促生長素抑制素受體2拮抗劑的製作方法

2023-12-08 07:34:26 1

專利名稱：促生長素抑制素受體2拮抗劑的製作方法
促生長素抑制素受體2拮抗劑相關申請本申請是專利合作條約(PCT)申請，要求2008年4月16日提交的美國申請號 12/104, 318的優先權，其是PCT申請號PCT/US2007/081，430和美國申請號11/872，367的 部分繼續，這兩個申請都在2007年10月15日提交，要求2006年10月16日提交的美國臨 時申請60/8 ，637的權益。這些申請的內容在此通過引用整體併入。政府支持本發明的內容得到國家衛生研究院授予的資助號DK-59953的支持。政府可對本 發明具有某些權利。
背景技術：
環狀十四肽促生長素抑制素-H(SRIF)最初從下丘腦分離並被鑑定為生長激素 (GH)從垂體前葉釋放的生理抑制劑。該十四肽在3-位置和14-位置的兩個半胱氨醯氨基 酸殘基的硫氫基之間具有橋聯鍵或環化鍵。SRIF和SRIF相關類似物影響多個細胞過程，特 別是與GH釋放相關的那些過程，還抑制某些腫瘤的生長。例如，類似物[D-Trp8]-SRIF具 有胺基酸序列(環 314) H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-ΟΗ,並且具有比SRIF高得多的抑制GH釋放的效價。SRIF通過與膜結合的結構相似受體家族相互作用而引發其生物效應。五種SRIF 受體已經被克隆並稱為SSTR 1-5。所有五種受體以高親和力結合SRIF和觀胺基酸SRIF 肽SRIF-28(來自豬胃腸道以及豬和羊的下丘腦)。已經鑑定了各種SSTR的激動劑和拮抗 劑。促生長素抑制素肽和類似物可以被修飾以實現選擇性結合個體SSTR。此類肽和類 似物用於例如區分個體受體的個體信號傳導功能。受體特異性肽和類似物的使用已經導致 不同受體亞型介導體內SRIF不同功能的觀念。例如，SSTR2和SSTR5的選擇性拮抗劑已經被鑑定並用於揭示這些受體的不同功 能。認為這兩種受體是外周組織中主要的亞型。認為SSTR2介導對生長激素、胰高血糖素 和胃酸分泌的抑制。激動劑奧曲肽顯示對SSTR2的一定特異性。相反，SSTR5表現為主要 參與控制胰島素和澱粉酶釋放。已經描述了分別對SSTR2和SSTR5具有特異性的類似物。SSTR3介導對胃平滑肌收縮的抑制。顯示了特異性結合SSTR3的促生長素抑制素 類似物。SSTR4存在於腦垂體、肺、胃腸道、腎和某些腫瘤中，基本上排除其他SRIF受體。認 為它在結合SRIF後被活化。SSTR4和SSTRl特異性配體已經用於例如治療內皮細胞的方法 中。對SSTR4特異性的受體選擇性促生長素抑制素肽類似物是本領域已知的。促生長素抑制素受體在病理狀態、特別是胃腸道的神經內分泌腫瘤中表達。源於 促生長素抑制素靶組織的大多數人類腫瘤具有保守的促生長素抑制素受體。促生長素抑制 素信號傳導的效應首先發現於生長激素生成腺瘤和TSH生成腺瘤中；約一半的內分泌失活 腺瘤展示促生長素抑制素受體。90%的類癌和大部分胰島細胞癌，包括它們的轉移，通常具 有高密度的促生長素抑制素受體。然而，僅10%的結腸直腸癌且沒有外分泌胰腺癌含有促生長素抑制素受體。腫瘤中的促生長素抑制素受體可以例如使用體外結合方法或使用體內 成像技術來鑑定；後者允許準確定位患者中的腫瘤及其轉移。因為胃腸胰腺腫瘤中促生長 素抑制素受體是功能性的，它們的鑑定可用於評估類似物抑制患者中過度激素釋放的治療 效力。鑑於其作為診斷和治療靶的用途，需要強力結合SSTR2同時顯示僅最小傾向結合 其他四種受體的促生長素抑制素拮抗劑。對於用作診斷成像劑而言，此類拮抗劑具有超越 SSTR2選擇性激動劑的優點，因為所述拮抗劑優選不被內化。

發明內容
本發明描述了與新穎SSTR2-特異性拮抗劑相關的組合物以及使用所述拮抗劑的方法。一個實施方案涉及與選自由下述組成的組的SSTR2結合的促生長素抑制素 拮抗劑(i) D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (ii) Η2Ν_ρΝ0 2Phe-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(iii) H2N-pN02Phe_c [DCys-A ph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (iv) H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (NMe.苯 甲醯基)-DiTrp-Lys-Thr-Cys]-2Nal-NH2 ; (v)&N-Cpa-c [DCys-D-Agl (匪e.苯甲醯 基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (vi) H2N-Cpa-C [DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_ NH2 ； (vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(viii)Cbm-Cpa-c[DC ys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph (Cbm)-DTr p-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Na I-NH2 ； (xi) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -NH2 ； (xii) H2N-Cpa-C [DCys-Ap h (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2 ； (xiii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-C ys] -Aph (Hor) -NH2 ； (xiv) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -DAph (Cbm) -NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -Aph (Cbm) -NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C [DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ； (xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3 )-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (xviii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OH) -DTrp-Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xix) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -5F-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2Nal-NH2 ； (xx) H2 N-Cpa-c [DCys-Aph (Cbm) -5F-Trp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxi) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DAp h (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (xxii) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xxiii) Ac-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (xxiν) H2N -Cpa-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxv) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DTrp-NMeLys -Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr -NH2 ；(xxvii) DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2 ；禾口(xxviii)DOT A-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys] DTyr-NH2。在特定實施方案中，拮抗劑不顯著 內化入表達SSTR2的細胞並減少奧曲肽誘導的SSTR2內化。在特定實施方案中，促生長素 抑制素拮抗劑還包括螯合劑、絡合劑、綴合劑或標記。在特定實施方案中，拮抗劑相對於其 他組織優先被腫瘤吸收。在特定實施方案中，拮抗劑相對於其他組織優先被腫瘤吸收。在 特定實施方案中，腫瘤細胞中拮抗劑吸收與腎細胞中拮抗劑吸收的比值為至少約2. 0，在施 用後4小時測量。
一個實施方案涉及放射成像癌症的方法，包括(a)施用包含促生長素抑制素拮 抗劑和放射性核素的組合物；和(b)檢測所述放射性核素，其中所述促生長素抑制素拮抗 劑選自由下述組成的組⑴ D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；
(ii)H2N-PNO2Phe-C [DCys-Tyr-DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (iii)H2N-pN02Phe-c [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (iv) H2N-Cpa-C [DCys—L—Agl (NMe. 苯甲醯基 PDiTrp-Lys-Thr-Cys]-2Nal-NH2 ; (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (匪e.苯甲醯 基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (vi) H2N-Cpa-C [DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_ NH2 ； (vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(viii)Cbm-Cpa-c[DC ys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph (Cbm)-DTr p-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Na I-NH2 ； (xi)H2N-Cpa-C[DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ； (xii)H2N-Cpa-C[DCys-A ph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2 ； (xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-C ys] -Aph (Hor) -NH2 ； (xiv) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -DAph (Cbm) -NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -Aph (Cbm) -NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C [DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ； (xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3 )-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (xviii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OH) -DTrp-Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xix) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -5F-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2Nal-NH2 ； (xx) H2 N-Cpa-c [DCys-Aph (Cbm) -5F-Trp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxi) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DAp h (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (xxii) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xxiii) Ac-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (xxiν) H2N -Cpa-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxv) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DTrp-NMeLys -Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr -NH2 ；(xxvii) DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2 ；禾口(xxviii)DOT A-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys] DTyr-NH2。在特定實施方案中，促生長素抑制 素拮抗劑結合SSTR2。在特定實施方案中，促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。一個實施方案涉及組合物製備用於治療腫瘤的藥劑的用途，其中所述組合物包含 本發明所述的促生長素抑制素拮抗劑和放射性核素。在特定實施方案中，促生長素抑制素 拮抗劑選擇性結合SSTR2。一個實施方案涉及用於診斷放射成像癌症的試劑盒，包含(a)適合容器中本發明 所述的促生長素抑制素拮抗劑，其中促生長素抑制素拮抗劑(i)用至少一种放射性核素 標記；(ii)未標記並與適合容器中至少一種用於標記的放射性核素一起提供；或(iii)未 標記並能夠隨後用至少一种放射性核素標記；和(b)使用說明書。在特定實施方案中，促生 長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。一個實施方案涉及用於治療癌症的試劑盒，包含(a)適合容器中本發明描述的 促生長素抑制素拮抗劑，其中，在放射性核素標記促生長素抑制素拮抗劑後，拮抗劑以對 於癌症治療而言的治療有效量存在，並且其中促生長素抑制素拮抗劑(i)用至少一种放 射性核素標記，(ii)未標記並與適合容器中至少一種用於標記的放射性核素一起提供，或
(iii)未標記並能夠隨後用至少一种放射性核素標記；和(b)使用說明書。在特定實施方 案中，促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。
一個實施方案涉及放射成像或治療癌症的化合物，包含有效量的、與本發明所述 促生長素抑制素拮抗劑偶聯的放射性核素。在特定實施方案中，拮抗劑選擇性結合SSTR2， 不顯著內化入表達SSTR2的細胞中，並且減少奧曲肽誘導的SSTR2的內化。


圖1示例說明了一些sst2拮抗劑的拮抗性質，使用鈣釋放分析。圖2示例說明，儘管對照激動劑[Tyr3]_奧曲肽可以減少sst2內化，但測試的 sst2選擇性拮抗劑甚至以10 μ M的濃度單獨給予時沒有效應。而且，它們防止由[Tyr3]-奧 曲肽誘導的sst2內化。圖3顯示ELISA內化分析中另一類似物(32)的拮抗性質。圖4是顯示拮抗劑純度和內化效力的表。圖5是顯示拮抗劑結合性質的表。圖6A和6B顯示了顯示如實施例11所述SSTR2類似物吸收的數據。
