一種主治關節炎的中成藥及製備和質量控制方法
2023-12-03 04:55:31
專利名稱：一種主治關節炎的中成藥及製備和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種由植物為原料的主治關節炎的醫藥配製品及製備和質量控制方法；具體涉及「追風透骨丸」和「追風透骨片」製備方法及質量控制方法的改進。
背景技術：
收載於中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方製劑第十八冊和第十一冊的治療關節炎的中成藥「追風透骨丸」和「追風透骨片」，它是由制川烏、白芷、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、制沒藥、麻黃、川芎、制乳香、秦艽、地龍、當歸、茯苓、赤小豆、羌活、天麻、赤芍、細辛、防風、制天南星、桂枝、甘松、硃砂24味中藥材製成，具有通經活絡，祛風鎮痛之功效，用於治療風寒溼痺，肢節疼痛，肢體麻木等症，臨床療效顯著。
「追風透骨丸」的原劑型為水蜜丸，採用傳統制丸工藝，藥材未經提取而直接以粉末入藥，在製劑過程中加入大量的蜜糖制丸，再用硃砂包衣製成。長期以來存在吸收不完全、服用量大、攜帶不方便、易吸潮黴變、含糖量高，不適合糖尿病人服用等缺點。另外，產品採用硃砂包衣，硃砂含汞量高，長期服用可引起體內汞的蓄積，人體有汞蓄積中毒的危險；「追風透骨片」中仍含有硃砂，它是將硃砂粉碎成極細粉入藥，細辛提取揮髮油入藥，其餘22味是用水提物入藥製成的片劑，現有資料顯示，細辛揮髮油有毒，不宜提取入藥。
據文獻「謝偉，陸滿文.細辛揮髮油的化學與藥理作用.寧夏醫學雜誌，1995，17(2)121-124」和文獻「柯銘清.中草藥有效成分理化與藥理特性.湖南科學技術出版社.1982108」報導細辛入藥的主要品種有遼細辛和華細辛，其中以遼細辛的來源豐富、產量大。細辛揮髮油的主要成分為甲基丁香酚和黃樟醚。其揮髮油毒性遼細辛油對蛙、小鼠、家兔等均先呈奮，隨後轉入抑制，隨意運動及呼吸減慢，反射消失，最後因呼駁麻痺而死亡。遼細辛油的小鼠ipLD50為1.02±0.04ml/kg。未成年大鼠ip遼細辛油18日，於末次給藥後24小時及1周斷頭處死。其生化學檢查及病理切片檢查結果與對照組之間無明顯差異。華細辛油的小鼠ip MLD為200mg/kg，LD50為247mg/kg。
黃樟醚具有使動物呼吸中樞麻痺及致癌作用。飼料中混入1％黃樟醚2年後，可使28％大鼠發生肝癌。
因此，為了提高藥物的療效，降低藥物的毒性，有必要改進原追風透骨丸和原追風透骨片的處方和製備方法。
發明內容
本發明的目的是為了克服上述不足，提供一種療效確切、安全可靠、服用量小、攜帶方便的追風透骨丸和追風透骨片換代產品，包括膠囊、片劑、濃縮丸等劑型，本發明的另一個目的是提供該產品的製備方法和質量控制方法。
為達到本發明的目的，所採用的技術方案是一種主治關節炎的中成藥，是由下列重量百分比藥材量製成，將白芷、麻黃、川芎、當歸、羌活、防風、桂枝、甘松8味用超臨界CO2萃取法提取脂溶性提取物A；然後將這8味藥材提取脂溶性部位後的藥渣B，加制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星11味藥材一起用40～80％的乙醇溶液提取，所得的醇提物濃縮至稠膏為C；制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍4味藥材粉碎成細粉，與稠膏C混合均勻，乾燥、粉碎後得幹膏粉D；幹膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E，按常規的中藥製劑工藝製成口服製劑，用高效液相色譜法測定，1g藥物E幹品中含赤芍以芍藥苷(C23H23O11)計不得少於1.0mg。
處方制川烏 5.21％ 白芷 5.21％ 制草烏5.21％制香附 5.21％ 甘草 5.21％ 炒白朮2.60％制沒藥 1.05％ 麻黃 5.21％ 川芎 5.21％制乳香 2.60％ 秦艽 2.60％ 地龍 5.21％當歸2.60％ 茯苓 10.42％赤小豆5.21％羌活5.21％ 天麻 2.60％ 赤芍 5.21％細辛5.21％ 防風 2.60％ 制天南星 5.21％桂枝2.60％ 甘松 2.60％為了服用攜帶方便和適合於臨床使用，所述的口服製劑可以是膠囊劑、片劑、濃縮丸。
為達到本發明的另一個目的，提供該產品的製備方法，按如下步驟製備
