濾法等對乳清的主要蛋白等選擇地進行分級處理後、進行乾燥處理而得到的乳清蛋白分離物(wheyproteinisolate：以下也稱作「wpi」)，利用納米過濾(nanofiltration：nf)法或電透析法等進行脫鹽處理後、進行乾燥處理而得到的脫鹽乳清，對乳清來源的礦物成分進行沉澱處理後、利用離心分離法等進行濃縮處理而得到的礦物濃縮乳清等。另外，利用mf法或uf法對脫脂奶進行濃縮處理後、進行乾燥處理而得到的乳蛋白濃縮物(milkproteinconcentrate：以下也稱作「mpc」)與wpc或wpi同樣地，乳糖或鹽類等的量減少、酪蛋白或乳清蛋白的量相對地增加。

本發明中，發酵乳(酸奶等)是指「利用乳酸菌或酵母使奶或含有與其同等以上的脫脂奶固體成分的奶等發酵，製成糊狀或液態者，或者將它們冷凍而得到的產物」(關於奶及乳製品成分標準等的省令2條38號)。本發明中，發酵乳只要包含在該定義中，則無特別限定。另外，本發明中，奶酪是指「對將奶或含有與其同等以上的脫脂奶固體成分的奶等中的1種或2種以上組合、製備得到的液態奶進行發酵、添加酶或添加酸，從由此產生的凝乳中將乳清除去而得到的產物」。本發明中，奶酪可以是經固態化或者未經固態化中的任一種。另外，本發明中，奶酪可以是經熟化的奶酪(成熟奶酪)和未經熟化的奶酪(未熟奶酪)中的任一種。

本發明中，作為用於製造發酵乳製品的發酵物(starter)，例如可以使用屬於乳酸桿菌屬(lactobacillus)、鏈球菌屬(streptococcus)、乳球菌屬(lactococcus)、嗜檸檬酸明串球菌屬(leuconostoc)、小球菌屬(pediococcus)等的乳酸菌，優選可以使用屬於乳酸桿菌屬(lactobacillus)、鏈球菌屬(streptococcus)、乳球菌屬(lactococcus)的乳酸菌，更優選可以使用屬於乳酸桿菌屬(lactobacillus)、鏈球菌屬(streptococcus)的乳酸菌，但並不限定於這些。即，更具體而言，可以使用包含德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、格氏乳桿菌(lactobacillusgasseri)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)、乾酪乳桿菌(lactobacilluscasei)、路氏乳桿菌(lactobacillusreuteri)、鼠李糖乳桿菌(lactobacillusrhamnosus)、口乳桿菌(lactobacillusoris)、嗜酸產氣乳酸桿菌(lactobacillusacidophilus)、短乳桿菌(lactobacillusbrevis)、黏膜乳桿菌(lactobacillusmucosae)、鼠乳桿菌(lactobacillusmurinus)、嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)、二乙醯乳酸鏈球菌(streptococcusdiacetylactis)、乳乳球菌(lactococcuslactis)、乳脂乳球菌(lactococcuscremoris)、屎腸球菌(enterococcusfaecium)、糞腸球菌(enterococcusfaecalis)等乳酸菌、長雙歧桿菌(bifidobacteriumlongum)、兩歧雙歧桿菌(bifidobacteriumbifidum)、短雙歧桿菌(bifidobacteriumbreve)等雙歧桿菌、費氏丙酸桿菌(propionibacteriumfreudenreichii)、特氏丙酸桿菌(propionibacteriumthoenii)、丙酸丙酸桿菌(propionibacteriumacidipropionici)、詹氏丙酸桿菌(propionibacteriumjensenii)、貪婪丙酸桿菌(propionibacteriumavidum)、瘡皰丙酸桿菌(propionibacteriumacnes)、嗜淋巴丙酸桿菌(propionibacteriumlymphophilum)、顆粒丙酸桿菌(propionibacteriumgranulosam)等丙酸菌等通常發酵乳的製造中使用的微生物，優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、格氏乳桿菌(lactobacillusgasseri)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)、乾酪乳桿菌(lactobacilluscasei)、路氏乳桿菌(lactobacillusreuteri)、鼠李糖乳桿菌(lactobacillusrhamnosus)、口乳桿菌(lactobacillusoris)、嗜酸產氣乳酸桿菌(lactobacillusacidophilus)、短乳桿菌(lactobacillusbrevis)、嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)、乳乳球菌(lactococcuslactis)、乳脂乳球菌(lactococcuscremoris)，更優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、格氏乳桿菌(lactobacillusgasseri)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)、嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)、乳乳球菌(lactococcuslactis)、乳脂乳球菌(lactococcuscremoris)，進一步優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、格氏乳桿菌(lactobacillusgasseri)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)，特別優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)，但並不限定於這些。此外，本發明中，可以使用這些微生物(發酵物)中的1種或組合使用2種以上。

本發明中，發酵乳(酸奶等)還可使用公知的製造方法獲得。另外，本發明中，奶酪也可使用公知的製造方法獲得。例如，未熟奶酪中，作為其組成(質量單位)例如可舉出總固體成分為17～19％、蛋白為11～13％、脂肪為1％以下、碳水化合物為2～8％，但並不限定於此。

本發明的組合物通常製成低聚糖、發酵乳製品及其他任意成分的混合物，例如也可製成分為含有低聚糖者和含有發酵乳製品者的其他形態。當製成分成含有低聚糖者和含有發酵乳製品者的形態時，優選將含有低聚糖者和含有發酵乳製品者同時地(經口)給予。