具體實施例方式如本發明所述，除非特別指明表示僅一個，否則「一」或「一個」表示一個或多個。本發明使用的「施用」涵蓋所有向患者提供物質的適合方式。常用途徑包括口服、 舍下、經黏膜、經皮、直腸、陰道、皮下、肌肉內、靜脈內、動脈內、鞘內、經導管、經植入體等。 在一些實施方案中，組合物在腫瘤附近施用或直接施用至腫瘤，例如通過直接注射入腫瘤 或當腫瘤是血液腫瘤時注射入血液。本發明使用的「患者」包括任何脊椎動物，包括馬、羊、山羊、牛、豬、鳥、貓和靈長類 物種。患者可以是例如人。本領域普通技術人員將認識到，就一種物種而討論的特定的免 疫共刺激分子、信號傳導分子、細胞標誌、細胞類型、感染劑等可以在不同物種中具有相應 的類似物，並且此類類似物及其在相應和相關物種中的使用包括在本發明內。本發明使用的「腫瘤」包括實體瘤和非實體瘤；以及從癌前病變和良性腫瘤到癌、 惡性和轉移腫瘤的不同的腫瘤發育階段。如本發明使用的，例如在SSTR2拮抗劑上下文中，「吸收」指與腫瘤結合存在的拮抗 劑的量；並且區別於「內化」，「內化」指個體細胞水平上的作用，例如分子進入細胞內環境的 能力。因此，本發明各種實施方案具有高度吸收但不內化。如本發明使用的，所有溫度是。C，並且所有比值按體積計。液體物質的百分比也按 體積計。術語「選擇性地結合」或「選擇性結合」在本發明指拮抗劑優先結合特定結合配偶 體，例如，選擇性結合SSTR2的拮抗劑強力結合SSTR2，同時表現出對其他SSTR或結合配偶 體的弱結合或無結合。通常，「選擇性」拮抗劑對選擇性受體的結合比其對其他受體的結合 強約10倍、約100倍或約1000倍(或更高)。本發明涉及預想不到的發現特定修飾有效產生與其他克隆SRIF受體相比對 SSTR2具有選擇性的SRIF肽類似物。已經發現對SSTR2高度選擇性的一類促生長素抑制素 肽類似物。這些肽類似物是促生長素抑制素拮抗劑，並且儘管不內化入具有SSTR2受體的 細胞中，但這些類似物以比相當的受體選擇性促生長素抑制素肽激動劑更大的量被吸收。這些肽選擇性結合克隆的SSTR2而不活化受體，並且這些肽類似物被碘化或以其他方式被 放射性標記時，保留其期望的生物學性質。因此，這些新肽用於確定腫瘤位置和受體SSTR2 的細胞表達，以及用於調節某些藥理學功能，而無作為此前施用SRIF特徵的某些伴隨的副 作用。這些SRIF肽拮抗劑被放射性標記時可用於例如閃爍掃描術以在體外或體內定位表 達這些受體的腫瘤，使用SPECT或PET。除放射性標記以外的標記是本領域已知的，例如熒 光標記，並且可選擇地使用。當肽類似物包括適合的螯合的放射性核素時，這些類似物用作 適合治療腫瘤的放射性核素療法的放射性藥物。提供了對SRIF受體SSTR2具有選擇性親和力的SRIF肽拮抗劑；它們優選地還對 SSTR2具有高親和力，例如等於約IOnm或更小的KD。這些肽包括SRIF的縮短的環狀類似 物，其中環部分被縮短至僅六個殘基，並且其中在N末端存在一個殘基並且優選地在C末端 添加一個殘基。換言之，1-，4_，5_，6_，11-，12-和13-位置殘基從14-殘基的天然SRIF中 缺失，產生各種七肽。這些七肽可以具有在C末端添加的殘基，例如殘基15，以形成奧曲肽。標準的三字母縮寫表示α -胺基酸殘基，並且其中胺基酸殘基具有異構形式，除 非另外明確指明，否則其代表L-形式的胺基酸(例如，Ser = L-絲氨酸)。「L」或「D」指 特定胺基酸的D-異構體和L-異構體。當下文提及肽中位置時，參考天然14-殘基促生長 素抑制素(SRIF)肽的相應位置進行編號。表現出對SSTR2期望特異性的代表性肽拮抗劑的實例包括例如其中位置1、4_6和 11-13的殘基優選被消除的拮抗劑。實例包括(環3-14)Xaa1-Xaa2-D-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa^--^-^^14-；其中 Xaa1 是 des-Xaa ；Xaa2 是 Trp (A)、 Phe (B)、Nal 或 Tyr (其中 A 是 H、Cl、F、Br、Me、N02、0Me 或 N-甲醯基並且 B 是 H、滷素、CH3、 NO2或OCH3) ；D-Xaa3是D-Cys、D-Pen、D-HCys或具有SH-側鏈的另一 D-異構體α -胺基酸； Xaa4, Xaa5 和 Xaa6 是 des-Xaa ；Xaa7 是 Aph (Q1)、Ala (噻吩基)、Tyr、ITyr 或 Trp (A)(其中 Q1 是 Cbm、OH-Cbm, CH3-Cbnu OCH3-Cbnu OEt-Cbm, Cbm-Et (OEt)2 或 Hor) ；Xaa8 是 D-Trp (A)、 Trp (A)、Tyr、D-Tyr、Phe (B)、D-Phe (B)、L 或 D-Bz IHi s、L 或 D- (DNP) Hi s、L 或 D-Aph (Cbm)； Xaa9 是 Lys> N°MeLys、hLys、NaMehLys> Orn 或 NaMeOrn ；Xaa10 是 Thr> Ser 或 Val ；Xaa11 > Xaa12和Xaa13是des-Xaa ；Xaa14是Cys、Pen、hCys或具有SH側鏈的L-異構體α -胺基酸； 並且 Xaa15 是2恥1、0-2恥1、Aph ^j2)、D-Aph ^j2)、(R1) Cha、(R1)D-Cha, (R1)Leiu (R1)D-Leiu Tyr、D-Tyr、Trp、D-Trp 或 des-Xaa (其中隊是 H 或 C°Me，並且 ％ 是 Cbm、OH-Cbm, CH3-Cbnu OCH3-Cbm或OEt-Cbm)。此外，2-位的Tyr可以被放射性碘標記、絡合、綴合或螯合至與肽 類似物的N末端殘基的α-氨基直接或經接頭連接的物質。該物質可以發揮作用，例如連 接放射活性核素(即放射性核素)至肽。例如，大環螯合劑，例如D0TA，可以添加在N末 端，通過將其與) 直接結合或者使用接頭例如GABA( γ氨基丁酸，參見例如美國專利號 6，022，523，其內容在此通過引用整體併入)或0々13間接與)(脅2結合。SRIF類似物的另一實例包括胺基酸序列(環3-14)Xaa1-Xaa2-D-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-LyS-Thr-Xaa1 J-Xaa12-Xaa13~Cys ；胃巾 Xaa2 ^IX^^ Phe ；D-Xaa3 ^ D-Cys ； Xaa7是Aph (Q1)、Tyr或ITyr ；並且) 是D-Trp或D-Aph (Cbm)；並且其中其他的Xaa基團 如本發明所描述。本發明使用的「Trp」和「D-Trp」指未取代的殘基以及其中在Trp的5_或6_位置 進行氫的單取代的殘基。這些位置上的取代可以包括例如氯代、氟代、溴代、甲基、硝基和甲氧基，使用氯代、氟代和溴代或使用甲醯基取代吲哚N的氫。本發明使用的「Nal」指在β -碳原子上被萘基取代的丙氨酸異構體，與萘的連接 優選在環的2位置或者任選在1位置。