步驟一取處方量的白芷、麻黃、川芎、當歸、羌活、防風、桂枝、甘松，置超臨界萃取設備中，用CO2流體作為萃取介質，萃取條件為萃取壓力為24～30MPa，萃取溫度為40～60℃，解析壓力為5～7MPa，解析溫度為30～50℃，萃取時間為1～3小時，從解析釜得到脂溶性提取物A，從萃取釜得到藥渣B；步驟二將步驟一得到的藥渣B，與處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星，用40～80％的乙醇溶液提取1～3次，每次0.5～3小時，合併提取醇溶液，濾過，濃縮得稠膏C；步驟三取處方量的藥材制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍，粉碎成細粉，與稠膏C混合均勻，乾燥、粉碎後得幹膏粉D；步驟四取幹膏粉D與脂溶性提取物A混勻，得藥物E；步驟五取藥物E，按常規的中藥製劑工藝製成口服製劑。
其口服製劑可採用常規的中藥製劑工藝製備，如取藥物E，加入藥用輔料，經制粒或不經制粒直接灌裝膠囊，製成膠囊劑；或取藥物E，加入藥用輔料，經制粒，壓製成片劑；或取藥物E，加入藥用輔料，用塑製法或泛製法製成濃縮丸。
本發明的產品及其製備方法是發明者採用正交試驗法，通過藥效學篩選獲取的，試驗如下1、確定提取條件的正交試驗取處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星等11味，與超臨界萃取後的藥渣B混合，採用正交試驗法，以鎮痛、抗炎藥效學指標篩選提取溶劑、溶劑用量、提取時間、提取次數及粉碎度。正交表選取L16(4)5表，因素水平見表1。
表1 提取因素水平表
2供試品的製備按處方比例稱取藥材，桂枝25g、白芷50g、麻黃50g、川芎50g、當歸25g、羌活50g、防風25g、甘松25g，粉碎成粗粉，經CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力26Mpa，萃取溫度40℃，解析壓力6Mpa，解析溫度30℃，萃取時間為3小時。另稱取制川烏50g、制草烏50g、制香附50g、甘草50g、炒白朮25g、秦艽25g、地龍50g、茯苓100g、天麻25g、細辛50g、制天南星50g，按下表7中16組條件粉碎成不同細度，與超臨界提取後的藥渣B混合，按下表7中16組不同條件分別提取，濾過，合併濾液，靜置12小時，取上清液，60℃減壓回收乙醇並濃縮至稠膏狀，備用。制沒藥10g、制乳香25g、赤小豆50g、赤芍50g粉碎成細粉，加入上述稠膏中，混勻，60℃下減壓乾燥，粉碎成細粉。超臨界萃取物用適量乙醇溶解，噴入上述幹膏粉中，混勻，即得16組供試品。
3正交試驗各組供試品的藥效學試驗所篩選藥物是臨床用於治療關節炎的有效方藥，根據其適應症我們選擇了鎮痛的2個指標①對醋酸所致小鼠扭體反應的影響②對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響；以及抗炎的3個指標①對尿酸鈉(MSU)誘發大鼠足腫脹的影響②對大鼠棉球肉芽腫的影響③對二甲苯所致小鼠耳腫脹試驗的影響。通過上述5個指標對正交試驗各組樣品進行了藥效學試驗。
3.1試驗材料與劑量3.1.1藥品與試劑追風透骨丸為陽性對照藥品；冰醋酸，0.6％醋酸(由冰醋酸配成)；消炎痛，25mg/片；戊巴比妥鈉；肝素鈉注射液；0.9％氯化鈉注射液，500ml/瓶；尿酸(Lancaster)25g/瓶，Morecambe.England，Batch10057758；注射用青黴素鈉，80萬單位/只。
3.1.2動物Wistar大鼠，體重140±30g，昆明種小鼠，體重20±2g，3.1.3劑量的選擇原追風透骨丸及原追風透骨片的人臨床劑量為4g生藥量/次，2次/日。正交試驗各組樣品以得膏量與投料藥材量作相應換算，與原製劑服用生藥量相等。選擇大劑量組進行實驗，小鼠中劑量相當於人臨床劑量的9.01倍，常用按10倍計算；大鼠中劑量，相當於人臨床劑量的6.25倍，常用按7.5倍計算。在此基礎之上，大劑量小鼠提高至20倍，大鼠提高至15倍。一天兩次的劑量作一次給藥。
3.2方法與結果3.2.1鎮痛試驗(1)對醋酸所致小鼠扭體反應的影響取小白鼠，按體重隨機分18組，每組10隻，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16劑量分別為0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg(即g幹膏/kg動物，以下相同)；17組為生理鹽水對照組。各組均等容積0.4ml/只灌胃給藥7天，末次給藥30min後，各鼠分別腹腔注射0.6％HAC0.2ml/只，觀察各鼠產生扭體潛伏期、15min內扭體次數及產生扭體反應的小鼠數，計算鎮痛百分率。結果見表2。