本發明的組合物中，作為總固體成分(100質量％)所含的低聚糖的濃度，優選為0.1～10質量％、更優選為0.2～8質量％、進一步優選為0.3～6質量％、特別優選為0.4～6質量％。另外，本發明的組合物中，作為總固體成分(100質量％)所含的發酵乳製品的濃度，優選為5～98質量％、更優選為10～97質量％、進一步優選為15～96質量％、特別優選為18～96質量％。其中，本說明書中，總固體成分只要無特別限定，則是指在乾燥器內的20℃的乾燥氣氛下使其乾燥後的質量(包含液態油脂的質量)(不是指粉末飼料等含水固體成分的質量)。

本發明的組合物中，作為低聚糖的給予(攝取)量，為每日每1kg體重以固體成分含量計優選為0.1mg～2g、更優選為0.5mg～1.5g、進一步優選為1mg～1g、特別優選為5mg～0.5g。另外，本發明的組合物中，作為發酵乳製品的給予(攝取)量，為每日每1kg體重以固體成分含量計優選為100mg～10g、更優選為200mg～7.5g、進一步優選為300mg～5g、特別優選為500mg～2.5g。

本發明的組合物中，作為低聚糖對人的給予量，每日以固體成分含量計優選為0.01g～20g、更優選為0.05g～15g、進一步優選為0.1g～10g、特別優選為0.5g～5g。另外，本發明的組合物中，作為發酵乳製品對人的給予量，每日以固體成分含量計優選為1g～100g、更優選為2g～75g、進一步優選為3g～50g、特別優選為5g～25g。其中，本發明的組合物可以在飯前、飯後、飯間和/或就寢前等適當地一次性給予至需要其給予的對象(患者等)，也可分開地進行給予。其中，本發明的組合物由於可以根據需要其給予的對象(患者等)的年齡、體重、給予目的，分別地確定其給予量，因而其給予量不必一定限定在所述的數值範圍內。

本發明中，發酵乳製品/低聚糖的質量比(固體成分換算值)優選為1～49、更優選為1～30、進一步優選為2～9、特別優選為3～8。

本發明的組合物可以以醫藥品(醫藥組合物、營養醫藥組合物、藥劑、經腸營養劑、醫藥品添加物等)、飲食品(飲食品組合物、營養組合物、特別用途食品、營養功能食品、健康食品、食品添加物(食品添加劑)等)、化妝品等中的任一種形態進行使用。另外，本發明的組合物可以添加(配合)在醫藥品、飲食品、化妝品等中進行使用和/或與醫藥品、飲食品、化妝品等組合使用。由此，可以對醫藥品、飲食品、化妝品等賦予磷吸收抑制效果或因磷的過量攝入所導致的疾病的治療效果和/或預防效果。

使用本發明的組合物製成醫藥品(製成醫藥品的形態)時，可以以各種形態進行給予。作為其給予形態，例如可舉出將經腸營養劑、液體劑等醫藥品進行經口給予或經腸給予(經鼻管、胃瘻、腸瘻等)等。此時，還可將本發明的組合物加工成片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、糖漿劑等製劑進行給予。此外，作為這些各種製劑，還可舉出按照常規方法在主劑中使用賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味劑、溶解輔助劑、混懸劑、包衣劑、溶劑、等滲劑等醫藥品製劑的技術領域中已知的輔助劑所製造的製劑，但並不限定於這些。另外，這些各種製劑中還可以含有適量的鈣，進而還可以含有適量的維生素、礦物質、有機酸、糖類、胺基酸、肽類等。

使用本發明的組合物製成醫藥品時，可以根據需要其給予的對象(患者等)的年齡、體重、給予目的(症狀)等適當選擇其給予量和給予方法。此時，本發明的組合物作為其有效的給予量，可以適當選擇每1次每1kg體重為5mg～1500mg、優選為10mg～1000mg、更優選為20mg～750mg、進一步優選為30mg～500mg、特別優選為50mg～250mg。另外，本發明的組合物作為其有效的給予量，可以是每1次每位患者適當選擇0.5g～150g、優選為1g～100g、更優選為2g～75g、進一步優選為3g～50g、特別優選為5g～25g。此外，本發明的組合物作為其有效的給予量和給予方法，可舉出每1次每1kg體重，例如以1日1次～6次、優選1日1次～5次、更優選1日1次～4次、進一步優選1日1次～3次，給予例如5mg～1500mg、優選10mg～1000mg、更優選20mg～750mg、進一步優選30mg～500mg、特別優選50mg～250mg，給予例如1周以上、優選1周～12月、更優選2周～6月、進一步優選3周～4月、特別優選4周～2月。此外，本發明的組合物可以在飯前、飯後、飯間和/或就寢前等適當地一次性給予至需要該給予的對象(患者等)，也可以分開地進行給予。另外，本發明的組合物可以一邊實際地觀察給予至對象後的狀態或血液檢查的動向等，一邊根據各對象的狀態，分別調整其有效的給予次數。