本發明使用的「Aph」指氨基苯基丙氨酸，其中氨基優選連接至苯環的4位置，但是 連接在2-或3-位置一般是等價的。本發明使用的「Aph (Cbm)，，指4-脲基-苯基丙氨酸。 Aph(OH-Cbm)表示4-(3-羥基)-脲基-苯基丙氨酸。本發明使用的「Aph(CH3-Cbm) 」指 4- (3-甲基)-脲基-苯基丙氨酸。本發明使用的"Aph (OCH3-Cbm)，，指4- (3-甲氧基)-脲 基-苯基丙氨酸。本發明使用的「Aph [ (EtO) 2Et-Cbm] 」指4- {3- [2- (2-乙氧基-乙氧基)-乙 基]}-脲基-苯基丙氨酸。本發明使用的「ITyr」指碘化的L-酪氨酸。本發明使用的「Cpa」 指氯-Phe，例如4-ClPhe0本發明使用的「Aph (Hor) 」指4_[ (2，6- 二氧-六氫-嘧啶_4_羰 基)-氨基]-苯基丙氨酸。本發明使用的「SRIF」指14-殘基環狀促生長素抑制素肽。本 發明使用的「Cha」指環己基胺。本發明使用的「Pen」指青黴胺(β_巰基纈氨酸)。本發明 使用的「hLys」或「hCys」指在側鏈具有一個額外CH2基團的α -胺基酸。C末端通常被醯胺化，儘管可以使用等價物，例如Gly-OH。肽的N末端可以各種 方式修飾而不顯著不利地影響結合親和力。認為對這些環狀肽的所有修飾被包括作為整 體發明肽的部分。例如，可以絡合劑或綴合劑(Z)的形式向N末端胺基酸進行多種添加， 然後絡合劑或綴合劑(Z)可用於將需要的部分結合至肽或提供標記。此類部分Z—般可 選自由下述組成的組基於DOTA的螯合劑和基於DTPA的螯合劑、基於NOTA的螯合劑、羰 基化合物、2-胼基煙醯胺(HYNIC)、N4-螯合劑、去鐵案(desferrioxamin)和NxSy-螯合 劑，全部任選與放射性同位素、用於加滷的酪氨酸(Tyr)、螢光染料或生物素絡合。Cpa還 可用作氚化的前體。可以連接螯合劑，例如DTPA、DOTA, HYNIC和P2S2_C00H。螯合劑包括 例如P-NH2-BZ-DOTAO-P-氨基苄基-1，4，7，10-四氮雜環十二烷_1，4，7，10-四乙酸)和 DOTA-P-NH2-醯苯胺[1，4，7，10-四氮雜環十二烷-1，4，7，10-四乙酸單(對氨基醯苯胺)]。 或者，如果需要，螯合劑可通過適合的接頭(L)共價連接至N末端。適合的接頭包括例如酪 氨酸、賴氨酸、二氨基丁酸、二氨基丙酸、聚乙二醇、脂肪酸及其衍生物、β-丙氨酸、5-氨基 戊酸、肌氨酸和葡萄糖醛酸。當Tyr出現在N末端時，其可以被放射性碘化或以其他方式標 記。具有超過約20個胺基酸的醯基還可以存在於N末端，因為如果需要，N末端殘基還可 用大的部分醯化而不損失選擇性。已經通過測試本發明類似物肽與五種不同克隆的人SRIF受體的相互作用而證明 了其對SSTR2的結合選擇性。一般而言，表達受體的重組細胞經洗滌和勻漿而製備適合緩 衝液中粗製蛋白勻漿。在典型分析中，將適量的來自細胞勻漿的蛋白質放入小體積的處於 適當PH的適當分析緩衝液中。以適宜的濃度向混合物中添加候選物質，例如潛在的SRIF 激動劑和拮抗劑，並監測候選物質與報告多肽之間的相互作用。結合SSTR2但對其他受體 也顯示親和性的受體拮抗劑可以用於本發明的各種組合物和方法，包括用於腫瘤成像和治 療的試劑盒、組合物和方法。在優選實施方案中，本發明多肽僅明顯強力結合SSTR2，並且它 們的結合表現出高親和力。對克隆的SRIF受體進行受體結合分析，並使用競爭性分析產生IC5tl值，IC50值指 示從50%結合位點替代被測量的靶配體飽和濃度所必需的競爭性配體的濃度。本發明還涉及例如內部操作地檢測人體中健康狀態下不含有大量SSTR2的組織中惡性腫瘤的方法。該方法包括例如(i)向這種人施用一種組合物，該組合物包含足以通 過Y檢測探針檢測的量的SSTR2選擇性肽，其中所述肽例如用99mTc、161Tb、9°Y、mLu、123I或 125I放射活性標記，和(ii)在允許活性物質結合併吸收入腫瘤以及血液清除放射性後，使 這種人經受通過使用Y檢測探針的身體相關區域的放射檢測技術。在一個實施方案中，本發明SRIF拮抗劑對SSTR2具有高度選擇性，並且它們以大 於對SSTR2僅部分特異性的其他已知SRIF肽激動劑的量被吸收。更重要地，認為SRIF拮 抗劑用於治療表達SSTR2的腫瘤細胞。此類治療可包括例如放射療法，其成功直接取決於 腫瘤吸收的輻射的量。由於它們被腫瘤細胞吸收而不必然被腫瘤細胞內化，因此，本發明拮 抗劑比已知激動劑更有效用於腫瘤放療。本發明拮抗劑還用於閃爍掃描術以確定表達SSTR2的細胞和組織在全身的分布。 通過放射性掃描或磁共振的外部成像的使用允許在體內半定量檢測。本發明拮抗劑還用於選擇性阻斷某些由SSTR2介導的藥理學效應。SRIF的許多效 應是本領域已知的或會知道的。放射性標記的拮抗劑用於治療性治療人體中健康狀態下不含大量SSTR2的組織 中的惡性腫瘤。放射性標記的SSTR2-選擇性肽拮抗劑可以有效用於閃爍掃描術或用於 對抗或控制腫瘤的量包括於組合物中而被施用。放射性標記的肽可例如使用186Re、188Re、 miCdd^Cu^Td^Sru^Te^Pr^Pr^Gd^Ga^Ga^Te^Pt、 mAt^Au^Au^Tb^Pd^Dy^Prn^^^Sm^Gd^Gd^Ho^m、16、、17、、177!^、 1(l5Rh、114Ag、124I 或 131I 來標記。標記的SRIF類似物用於藥物篩選分析以篩選以高親和力結合SSTR2並且是高度 有效拮抗劑的新的有效肽和非肽物質。使用本發明所述對受體SSTR2具有選擇性的配體， 可以獲得對重組產生的受體的基線活性。然後可以進行標記配體和候選物對SSTR2的競爭 性結合分析以確定相對結合親和力。或者，受體功能的抑制劑或修飾劑(例如拮抗劑)的 有希望的候選物可直接加入分析混合物以確定此類候選物對受體的效應。通過比較在候選 物存在或不存在時的受體活性程度，則可以獲得有關候選物質對受體正常功能效應的信息 並因此確定與已知SSTR2選擇性類似物相比其作為激動劑或拮抗劑的功能。下述實施例描 述的環狀SRIF肽是拮抗劑，並且它們用來介導SSTR2的正常功能。