鎮痛百分率(％)＝(NS對照組扭體數-給藥組扭體數)/NS對照組扭體數×100％表2 對醋酸所致小鼠扭體反應的影響(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由表可知，篩選藥物7、12、15組能減少扭體次數，延長產生疼痛反應的潛伏期，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.05)。
(2)對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響①取雌性小鼠在22℃室溫條件下，開啟熱板式鎮痛實驗儀，將溫度定於(55±0.5)℃，預熱10min，然後每次投入1隻小鼠記錄小鼠自投入至出現痛反應(舔後足)的時間，共測2次，每次間隔5min，求平均值(以平均值不超過30s為合格)。
②篩選合格小鼠190隻，分18組，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組均等容積0.4ml/只灌胃給藥，給藥後30、45、60、90、120min同前測定痛反應時間2次，求平均值。若小鼠60s仍無痛反應，則停止測試，按60s計算，實驗結束後按不同時間所測得之痛閾平均值，計算痛閾提高百分率。結果見表3。
痛閾提高百分率＝(用藥後平均痛閾值-用藥前平均痛閾值)/用藥前平均痛閾值×100％表3 對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，料P＜0.01由以上熱板實驗結果可知，篩選藥物2、12組鎮痛作用均於給藥後120min出現，小鼠疼痛反應時間及痛閾提高百分率與生理鹽水組比有顯著性差異(P＜0.05)。
3.3.2.2藥物抗炎作用試驗(1)對尿酸鈉(MSU)誘發大鼠足腫脹的影響微晶型尿酸鈉(MSU)的製備取8g尿酸置於1600ml沸水中，調pH至7.4，再加熱至95℃，室溫冷卻並輕輕攪拌，過濾，得到微晶尿酸鈉，高溫(200℃)滅菌。用前以無菌生理鹽水配成100mg/ml的混懸液。
取雄性大鼠190隻，按體重隨機分18組，每組10隻，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.57、0.87、0.96、1.11、0.75、0.75、0.75、0.66、0.72、0.75、0.59、0.56、0.69、0.66、0.69、0.66g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組等容積3m1/只，均為致炎前灌胃給藥7天。末次給藥1小時後致炎，無菌操作，給大鼠右後足蹠皮下注射MSU(100mg/ml)、0.1ml/只，採用大鼠足爪容積測定法測定致炎前和致炎後不同時間(每小時1次，連續5～6次)大鼠足爪容積變化，以致炎前、後足爪容積的差值作為腫脹度，計算各腫脹度及腫脹抑制率，並作t檢驗。結果見表4。
腫脹率(％)＝(致炎後足蹠容積-致炎前足蹠容積)/致炎前足蹠容積×100％腫脹抑制率(％)＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％
表4對MSU誘導大鼠足腫脹的影響(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由以上結果可知，篩選藥物2、12組在致炎後3h即出現作用，11組4h出現作用，足腫脹度明顯減小，腫脹抑制率也明顯升高，與對照組比有非常顯著性差異(P＜0.05)，特別是12組3h時出現作用，作用維持至4h仍較明顯(P＜0.05)，說明篩選藥物2、11、12可對抗MSU引起的炎症反應。
(2)對大鼠棉球肉芽腫的影響取雄性大鼠190隻，按體重隨機分19組，每組10隻，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.57、0.87、0.96、1.11、0.75、0.75、0.75、0.66、0.72、0.75、0.59、0.56、0.69、0.66、0.69、0.66g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組均等容積灌胃給藥3ml/只。乙醚淺麻醉，無菌操作，將兩個脫脂棉球分別植入大鼠兩側腋窩皮下，棉球形狀應和植入部位一樣。