使用本發明的組合物製成飲食品(製成飲食品的狀態)時，可以以各種形態進行攝取。作為其攝取形態，例如可舉出將乳製品、流食等飲食品經口攝取或經腸攝取(經鼻管、胃瘻、腸瘻等)等。此時，可以將本發明的組合物加工成液態、糊狀、固體狀、粉末狀等的飲食品使其攝取，實際還可添加(配合)在各種的飲食品中使其攝取和/或使其與各種飲食品組合地攝取。此外，作為這些飲食品，優選可舉出水、飲料、點心(包含餐後甜點等)、乳製品、流食(包含營養值高的飲食品等)、嬰幼兒用調和乳、方便食品，更優選可舉出水、飲料、點心、乳製品、流食、嬰幼兒用調和乳，進一步優選可舉出點心、乳製品、流食，特別優選可舉出乳製品，但並不限定於這些。即，更具體而言，可舉出牛奶、清涼飲料、發酵乳、酸奶、奶酪、麵包、餅乾、脆餅、布丁、果凍、冰淇淋、比薩餅皮、製備奶粉、流食、病人用食品、營養食品、冷凍食品、食品組合物、加工食品、其他市售食品等。另外，這些各種飲食品中，還可作為各種學校、護理機構、福利機構中的供餐等進行提供。

使用本發明的組合物製成飲食品時，可以根據需要其攝取的對象(人)的年齡、體重、攝取目的等，適當選擇其攝取量和攝取方法，但優選直接、原樣地將該有效成分經口攝取。此時，本發明的組合物作為其形態，可舉出乳製品、流食等，例如可以是果汁型飲料、奶昔型飲料等，也可是在其攝取前可溶解/分散在水等中的粉末狀食品等。另外，本發明的組合物作為其有效的攝取量，每日以固體成分含量計例如為0.5g～150g、優選為1g～100g、更優選為2g～75g、進一步優選為3g～50g、特別優選為5g～25g。此外，本發明的組合物可以在飯前、飯後、飯間和/或就寢前等適當地一次性給予至需要該攝取的對象，也可分開地給予。另外，本發明的組合物還可代替正餐使用，也可作為正餐的輔助進行使用。

使用本發明的組合物製成醫藥品或飲食品時，可以利用本領域技術人員公知的方法進行製造。本領域技術人員還可以適當選擇並組合將本發明的組合物或其處理物與其他成分混合的調和工序、滅菌工序、發酵工序、濃縮工序、成形工序、燒成工序、乾燥工序、冷卻工序、造粒工序、包裝工序等來製造所需的醫藥品或飲食品。使用本發明的組合物製成酸性的醫藥品或飲食品時，其ph例如可以設定為2～6、優選設定為3～5。

使用本發明的組合物製成各種乳製品時，可以利用本領域技術人員公知的方法進行製造。例如為酸奶時，可以通過經過下述工序的方法進行製作：對乳酸菌進行培養等的發酵物的製備工序，根據需要的在配合(添加)低聚半乳糖後將乳成分等混合的原料乳的調和工序，在將發酵物與原料乳混合後在規定溫度下進行保持的發酵工序，將發酵乳降低至規定溫度的冷卻工序，根據需要的在將發酵乳破碎或者微粒化等後配合低聚半乳糖的混合工序，根據需要的配合香料或風味物質等的調味工序，充填工序等。此時，作為發酵物，例如可以使用乳酸桿菌屬(lactobacillus)乳酸菌和鏈球菌屬(streptococcus)乳酸菌的混合物，優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)和嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus)的混合物。另外，為奶酪時，可以通過經過如上述那樣的發酵物的製備工序、如上述那樣的原料乳的調和工序、如上述那樣的發酵工序、配合凝乳酶(rennet)的奶酪凝乳的生成工序、奶酪凝乳的剪切工序、奶酪乳清的排出工序、加鹽工序、熟化工序等的方法進行製造。此時，作為發酵物，例如可以使用乳酸桿菌屬(lactobacillus)的乳酸菌，優選可以使用德氏乳桿菌保加利亞亞種(lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)。

使用本發明的組合物製成醫藥品或飲食品時，還可進一步配合附加的營養素、由此調節其營養學上的組成。本發明中，附加的營養素可以使用蛋白、糖類、脂質、肽、胺基酸、食物纖維、維生素類、礦物類、有機酸、有機鹼、果汁、香料類、人工甜味料(例如阿斯巴甜等)等。此時，作為蛋白，例如可以使用全脂奶粉、脫脂奶粉、部分脫脂奶粉、全脂濃縮乳、脫脂濃縮乳、部分脫脂濃縮乳、酪蛋白、乳清粉、乳清蛋白、乳清蛋白濃縮物、乳清蛋白分離物、α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、乳鐵蛋白、大豆蛋白、蛋黃蛋白、肉蛋白等，它們的分解物、黃油、奶油、乳清、乳清礦物質、非蛋白態氮、唾液酸、磷脂、乳糖等各種乳來源成分等。此外，還可以使用酪蛋白磷酸肽、精氨酸、賴氨酸等肽或胺基酸。另外，作為糖類，例如除了蔗糖、葡萄糖、果糖、蜂蜜等糖類，加工澱粉(環糊精(麥芽糊精、難消化環糊精等)之外，還可以使用可溶性澱粉、英國澱粉、氧化澱粉、澱粉酯、澱粉醚等)、食物纖維等。此外，作脂質，例如可以使用豬油、魚油等、它們的餾分油(interesterifiedoil)、氫化油、酯交換油等動物性油脂；棕櫚油、紅花油、玉米油、菜籽油、椰子油、它們的餾分油、氫化油、酯交換油等植物性油脂等。