本發明描述的肽可通過經典溶液合成來合成，但是醯胺化的肽優選通過本領域已 知的在甲基二苯甲胺(MBHA)樹脂或BHA樹脂上的固相技術合成。具有游離羧基C末端的 肽可如美國專利號7，019，109中的教導來合成，其內容在此通過引用整體併入。具有醯胺 化C末端的肽可如美國專利號.5，874，227的教導來合成，其內容在此通過引用整體併入。 固相合成以逐步方式在C末端開始向鏈中添加胺基酸的方式進行。本領域已知的側鏈保護 基作為具有特定反應性側鏈的任何胺基酸的部分被加入，並且任選地可用於其它情況(例 如 Ρ)，其中此類胺基酸偶聯至建立在樹脂上的鏈上。此類合成提供完全保護的中間體肽 基樹脂。保護基團一般在氧化而在Cys側鏈之間產生二硫鍵之前分離並且肽從樹脂載體裂 解。本發明描述的SRIF類似物還用於治療性適應症，例如促生長素抑制素調節劑。這 種用途中，類似物一般在小於約100微克/千克體重、小於1000微克/千克體重、小於約 100微克/千克體重、小於約10微克/千克體重或小於約1微克/千克體重的水平是有效的。為了延長的作用，可能需要使用約0.1至約2.5毫克/千克體重的劑量水平使用。這 些類似物溶於水並因此可製備為相對濃縮的溶液以施用。本發明的肽不僅提供用於結合SSTR2的更有效的配體，而且使用標記肽(例如本 發明肽的放射性標記形式)可促進更有效拮抗劑的藥物篩選。本領域已知的篩選分析可採用直接來自重組宿主的受體多肽SSTR2，並且可用於 鑑定用於阻斷或模擬促生長素抑制素期望的某些方面同時消除可產生自其他受體的活化 或阻斷的激素的不期望方面的物質。在這方面，如果需要放射性碘化類似物用於篩選目的， 則可以在N末端添加Tyr而取代D0TA，或者可以在2位置使用Tyr而取代Cpa，或者適合的 放射性配體可通過DOTA螯合劑連接。使用候選化合物的競爭性結合分析可首先以該方式 對SSTR2進行以檢索高結合親和力；然後通過篩選多個SRIF受體，可以確認是否存在需要 的僅對該受體的選擇性結合。非放射性標記的肽可用於治療所有已知表達SSTR2的器官的 疾病，所述器官包括肺、胃腸道和腎。因為向SRIF類似物N末端添加不表現為不利影響選擇性結合，應該清楚，這些化 合物可與放射活性核素絡合，目的是將該物質載至腫瘤或希望細胞凋亡的其他組織。例如， 適合的螯合劑可用於將SRIF類似物與前述高度放射活性的金屬絡合。適合螯合放射活性 金屬原子的螯合基團的一些實例是四配位基螯合劑或基團，衍生自乙二胺四乙酸(EDTA)、 二乙烯三胺戊乙酸(DTPA)、環己基1，2-二胺四乙酸(⑶TA)、乙二醇-0，0' -二(2-氨基 乙基)-N，N，N'，N'-四乙酸(EGTA)、N，N-二(羥基苄基)-乙二胺-N，N' - 二乙酸 (HBED)、三乙烯四胺六乙酸(TTHA)、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-N，N'，N"，N"『-四乙酸 (DOTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、1，4，8，11-四氮雜環-十四烷-N，N'，N"，N"『-四 乙酸(TETA)、取代的DTPA、取代的EDTA。其他的螯合劑以及放射活性劑公開於WO 95/22341 和WO 04/082722以及美國專利公布2004/(^似842和2005/0070470，其完整內容在此通過 引用併入。螯合劑可衍生自例如EDTA和D0TA。一些適合的鹽是111^i-OXinth99mTc-酒石 酸鹽，其一般可以在對肽拮抗劑無害的條件下以簡單方式形成。SRIF拮抗劑的溶解度可通過使用親水化合物(例如氫化乳清酸(Hor)或類似物) 醯化N末端氨基、或通過與適合異氰酸酯(例如異氰酸甲酯或異氰酸異丙酯)反應以在N 末端產生脲基而得到提高。如本領域已知增加SRIF拮抗劑作用持續時間的其他物質也可 在N末端連接。與藥學或獸醫學可接受載體組合形成藥物組合物的這些SRIF拮抗劑或其非毒性 鹽可以靜脈內、皮下、肌內、經皮例如鼻內、腦脊髓內或口服施用於動物，包括人和其他哺乳 動物。被設計用於檢測組織中的惡性人腫瘤(包括其轉移)的此類藥物組合物除了藥學可 接受載體物質以外可以包括任選的藥學可接受佐劑、足以外部成像以通過Y檢測探針檢 測或用於對抗或控制腫瘤的作為活性物質的標記的肽拮抗劑。肽拮抗劑應該是至少約90% 純的並且優選應該具有至少約98%的純度；然而，較低的純度是有效的，並且很可用於非 人的哺乳動物。該純度表示所述肽構成存在的所有類似肽和肽片段的所述重量％。對人的 施用應該在醫生指導下對抗具體腫瘤和癌症或調節其中SSTR2受體發揮控制功能的其他 病狀，例如與酪氨酸磷酸酶偶聯以便能夠刺激該酶以介導SRIF的抗增殖效應。所需劑量根 據待治療的特定病狀、病狀嚴重度以及所需治療的持續時間而變化。腫瘤通常表達幾種類型的肽受體(Reubi, J.和Waser，B.，Eur. J. Nucl. Med.Molec. Imaging, 30 :781-793,2003)。多個肽受體的此類組可以包括sst2受體以及鈴蟾肽 受體、CCK受體、VIP受體、GLP-I受體、神經降壓素受體、促胰液素受體、神經調節肽B受體 和CRF受體等。在這種情況下，SSTR2拮抗劑作為混合物與這些各種受體的一種或多种放 射性標記拮抗劑的組合施用應該非常明顯地改善此類腫瘤的體內靶向。此類肽拮抗劑通常以藥學或獸醫學可接受的非毒性鹽形式施用，例如酸加成鹽或 金屬絡合物，例如與鋅、鐵、鈣、鋇、鎂、鋁或類似物的金屬絡合物。此類非毒性鹽的示例有 鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、鞣酸鹽、草酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、藻酸鹽、馬來酸 鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽、抗壞血酸鹽、酒石酸鹽及類似物。