大鼠術前灌胃給藥3天，術後再連續給藥7天，第8天脫臼處死大鼠，取出棉球，置60℃烤箱烤至恆重，減去棉球原重量，即為肉芽腫重量，肉芽腫重量以g表示，比較各組肉芽腫重量，並計算抑制率，結果見表5。
腫脹率＝(致炎後足蹠容積-致炎前足蹠容積)/致炎前足蹠容積×100％腫脹抑制率＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％表5對大鼠棉球肉芽腫的影響(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由以上結果可知，篩選藥物12(P＜0.05)、15(P＜0.01)能明顯抑制肉芽腫生長，與陰性對照組比有顯著性差異。
(3)對二甲苯所致小鼠耳腫脹試驗的影響取昆明種小白鼠190隻，按體重隨機分19組，每組10隻，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16劑量分別為0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg；17組為生理鹽水對照組。各組均等容積(0.4ml/只)灌胃給藥7天，末次給藥0.5小時後，將二甲苯塗於小鼠右耳前後兩面，50ul/只，2h後將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm打孔器分別在同一部位打下圓耳片，稱重，計算腫脹抑制率。結果見表6。
腫脹度＝(右耳片重量-左耳片重量)/左耳片重量×100％腫脹率＝(對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度×100％腫脹抑制率＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％表6 對二甲苯致小鼠耳腫脹度的影響(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01
由以上結果可知，篩選藥物2、10組能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹、提高腫脹抑制率，與生理鹽水組比有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)。
4藥效學試驗結果分析根據以上5種指標的藥效學試驗數據，採用綜合評價法對正交試驗各組結果進行統計分析。各指標的權重係數均取0.2，總分為100分，所得5種指標得分相加，得各組綜合評分，結果見表7。計算公式如下(1)鎮痛指標扭體鎮痛百分率評分＝(20/最大鎮痛百分率)×各組鎮痛百分率2h痛閾提高百分率評分＝(20/最大鎮痛提高百分率)×各組痛閾提高百分率(2)抗炎指標(3種指標計算方法相同，其中MSU模型取3h結果)腫脹抑制率評分＝(20/最大腫脹抑制率)×各組腫脹抑制率表7 提取正交試驗結果
從極差R的大小可知，各因素對藥效結果的影響程度依次為A＞C＞E＞B＞D。根據K值的大小進行直觀分析，確定最佳工藝為A3B4C2D1E2，即藥材粉碎成通過φ0.6cm篩網的粗粒(D1)，與超臨界提取後的藥渣混合後，加7倍量(C2)60％乙醇(A3)提取2次(E2)，每次2小時(B4)。
5本發明的產品與原追風透骨丸、原追風透骨片的藥效學比較為了考察優選工藝的合理性與重複性，根據優選工藝製備了三批產品(藥物E)，分別進行了上述5種指標的藥效學試驗，並與原追風透骨丸及追風透骨片進行了藥效學比較，結果見表8。
表8本發明的產品與原追風透骨丸、原追風透骨片的藥效學比較結果
注與生理鹽水對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01將三批產品藥效結果的平均值與正交試驗各組試驗比較可知，扭體鎮痛百分率、MSU 3h腫脹抑制率、肉芽腫脹抑制率均優於正交試驗各組結果，熱板2h痛閾提高百分率在各組結果中列第二，二甲苯耳腫脹抑制率處於中上水平。與原追風透骨丸和原追風透骨片組比較，本發明產品的各項指標均優於該二組結果。
結果表明1、本發明的製備方法合理，產品的鎮痛、抗炎作用優於原工藝製備的追風透骨丸。
2、採用乙醇溶液提取優於水提，治療效果優於追風透骨片；3、採用60％乙醇溶液提取效果最佳。