使用本發明的組合物製成醫藥品或飲食品時，還可以以例如0.005～0.5重量％配合(添加)具有便臭降低效果的食用香草(champignon)提取物，以0.00001～0.0002重量％配合(添加)具有營養強化效果的類胡蘿蔔素製劑(例如包含α-胡蘿蔔素、β-胡蘿蔔素、番茄紅素、葉黃素等)。另外，作為抗氧化劑，還可以配合兒茶素、多酚等。此外，還可以配合具有脂質代謝促進效果等的肉鹼。肉鹼是由賴氨酸和蛋氨酸在肝臟或腎臟中製作的生物體微量成分，已知隨著年齡的增長、其生成量降低。肉鹼通過長鏈脂肪酸向肌肉細胞的轉移等、對營養成分的代謝起到重要的作用。

食物纖維被分類為水溶性食物纖維和不溶性食物纖維，均可使用。此外，作為水溶性食物纖維，可以使用難消化性低聚糖的乳果糖、乳糖醇、棉子糖。作為難消化性低聚糖的生理功能，具有以未消化物的原樣到達大腸、幫助腸內雙歧桿菌活化或增殖、改善腸內環境的效果等。乳果糖是由半乳糖和果糖構成的合成二糖類，被用作高氨血症治療用的基本藥劑(bircher,j.etal.,lanceti:890,1965)。因慢性肝功能紊亂導致的慢性再髮型肝性腦病對乳果糖的給予、肝功能紊亂用的特殊胺基酸輸液(fischer液)等良好地反應。乳糖醇(β-半乳糖基-山梨糖醇)應該稱作第二代的乳果糖，在慢性肝性腦病的臨床效果方面與乳果糖為同等程度(lanthier,pl.andmorgan,m.,gut,26:415,1985；uribe,m.,etal.,dig.dis.sci.,32:1345,1987；heredia,d.etal.,j.hepatol,7:106,1988；riggio,o.,etal.,dig.dis.sci.,34:823,1989)，被用作高氨血症治療用的藥劑。

另外，作為水溶性食物纖維，可以使用具有脂質代謝改善效果(膽固醇的降低作用或中性脂肪的降低作用)的果膠(原果膠、果膠酯酸、果膠酸)、瓜爾膠酶分解物、羅望子膠等。瓜爾膠酶分解物具有血糖值上升的抑制效果或胰島素節省效果(大和谷一彥ら、日本栄養·食糧學會誌,46:199,1993)。此外，作為水溶性食物纖維，高分子水溶性食物纖維可以使用魔芋葡甘露聚糖、海藻酸、低分子海藻酸、車前草、阿拉伯樹膠、海藻多糖類(纖維素、木質素樣物質、瓊脂、卡拉膠、海藻酸、褐藻糖膠、海帶多糖)、微生物膠(韋蘭膠、凝膠多糖、黃原膠、結冷膠、葡聚糖、普魯蘭多糖、中性樹膠)、其他膠(種子來源的刺槐豆膠、羅望子膠、他拉膠、樹液來源的刺梧桐膠、黃蓍膠)等，低分子水溶性食物纖維可以使用聚葡萄糖、難消化性環糊精、麥芽糖醇等。

另一方面，作為不溶性食物纖維，可以使用纖維素、半纖維素、木質素、甲殼素、殼聚糖、大豆食物纖維、小麥麩皮、pinefiber、玉米纖維、甜菜纖維等。作為不溶性食物纖維的生理功能，通過在大腸中增加不消化物的體積、縮短通過時間，從而具有增加排便次數、增加便量的效果。

作為維生素類，例如可以使用維生素a、胡蘿蔔素類、維生素b族、維生素c、維生素d族、維生素e、維生素k族、維生素p、維生素q、煙酸、尼克酸、泛酸、生物素、肌醇、膽鹼、葉酸等。作為維生素，已知有13種。

作為礦物質類，例如可以使用鈣、鉀、鎂、鈉、銅、鐵、錳、鋅、硒等，還可以使用天然物來源的微量元素，例如礦物質酵母的銅、鋅、硒、錳、鉻、葡糖酸銅、葡萄糖酸鋅等。作為有機酸，例如可以使用蘋果酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸等。對體液進行管理時，通常成為問題的電解質為鈉、氯、鉀、磷、鈣及鎂。對礦物質的處方進行調整時，考慮以下三點：(1)被攝入至細胞內的礦物質是否充分地分布？(2)患者的內分泌環境是否能夠充分地適應營養基質的給予量和種類？(3)滲透壓物質對腎臟的負荷量的推測以及用於維持適當的尿滲透壓的水分的給予量是否適合？

這些附加的營養素可以使用化學合成的成分和天然物來源的成分中的任一種。另外，還可以將含有目標成分的食品作為原材料進行配合、使用。這些成分可以至少配合1種或者組合配合2種以上。

本發明的組合物作為滲透壓例如為300～1000mosm/l、優選為300～750mosm/l。另外，本發明的組合物在室溫(25℃)下進行測定時，作為粘度，例如為1～40cp(mpa·s)、優選為3～20cp。此外，作為本發明的組合物的卡路裡，例如為0.5～3kcal/ml、優選為1～2.5kcal/ml、更優選為1～2kcal/ml。本發明組合物的形態可以是固體、也可以是液體、還可以是凝膠狀或半固體。