還可能希望經延長的時段(例如從單次施用後一周至一年的時段)遞送這些SRIF 拮抗劑，並且可以如本領域公知的，利用緩釋、儲庫或植入劑型。劑型可以含有例如在體液 中具有低溶解度的化合物的藥學可接受的非毒性鹽，例如與多元酸的酸加成鹽、與多價金 屬陽離子的鹽或兩種鹽的組合。相對不溶性鹽可以配製成凝膠，例如硬脂酸鋁凝膠。適合注 射的緩釋儲庫製劑還可以含有分散或封裝於緩慢降解的、非毒性或非抗原性聚合物的SRIF 拮抗劑或其鹽，所述聚合物例如聚乳酸/聚乙醇酸聚合物，例如在美國專利號3，773，919中 所述。治療有效量的肽拮抗劑應該在醫生指導下施用，並且藥物組合物通常含有與常規 的藥學或獸醫學可接受的載體結合的肽。認為治療有效量是經計算為實現所需效應的預定 量。所需劑量根據特定治療和所需治療持續時間而變化；然而，預期約10微克至約1微克 /千克體重/天的劑量將用於治療性治療。可能特別有利的是如之前所述以儲庫或長效形 式施用此類化合物。治療有效量通常是當以生理上可接受的組合物外周(例如靜脈內)施 用時足以實現其約0. 1 μ g/ml至約100 μ g/ml、約1 μ g/ml至約50 μ g/ml或至少約2 μ g/ ml (通常5至10yg/ml)的血漿濃度的SRIF拮抗劑的量。以這些量，它們可用於按需要影 響胃分泌。當組合物用於成像或治療性治療時，放射性標記的化合物的差貯藏期限和/或放 射性核素的短半衰期可能要求使用者在臨床醫院或實驗室進行放射性核素的標記反應。在 此類情況下，可以「試劑盒」的形式為使用者提供各種反應成分。進行所需反應所必需的操 作應該儘可能簡單以使使用者能夠使用正常為一次性的工具從試劑盒製備放射活性標記 的組合物。因此，用於製備放射性藥物組合物、檢測和定位組織中的惡性腫瘤及其轉移的試 劑盒可以包含(i)SSTR2選擇性肽、惰性藥學可接受的載體和/或配製劑以及任選的佐劑， ( )放射活性金屬同位素的鹽或螯合物的溶液，和(iii)含有使試劑盒中存在的成分反應 的處方的使用說明書。用作此類試劑盒的成分的肽拮抗劑可以通過與螯合劑反應而被衍生化。得到的肽 綴合物提供以簡單方式牢固連接放射性核素的便利。含N 二-或多乙酸或其衍生物，例如 前面提到的化合物，已經證明非常適合使各種金屬放射性核素(例如111^1和113mIn)連接至 肽分子。提供於使用者的試劑盒還可以包含上文定義的其他成分以及使用說明書，而具有 有限的貯藏期限的放射性核素的鹽或螯合物的溶液可以單獨提供給使用者。製備用99mTc、186Re或188Re標記的放射性藥物組合物的試劑盒除了上述⑴和(ii) 中定義的成分外可以包含例如還原劑以及需要時的螯合劑，和(iii)使用說明書，具有使 試劑盒成分與高鎝酸鹽溶液形式的"mTc或與高錸酸鹽溶液形式的186Re或188Re反應的處方。如果需要，試劑盒的各種成分可以被組合，條件是它們是相容的。試劑盒應該包含還原 高鎝酸鹽或高錸酸鹽的還原劑，例如連二亞硫酸鹽、金屬還原劑或絡合物穩定還原劑，例如 SnCl2, Sn (II)-酒石酸鹽、Sn (II)-膦酸鹽或焦磷酸鹽、或Sn (II)-葡庚糖酸鹽。高鎝酸鹽 或高錸酸鹽溶液可以簡單地獲自適合的供應商。當放射性核素存在於試劑盒本身中時，與 肽的絡合物生成反應可以簡單地通過在中性介質中組合各組分並使它們反應而發生。為了 該目的，放射性核素可以與結合至如前所述比較弱的螯合劑的螯合物形式的肽反應。當試劑盒包含前述衍生化的肽並預期用於製備用99mTc、186Re或188Re標記的放射 性藥物組合物時，放射性核素將優選以高鎝酸鹽或高錸酸鹽溶液的形式單獨添加。這種情 況下，試劑盒將包含適合的還原劑和需要時的螯合劑，前者還原高鎝酸鹽或高錸酸鹽。可以 使用還原劑，例如連二亞硫酸鹽或金屬還原劑。成分可以任選地被組合，條件是它們是相容 的。其中組合的成分優選被凍幹的這種單組份試劑盒適合通過使用者與放射性核素溶液 反應。可以使用金屬還原劑，例如 Sn(II)、Ce (III)、Fe (II)、Cu(I)、Ti (III)或 Sb (III)； Sn(II)。試劑盒的肽組份可以提供為溶液，例如生理鹽水溶液的形式或在一些緩衝溶液中， 但是其優選以乾燥狀態、例如凍幹狀態存在。當用作注射液體的組份時，其應該是無菌的。 當組份是乾燥狀態時，使用者應該使用無菌生理鹽水溶液作為溶劑。如果需要，組份可以用 適合的穩定劑以常規方式穩定，所述穩定劑例如抗壞血酸、龍膽酸或這些酸的鹽。儘管已經就其優選實施方案描述了本發明，但應該理解，可以做出對本領域普通 技術人員而言顯而易見的各種改變和調整而不背離所附權利要求中提出的本發明範圍。盡 管權利要求在肽序列方面不同地限定了本發明，但應該理解，這預期包括公知為其完全等 價物並且最經常施用的其非毒性鹽。下述實施例被包括以說明本發明優選實施方案。本領域技術人員應理解，隨後實 施例中公開的技術代表發明人發現在實施本發明中作用良好的技術，並因此可以被認為構 成其實施的優選方式。然而，根據本公開內容，本領域技術人員應該理解可以對公開的具體 實施方案進行許多改變並且依然獲得同樣或類似的結果而不背離本發明的精神和範圍。在 此所有專利、申請和參考文獻的公開內容通過引用明確併入本發明。實施例下述實施例示例說明提供許多體現本發明各種特徵的SRIF肽拮抗劑。每個肽中， 位置3和位置14(根據SRIF編號)的半胱氨酸殘基通過環化二硫鍵結合併且可以注釋為 「(環3-14)」或「([]」。實施例1.合成了促生長素抑制素類似物0(^-(^-六廣4』5』6』11』12』13飾&2，D-Cys3, Tyr7, D-4Aph (Cbm)8] -SRIF-2Nal_NH2，具有下述結構(環 3-14) D0TA-Cpa-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cb m) -LyS-Thr-CyS-2Nal-NH2。(肽28)。採用BOC策略的固相方法用於以逐步方式在MBHA樹 脂上合成八肽，大體如『277專利「實施例II」所述。BoC-D-4Aph(Cbm)-0H被預先製備並在 位置8偶聯。