本發明的另一個目的是提供該產品的質量控制方法採用高效液相色譜法測定，1g藥物E幹品中含赤芍以芍藥苷(C23H23O11)計不得少於1.0mg。其色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，體積濃度為15～30％的甲醇水溶液為流動相，檢測波長為230nm，理論板數按芍藥苷峰計算應不低於1500；對照品溶液的製備精密稱定芍藥苷對照品，加乙醇或甲醇溶液製成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取本品1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇或甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用乙醇或甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本發明的有益效果1、本發明的製備方法合理，產品的鎮痛、抗炎作用優於原工藝製備的追風透骨丸和追風透骨片。
2、產品中無硃砂和細辛的揮髮油成分，避免了汞蓄積中毒的危險及細辛揮髮油的毒性，保證了臨床用藥的安全性，因此臨床安全性高於原追風透骨丸及原追風透骨片。
3、由於在製劑過程中不加蜜糖，糖尿病人服用不會導致血糖增高，因此較原追風透骨丸擴大了適用人群。
4、原追風透骨丸服用劑量為每次6g、每日2次，按新工藝製備的膠囊、片劑、濃縮丸的每次服用劑量為1.2～2g，每日服用次數不變，因此服用量可減至原製劑的1/3～1/5，患者的治療的依從性大為提高。
5、本發明中增加了芍藥苷的含量測定，芍藥苷為本品處方中赤芍的主要有效成分，具有解熱、鎮痛、抗炎、抗潰瘍等藥理作用，與本品的療效密切相關。因此增加該成分的含量測定有利於控制本品的質量，從而較原追風透骨丸和原追風透骨片提高了產品的質量標準。
圖1為製備本發明產品的工藝流程簡圖。
下面通過實施例進一步闡述本發明的技術方案。
具體實施例方式
實施例1(見圖1)稱取白芷2832g、麻黃2832g、川芎2832g、當歸1416g、羌活2832g、防風1416g、桂枝1416g、甘松1416g，採用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為24MPa，萃取溫度為40℃，解析壓力為5MPa，解析溫度為30℃，萃取時間為3小時。得692g脂溶性提取物A及藥渣B15.87kg備用；稱取制川烏2832g、制草烏2832g、制香附2832g、甘草2832g、炒白朮1416g、秦艽1416g、地龍2832g、茯苓5660g、天麻1416、細辛2832g、制天南星2832g，與超臨界萃取所餘藥渣B混合，採用60％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的7倍，提取時間為2小時，提取2次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥568g、制乳香1416g、赤小豆2832g、赤芍2832g粉碎成細粉，與上述稠膏C混合，乾燥，粉碎後得幹膏粉D，幹膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E15.24kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；21％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算為2020；對照品溶液的製備取經五氧化二磷減壓乾燥器中乾燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇製成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的製備精密稱取本品1.0324g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.18mg/g。