本發明的組合物可以通過飲料、乳製品、流食、經腸營養劑的領域中的公知方法進行製造。例如，當本發明組合物的使用形態為液態時，可以使用下述方法等：在預先對該組合物(原料液)進行加熱滅菌後、根據需要的冷卻後無菌地填充到容器中的方法(例如並用了超高溫(uht)滅菌法(例如130～145℃、1～10秒)或高溫(htst)滅菌法(例如100～130℃、1～60秒)和無菌填充(包裝)法的方法)；當本發明組合物的使用形態為液態時，可以使用下述方法等：在將該組合物(原料液)填充到容器中後，與容器一起進行加熱滅菌的方法(例如乾餾法、高壓釜法)等。即，本發明組合物的使用形態為液態時，可以使用在將基於該組合物的均質化物(將原料液或滅菌液均質化後的產物)根據需要再次進行加熱滅菌(例如超高溫(uht)滅菌法或高溫(htst)滅菌法)後進行冷卻，然後無菌地進行填充的方法；或者在填充到罐容器或軟袋等中之後，與容器一起進行加熱滅菌的方法等。此外，當本發明組合物的使用形態為粉末狀時，可以使用在將基於該組合物的均質化物根據需要進行真空蒸發濃縮或冷凍濃縮之後，例如進行噴霧乾燥或冷凍乾燥的方法等。

本發明的組合物作為其用途，還可以表述如下(1)～(11)。

(1)一種磷吸收的抑制方法，其包含將發酵乳製品和低聚糖或者含有它們的組合物(經口)給予(攝取)至對象的工序。

(2)發酵乳製品和低聚糖的用於磷吸收抑制的用途。

(3)一種磷吸收抑制用組合物的製造方法，其包含配合發酵乳製品、低聚糖和藥學上可容許的載體的工序。

(4)一種用於添加至醫藥品(醫藥組合物)或飲食品(飲食組合物)且被用於磷吸收抑制的組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖。

(5)一種對醫藥組合物、營養醫藥組合物、醫藥品、藥劑、飲食組合物、飲食品、營養組合物、特別用途食品、營養功能食品、健康食品等賦予磷吸收抑制效果的方法，其包含將發酵乳製品和低聚糖或含有它們的組合物添加(配合)至醫藥組合物、營養醫藥組合物、醫藥品、藥劑、飲食組合物、飲食品、營養組合物、特別用途食品、營養功能食品、健康食品等中的工序。

(6)一種用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的方法，其包含將發酵乳製品和低聚糖或含有它們的組合物給予至對象的工序。

(7)發酵乳製品和低聚糖在製造用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物中的用途。

(8)發酵乳製品和低聚糖在用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者中的用途。

(9)一種用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物的製造方法，其包含配合發酵乳製品、低聚糖和藥學上可容許的載體的工序。

(10)一種用於添加至醫藥品或飲食品且用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的組合物，其含有發酵乳製品和低聚糖。

(11)一種對醫藥組合物、營養醫藥組合物、醫藥品、藥劑、飲食組合物、飲食品、營養組合物、特別用途食品、營養功能食品、健康食品等賦予用於因磷的過量攝入所導致的疾病的治療或預防這兩者或任一者的效果的方法，其包含將發酵乳製品和低聚糖或含有它們的組合物添加至醫藥組合物、營養醫藥組合物、醫藥品、藥劑、飲食組合物、飲食品、營養組合物、特別用途食品、營養功能食品、健康食品等中的工序。

需要說明的是，本說明書中引用的全部現有技術文獻作為參照納入本說明書中。

實施例

1.試驗材料和試驗方法

1.1.飼料

發酵乳中，以脫脂奶作為培養基，對乳酸菌(從meijibulgariaplainyogurt中分離的保加利亞乳桿菌(lactobacillusbulgaricus)和嗜熱鏈球菌(streptococcusthermophilus))進行培養，對該獲得的培養物進行冷凍乾燥。然後，以10-kgy對該經冷凍乾燥的發酵乳進行電子束滅菌，進行製備(製造)。另一方面，低聚半乳糖(gos)原料(cup-oligo)中，gos的含量為73重量％。

對照食使用ain93m(ca的含量：0.5重量％、磷的含量：0.3重量％)。發酵乳和gos原料的試驗食(yg食)使用用發酵乳的冷凍乾燥物將酪蛋白的一部分取代、用gos將蔗糖的一部分(5重量％)取代所製作者。此時，對照食和試驗食(yg食)中，按照ca、磷、粗蛋白的濃度達到同等的方式進行調整。另外，粗蛋白的濃度是利用凱氏定氮法測定的氮含量×6.38而算出的。

將發酵乳與gos原料的試驗食(yg食)及對照食的組成示於表1。

表1

這裡，將表1的「不含鈣及磷的ain-93m礦物預混物」的組成示於表2。

表2

另外，將表1的「含重酒石酸膽鹼的ain-93m維生素預混物」的組成示於表3。

表3

1.2.動物

使用32隻11周齡的wistar系雄性大鼠(從日本slc購入)。在明暗循環為12小時的室溫(25℃)房間中用不鏽鋼代謝籠單獨地飼養這些大鼠。將這些大鼠馴化1周之後，按照各體重在組間達到均勻的方式分成以下4組，每組8隻。這裡，ppi為奧美拉唑鈉(omepralinjection20、astrazeneca公司)。

-control(對照)組(對照食的給予和溶劑的給予)

-ppi組(對照食的給予及ppi的給予)

-yg組(yg食的給予及溶劑的給予)

-yg+ppi組(yg食的給予及ppi的給予)

1.3.試驗方法

對所有的組(對照組、ppi組、yg組、yg+ppi組)僅在暗期的時間帶給予對照食或yg食(試驗飼料)共12周。此時，在對照組及ppi組中應用對飼法(pairfeeding)，與yg組和yg+ppi組的試驗飼料的攝取量一致。此外，在ppi組合yg+ppi組中，在暗期開始的1個小時之前，每日以20mg/kg-bw的用量將ppi皮下給予至所述大鼠。另外，作為預備試驗，當以20mg/kg-bw的用量將ppi皮下給予至成熟大鼠時，確認到：相對於胃液的ph為基線的ph：1.8±0.2，皮下給予後2～5小時後的ph達到7.0±0.2、9～12小時後的ph達到2.5±0.3，顯示了顯著性的高數值。另外，在對照組和yg組中，作為同樣的方法，在暗期開始的1小時之前，每日以20mg/kg-bw的用量將生理鹽水皮下給予至所述大鼠。其中，全部組在試驗期間使它們自由地攝取離子交換水。

在試驗開始後的第4周、第12周，收集各大鼠的糞尿3天，用於ca、磷的測定。這裡，在試驗結束時，在戊巴比妥麻醉下從腹部大動脈採血，將各大鼠處死。此外，在將各大鼠處死之後，將各大鼠的右大腿骨摘出，用乙醇(70％)進行保存，用於x射線ct的測定、μct的測定、骨強度的測定。

·利用x射線ct進行大腿骨的骨密度(bmd)和骨強度的測定(latheta的ct拍照)

使用動物用ct裝置latheta(lct-100m、aloka公司)，以1mm的間隔對各大鼠的右大腿骨的圖像進行拍照。然後，使用latheta軟體(version1.31)對這些拍照得到的圖像進行分析，算出密質骨密度、松質骨密度、總骨密度、密質骨寬度、最小截面慣性矩(minimummomentofinertiaofcross-sectionalarea，mmica)、截面慣性極矩(polarmomentofinertiaofcross-sectionalarea，pmica)。以大腿骨為代表的骨一般來說由「密質骨」和「松質骨」這2種結構部構成，根據骨的種類，這2種結構的比例有所不同。這裡，密質骨是覆蓋骨的表面部的堅硬、緻密的結構。另一方面，松質骨是小而細的骨複雜地組合而成的網格狀的結構。此外，「密質骨密度」是指「密質骨」部分的骨密度(每單位體積(單位面積)的骨的量)。「松質骨密度」是指上述「松質骨」部分的骨密度(每單位體積(單位面積)的骨的量)。「總骨密度」是指上述「密質骨」部分和「松質骨」部分合計的總骨密度(每單位體積(單位面積)的骨的量)。這均是表示骨的強度的指標。另外，「密質骨寬度」是指密質骨的厚度。已知若骨的粗細相同，則密質骨的寬度越厚，則有力學強度變得越高的傾向。此外，「最小截面慣性矩(mmica)」是表示對彎曲的強度的截面強度的指標之一。為對圓棒樣的構件按照發生彎曲的方式施加荷重時，對該彎曲的荷重的強度的指標。此時，截面慣性矩越大，則對彎曲越強。即，通過對多個骨比較最小的截面慣性矩，可以相對地比較對彎曲的強度。另一方面「截面慣性極矩(pmica)」是表示對扭曲的強度的截面強度指標之一。為對圓棒樣的構件按照發生扭曲(在將一端固定的狀態下使相反側一端旋轉)的方式施加荷重時，對該扭曲的荷重的強度的指標。實際上，截面慣性極矩由構件截面的半徑和荷重負荷的大小來決定。此時，截面慣性極矩越大，則對扭曲越強。即，通過對多個骨在相同條件下設定荷重的負荷、比較截面慣性極矩，可以相對地比較對扭曲的強度。

·利用μct測定大腿骨遠端骨骺的骨微細結構(μct拍照)