實施例2稱取白芷283.2g、麻黃283.2g、川芎283.2g、當歸141.6g、羌活283.2g、防風141.6g、桂枝141.6g、甘松141.6g，採用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為30MPa，萃取溫度為60℃，解析壓力為7MPa，解析溫度為50℃，萃取時間為1小時。得63.1g脂溶性提取物A及藥渣B 1.54kg備用；稱取制川烏283.2g、制草烏283.2g、制香附283.2g、甘草283.2g、炒白朮141.6g、秦艽141.6g、地龍283.2g、茯苓566.0g、天麻141.6、細辛283.2g、制天南星283.2g，與超臨界萃取所餘藥渣B混合，採用40％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的8倍，提取時間為0.5小時，提取3次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥56.8g、制乳香141.6g、赤小豆283.2g、赤芍283.2g粉碎成細粉，與上述稠膏C混合，乾燥，粉碎後得幹膏粉D，幹膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E1.48kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；30％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算為2250；對照品溶液的製備取經五氧化二磷減壓乾燥器中乾燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇製成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的製備精密稱取本品1.0235g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.25mg/g。
實施例3稱取白芷1416g、麻黃1416g、川芎1416g、當歸708g、羌活1416g、防風708g、桂枝708g、甘松708g，採用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為27MPa，萃取溫度為50℃，解析壓力為6MPa，解析溫度為40℃，萃取時間為2小時。得352g脂溶性提取物A及藥渣B 7.95kg備用；稱取制川烏1416g、制草烏1416g、制香附1416g、甘草1416g、炒白朮708g、秦艽708g、地龍1416g、茯苓2830g、天麻708、細辛1416g、制天南星1416g，與超臨界萃取所餘藥渣B混合，採用80％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的5倍，提取時間為3小時，提取1次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥284g、制乳香708g、赤小豆1416g、赤芍1416g粉碎成細粉，與上述稠膏C混合，乾燥，粉碎後得幹膏粉D，幹膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E 7.50kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；25％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算為2340；對照品溶液的製備取經五氧化二磷減壓乾燥器中乾燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇製成每1ml含0.06mg的溶液，即得；
供試品溶液的製備精密稱取本品1.0013g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.12mg/g。
實施例4將實施例1所述的藥物E，經以下工藝製成不同製劑(1)膠囊劑取3.81kg藥物E，加入微粉矽膠390g，混勻，制粒，灌裝膠囊，製成10000粒，每粒裝0.42g，測得芍藥苷為0.41mg/粒。
(2)濃縮丸(塑製法)取3.81kg藥物E，加入適量微粉矽膠300g、羧甲基澱粉鈉100g，混勻，採用塑製法，以乙醇溶液制軟材，壓丸條，乾燥，包衣，製成45000丸，每丸重0.1g，測得芍藥苷含量為1.03mg/g。
(3)濃縮丸(泛製法)取3.81kg藥物E，加入適量微粉矽膠300g、羧甲基澱粉鈉100g，混勻，以水或乙醇溶液泛丸，乾燥，包衣，製成45000丸，每丸重0.1g，測得芍藥苷含量為1.06mg/g。
(4)取3.81kg藥物E，加入適量微粉矽膠400g、羧甲基澱粉鈉150g，混勻，制粒，壓片，包衣，製成10000片。每片重0.45g，測得芍藥苷含量為0.43mg/粒。
權利要求