使用μct(scanxmate-l080、comscantecno公司)，以2mm的長度對各大鼠右大腿骨距離生長板0.5mm之處的圖像進行拍照。與通常的ct相比，μct的特徵在於，雖然拍照的視野小，但解析度(最終能夠識別的最小尺寸)高。μct下，可以在非破壞狀態下，對試樣的內部結構詳細地進行觀察，實際的條件情況下，可以辨別1～10μm的形狀。該拍照條件為管電壓：80kv、管電流：100μa、倍率：6.96、像素大小：14.368×14.368×14.368μm。此外，為了減弱射束硬化效應，使用0.1mm厚度的黃銅板濾波器。tri/3d-bon軟體(ratocsystemsengineering公司)，計算骨小梁的骨密度(bv/tv，％)、骨小梁寬度(tb.th，μm)、骨小梁數(tb.n，mm-1)、骨小梁間隙(tb.sp，μm)、骨髄空間的星體積(starvolume)(v*m.space，mm3)、骨小梁的星體積(v*tr，mm3)、單位組織體積的節點(nd：3個以上骨小梁的結合點)數(n.nd/tv)、單位組織體積的終點(termini)(tm：未與其他骨小梁結合的端點)數(n.tm/tv)、單位組織體積的皮質(ct：與密質骨的結合點)數(n.ct/tv)、單位組織體積的骨的分析部分的總骨架線長(tsl/tv)、總體積(tt.v，mm3)、密質骨體積(ct.v，mm3)、密質骨體積的比例(ct.v/tt.v，％)、平均的密質骨寬度(ct.th，mm)、最小截面力矩(imin，mm5)、密度權重最小截面力矩(imindn，mm(mm2))。這裡，「骨小梁」是指松質骨的基本單位，如網格那樣縱橫遍布的海綿狀的部分。這裡，與密質骨相比，骨代謝更為旺盛。另外，「骨髄」是指骨小梁的間隙。在這裡生成紅細胞、白細胞、血小板等。「骨小梁寬度」是指骨小梁的厚度，「骨小梁數」是指每單位長度的骨小梁的個數。「骨小梁間隙」是指2個骨小梁的間隙的寬度。這些均是表示松質骨的強度的指標。此外，各數值例如可以通過根據μct獲得的骨的斷層的圖像對骨小梁的三維結構進行分析，從而定量地計算。此外，「星體積」是骨疏鬆化的指標，是從任意的位置在所有方向上沒有遮擋地可視範圍的體積。例如，當骨髄空間保持直線連續性時，骨髄空間的星體積增大。另外，當骨小梁保持直線連續性時，骨小梁的星體積增大。即，在星體積的分析中，計算骨髄空間的星體積和骨小梁的星體積，將這些數值作為骨疏鬆化的指標進行使用。另外，節點支撐分析(node-strutanalysis)是將骨小梁結構僅看作為點和線的結構體來評價骨小梁結構的方法，對骨小梁圖像實施圖像處理，使骨小梁結構骨架化、二維地進行表示。接著，在求出節點(3個以上的骨小梁的結合點)、終點(未與其他骨小梁結合的端點)、皮質(骨小梁與密質骨的結合點)之後，將節點、終點、皮質連接，求出總骨架線長，將各數值作為骨小梁的內部結構的變化指標進行使用。

·三點彎曲試驗

使用進行了latheta的ct拍照和μct拍照的右大腿骨，利用骨強度試驗機(bonestrengthtestermodeltk-252c、室町機械公司)進行三點彎曲試驗。即，將右大腿骨放置在支撐器具(間隔：15mm)上，以5mm/分鐘的恆定速度垂直地對大腿骨的中央部施加力量直至骨被折斷，算出斷裂能量、剛性、最大荷重。這裡，三點彎曲試驗中的「斷裂能量」是指對受試試樣施加荷重時，至受試試樣發生斷裂所需要的總能量。另外，「剛性」是指不易在彎曲或扭曲的力作用下變形的程度。即，當在力的作用下變形小時、剛性增大，當變形大時、剛性減小。這均是表示受試試樣的強度的指標。

·ca和磷的收支(balance)

使用溼式灰化裝置(multiwave3000、perkinelmer公司)，在濃硝酸的存在下將試樣飼料、糞、尿灰化之後，使用icp裝置(icp-s7500、島津製作所公司)測定ca、磷。此外，表觀的ca的吸收量(mg/3日)利用「ca攝取量」－「糞中的ca排洩量」計算，表觀的ca吸收率(％)通過[「ca攝取量」－「糞中的ca排洩量」]/「ca攝取量」×100計算，ca蓄積量(mg/3日)通過「表觀的ca吸收量」－「尿中的ca排洩量」計算，ca蓄積率(％)通過[「表觀的ca吸收量」－「尿中的ca排洩量」]/「ca攝取量」×100計算。此時，與ca同樣，也計算磷的參數。

·統計分析

用平均值±標準差評價全部的數據。此外，利用bartlett檢驗對全部的數據確認方差齊性(equalityofvariance)。這裡，當數據可見方差齊性時，用ppi和食物這兩個因素進行雙因素方差分析(twowayfactorialanalysisofvariance)。此外，在雙因素方差分析中，當交互作用顯著時(交互值(valueofinteraction)為0.05以下時)，進行tukey-kramer多重檢驗。另一方面，當數據未見方差齊性時，進行kruskal-wallis檢驗，然後進行steel-dwass多重檢驗。此時，將p＜0.05看做是統計學上顯著。另外，使用excel統計2012(socialsurveyresearchinformationco.)進行統計分析。此外，在表7和表8中，不同符號之間具有統計學顯著差異時，使用「a」、「b」、「c」的符號。

2.試驗結果

2.1.體重

在試驗結束時，對照組的體重為340.6±5.2g、ppi組的體重為347.3±4.2g、yg組的體重為348.5±4.1g、yg+ppi組的體重為348.6±5.5g。此時，這些組之間的體重沒有顯著性差異。