1.一種主治關節炎的中成藥，含有藥材白芷、麻黃、川芎、當歸、羌活、防風、桂枝、甘松、制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星、制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍23味的成分，其特徵在於由下列重量百分比的藥材製備而成，處方制川烏5.21％白芷5.21％ 制草烏 5.21％制香附5.21％甘草5.21％ 炒白朮 2.60％制沒藥1.05％麻黃5.21％ 川芎5.21％制乳香2.60％秦艽2.60％ 地龍5.21％當歸 2.60％茯苓10.42％赤小豆 5.21％羌活 5.21％天麻2.60％ 赤芍5.21％細辛 5.21％防風2.60％ 制天南星5.21％桂枝 2.60％甘松2.60％將白芷、麻黃、川芎、當歸、羌活、防風、桂枝、甘松8味藥材用超臨界CO2萃取法提取脂溶性提取物A；然後將這8味藥材提取脂溶性部位後的藥渣B，加制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星11味藥材一起用40～80％的乙醇溶液提取，所得的醇提液濃縮至稠膏為C；制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍4味藥材粉碎成細粉，與稠膏C混合均勻，乾燥、粉碎後得幹膏粉D；幹膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E，按常規的中藥製劑工藝製成口服製劑，用高效液相色譜法測定，1g藥物E幹品中含赤芍以芍藥苷計不得少於1.0mg。
2.如權利要求所述的中成藥，其特徵在於所述的口服製劑是膠囊劑、片劑、濃縮丸。
3.一種製備權利要求1所述的中成藥的方法，其特徵在於按如下步驟製備步驟一取處方量的白芷、麻黃、川芎、當歸、羌活、防風、桂枝、甘松，置超臨界萃取設備中，用CO2流體作為萃取介質，萃取條件為萃取壓力為24～30MPa，萃取溫度為40～60℃，解析壓力為5～7MPa，解析溫度為30～50℃，萃取時間為1～3小時，從解析釜得到脂溶性提取物A，從萃取釜得到藥渣B；步驟二將步驟一得到的藥渣B，與處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白朮、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細辛、制天南星，用40～80％的乙醇溶液提取1～3次，每次0.5～3小時，合併提取醇溶液，濾過，濃縮得稠膏C；步驟三取處方量的藥材制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍，粉碎成細粉，與稠膏C混合均勻，乾燥、粉碎後得幹膏粉D；步驟四取幹膏粉D與脂溶性提取物A混勻，得藥物E；步驟五取藥物E，按常規的中藥製劑工藝製成口服製劑。
4.如按權利要求3所述的中成藥的製備方法，其特徵在於所述的步驟五取藥物E，加入藥用輔料，經制粒或不經制粒直接灌裝膠囊，製成膠囊劑；或取藥物E，加入藥用輔料，經制粒，壓製成片劑；或取藥物E，加入藥用輔料，用塑製法或泛製法製成濃縮丸。
5.如權利要求1所述的藥物E的質量控制方法，其特徵在於高效液相色譜法的色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，用體積濃度為15～30％的甲醇水溶液作流動相，檢測波長為230nm，理論板數按芍藥苷峰計算應不低於1500；對照品溶液的製備精密稱定芍藥苷對照品，加乙醇或甲醇溶液製成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取本品1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇或甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用乙醇或甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
全文摘要
一種主治關節炎的中成藥及製備和質量控制方法，具體涉及「追風透骨丸」和「追風透骨片」製備方法及質量控制方法的改進。採用白芷等8味用超臨界CO
文檔編號A61K9/20GK1733004SQ20051003665
公開日2006年2月15日 申請日期2005年8月23日 優先權日2005年8月23日
發明者嚴志標, 彭紅英, 王巖, 林偉雄, 陳彥 申請人:廣州敬修堂(藥業)股份有限公司