·總大腿骨的骨密度和骨強度

將利用x射線ct獲得的大腿骨的骨密度或骨強度的測定結果和三點彎曲試驗的測定結果示於表4。這裡，通過ppi，大腿骨的總骨密度、密質骨密度、松質骨密度、密質骨厚度顯著地降低(在表2的「對照組」與「ppi組」的比較、「yg組」與「yg+ppi組」的比較中，雙因素方差分析中的p值(ppi)為0.0008～0.0113，均小於5％，表示顯著地降低)。另一方面，通過yg食，大腿骨的總骨密度、密質骨密度、松質骨密度、密質骨厚度顯著地增加(在表2的「對照組」與「yg組」的比較、「ppi組」與「yg+ppi組」的比較中，雙因素方差分析中的p值(飼料)為0.0001以下，均小於5％，表示顯著地增加)。另外，通過ppi的給予，可見顯著地降低了最小截面慣性矩、降低了截面慣性極矩的傾向(p值：0.0623)。而通過yg食的給予，顯著地增加了最小截面慣性矩及截面慣性極矩。此外，在三點彎曲試驗中，通過ppi的給予，雖然顯著地降低了大腿骨的剛性及最大荷重，但對斷裂能量沒有影響。另一方面，通過yg食的給予，可見顯著增加了斷裂能量及最大荷重、增加了大腿骨剛性的傾向(p值：0.0576)。另外，在對照組(310±11)與ppi組(274±4)的比較中，通過ppi的給予，大腿骨的剛性降低，但在yg組(311±11)與yg+ppi組(309±8)的比較中，通過ppi的給予，大腿骨的剛性未見變化。即，一直以來通過ppi，大腿骨的剛性降低，而通過yg食，大腿骨的剛性增加，通過yg+ppi食的給予，可見ppi的影響被抵消的傾向(interactionvalue：0.0611)。由這些結果可知，在未給予ppi的健康時以及給予了ppi的骨強度降低時，均通過yg食提高(增加)了骨強度。

·大腿骨的遠端骨骺的骨微細結構

將利用μct獲得的大腿骨的微細結構的測定結果示於表5。這裡，通過ppi的給予，未見對松質骨的骨小梁的骨密度、骨小梁數、骨小梁間隙的影響，但可見降低骨小梁寬度的傾向(p值：0.0549)。另一方面，通過yg食的給予，顯著地提高(增加)了松質骨的骨小梁的骨密度、骨小梁數、骨小梁間隙，但未見對骨小梁寬度造成影響。另外，在星體積分析中，通過ppi的給予，均未見對骨髄空間的星體積、骨小梁的星體積造成影響。而通過yg食的給予，顯著地降低了骨髄空間的星體積、顯著地增加了骨小梁的星體積。此外，在節點支撐分析中，通過ppi的給予，對任一個指標均無影響。而通過yg食的給予，可見顯著地增加了節點數、皮質數、總骨架線長度，降低終點數的傾向(p值：0.0955)。由這些結果可知，在未給予ppi的健康時及給予了ppi的骨強度降低時，通過yg食均改善了大腿骨的骨小梁的骨結構。因此啟示，為了治療或預防骨質疏鬆症等骨結構惡化的疾病，可以有效地使用本發明的組合物。

將利用μct獲得的大腿骨的密質骨形態的測定結果示於表6。這裡，在密質骨形態的測量中，通過ppi的給予，密質骨體積、密質骨體積的比例、平均密質骨寬度、最小截面慣性矩、密度權重最小截面慣性矩顯著地降低。而通過yg食的給予，密質骨體積、密質骨體積的比例、平均密質骨寬度、最小截面慣性矩、密度權重最小截面慣性矩顯著地增加。由這些結果可知，未給予ppi的健康時以及給予了ppi的骨強度降低時，通過yg食，均提高(增加)了密質骨的骨密度、改善了大腿骨的海面骨的骨結構。

·ca和磷的收支

將ca的收支結果示於表7、將磷的收支結果示於表8。這裡，通過ppi的給予，未見對ca的收支造成顯著的影響。而通過yg食的給予，顯著地增加了第4周的ca吸收及第4周和第12周的尿中ca排洩。另外，ppi組中，第4周的磷吸收量和磷吸收率顯著地增加。而yg組中，第4周的磷吸收量、磷吸收率均未顯著地增加。此時，在yg+ppi組中，與ppi組相比，磷吸收量、磷吸收率均顯著地減少。因此可知，在健康時通過yg食未對磷收支造成任何影響，但在隨著ppi給予的胃酸降低時，通過yg食，降低了磷吸收。此外，第12周的磷吸收量、磷吸收率、第4周和第12周的尿中磷排洩量均可見與其相同的傾向。由這些結果可知，通過yg食的給予，具有降低磷吸收的效果，在磷吸收異常增加時，具有使磷吸收正常化的效果。

以上結果顯示，含有發酵乳製品和低聚糖的組合的組合物具有骨強度的改善效果、骨密度的改善效果、磷吸收的抑制效果(磷代謝的正常化效果)。在此之前，發酵乳製品和低聚糖的組合對磷代謝所造成的任何影響是完全未知的。即，本發明中，通過對11周齡的高齡大鼠用12周的時間經口給予(經口攝取)發酵乳製品和低聚糖，從而首次對長期的影響進行了評價和驗證。並且作為其結果，首次發現了發酵乳製品和低聚糖的組合具有使胃酸降低時的磷代謝異常(磷的過量攝入)正常化的效果。另外，本發明中還首次發現了，發酵乳製品和低聚糖的組合具有特別優異的骨強度的改善效果和骨密度的改善效果。因此可知，通過經口給予本發明的組合物，可以一邊使磷代謝的異常正常化、一邊改善骨強度或骨密度，特別是對於胃酸降低者具有非常有益的效果。

產業實用性

通過長期給予作為本發明組合物的發酵乳製品和低聚糖的組合，例如可以抑制因伴隨胃酸分泌降低的ph上升所導致的磷的過量攝入，可以使磷的吸收回復至正常的範圍。即，本發明的組合物可以改善磷的代謝異常。另外，本發明的組合物可以改善因磷的過量攝入所導致的疾病。另外，本發明的組合物由經長期的食用經驗證實了安全性和味覺性優異的成分構成，將其進行給予時，身體的負擔小、可以長期將其進行給予。