在從樹脂切割肽並同時通過HF去除側鏈保護基(除了從Lys去除Fmoc)之後， 通過添加10%碘在甲醇中的溶液直至得到的溶液保持橙色，然後攪拌40分鐘並用抗壞 血酸猝滅，肽在75%乙酸溶液中被氧化以產生二硫橋。通過製備型RP-HPLC純化粗肽， 使用從基線％ B(洗脫劑A = 0.1% TFA，洗脫劑B = 60% CH3CN,40 % A) 1 % B/分鐘增量的線性梯度，流速lOOml/min。然後通過向無水N，N-二甲基甲醯胺(DMF，3.5ml)中純 化肽(32mg, 20 μ Μ)添加 DMF(Iml)中的 DOTA-NHS. 3TFA. HPF6 (Macrocyclics, Dallas, TX) (198mg, 20 μ Μ)和 N，N' - 二異丙基乙胺(DIPEA) (36 μ 1， 22 μ Μ)，將 DOTA 偶聯 在N末端作為螯合劑。混合物在室溫攪拌過夜。反應進程通過分析HPLC跟蹤，並且MS分 析顯示獲得了 預期產物純的 DOTA-des-AA1』4』5』6』11』12』13^ ^ D-Cys3, Tyr7, D_4Aph (Cbm)8， Lys (Fmoc) 9]-SRIF-2Nal-NH2。反應完全後，通過添加的20%哌啶在DMF中的溶液並 等待 30 分鐘而實現從 Lys9 側鏈除去 Fmoc 保護基。DOTA-des-AA1』4』5』6』11』12』13 [Cpa2，D-Cys3, Tyr7, D-4Aph (Cbm) 8]-SRIF-2Nal-NH2通過使用上述相同條件的製備型RP-HPLC脫鹽。最終 環狀DOTA-肽-綴合物的純度通過分析型C^E測定。其是94%純的。MS分析顯示[M+H]+質量為1583. 72Da，其非常接近1583. 62Da的計算質量。該肽 在下文被稱為28號肽。實施例2.實施例1中描述的初始合成被重複，具有兩個改變；在7-位置和8-位置使用 4Aph (Cbm)和 D-Trp 以提供八肽-樹脂 des-AA1』4』5』6』11』12』13 [Cpa2，D-Cys3,4Aph (Cbm)7, D-Trp8, Lys (Fmoc)9] -SRIF-2Nal_MBHA 樹脂。在從醯胺樹脂切割肽並同時通過HF從胺基酸側鏈去除保護基(除了從Lys去除 Fmoc)之後，通過添加10%碘在甲醇中的溶液直至得到的溶液保持橙色，然後攪拌40分鐘 並用抗壞血酸猝滅，肽在75%乙酸溶液中被氧化以產生二硫橋。通過製備型RP-HPLC純 化粗肽，使用從基線％ B (洗脫劑A = 0. 1 % TFA,洗脫劑B = 60% CH3CN, 40% A)l% B/分 鍾增量的線性梯度，流速lOOml/min。向無水N，N-二甲基甲醯胺(DMF，3. 5ml)中純化肽 (34mg 24 μ M)添力口 DMF (150 μ 1)中的 DOTA-NHS. 3TFA. HPF6 (Macrocyclics, Dallas, TX) (24mg, 24. 2 μ Μ)和N，N' - 二異丙基乙胺(DIPEA) 00 μ 1，M μ Μ)。混合物在室溫攪拌過 夜。反應進程通過分析HPLC跟蹤，反應完全後，向反應混合物添加Iml哌啶以從Lys9側 鏈去除 Fmoc 保護基持續 30 分鐘，得到 DOTA-des-AA1,4,5,6,11,12,13[Cpa2，D-Cys3,4Aph(Cbm)7, D-Trp8] _SRIF-2Nal-NH2，其具有下式(環 3-14) D0TA-Cpa-D-Cys_4Aph (Cbm)-D-Trp-Lys-T hr-Cys-2Nal-NH2。該肽通過使用上述相同條件的製備型RP-HPLC脫鹽。最終環狀DOTA-肽-綴合物 的純度通過分析型C^E測定為約98%純。MS分析顯示[M+H] +質量為1606. 50Da，其非常接 近1606. 64Da的計算值。該肽在下文被稱為14號肽。實施例3.實施例1提出的合成被重複，在C末端省略2Nal並用4Aph(Hor)替代Tyr7。 Boc-4Aph (Hor)-OH 如所述預製備(Jiang, G.等，J. Med. Chem.，44 :453-467)。肽的切割、脫 保護、環化和純化如實施例1進行。純化的環狀肽具有下式(環3-14)D0TA-Cpa-D-Cys-4A ph (Hor) -D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-NH2。其根據 QE 具有約 98% 的純度。其稱為 33 號肽。 MS分析顯示[M+H]+質量為1525. 68Da，其非常接近1525. 58Da的計算值。實施例4.實施例1中提出的合成被重複，具有一個改變，在N末端使用PNO2-Phe替代 pCl-Phe。肽的切割、脫保護、環化和純化如實施例1進行。純化的環狀肽具有下式(環 3-14) D0TA-pN02-Phe-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-2Nal_NH2。其根據 C^E 具有約98%的純度，其稱為5號肽。MS分析顯示[M+H] +質量為1594. 17Da，其非常接近1594. 65Da 的計算值。實施例5.實施例1中描述的初始合成被重複，具有一個改變；使用Aph(Hor)替代7_位 置的 Tyr 以提供八肽-樹脂 ^es-AA1'4'5'6'11'12'13^2, D-Cys3,4Aph(Hor)7, D-Aph(Cbm)8, Lys (Fmoc) 9]-SRIF-2Nal-MBHA樹脂。然後如實施例2所述進行反應，得到DOTA-des-AA1』4』5』 6'n'12'13[Cpa2, D-Cys3,4Aph(Hor)7, D-Aph(Cbm)8]-SRIF-2Nal_NH2，其具有下式(環 3-14)DO TA-Cpa-D-Cys-4Aph(Hor)-D-Aph(Cbm)-Lys-Thr-Cys-2Nal-NH2 (肽 30)。最終環狀DOTA-肽-綴合物的純度通過分析型CZE測定為約98%純。MS分析顯 示[M+H]+質量為1722. 56Da，其非常接近1722. 65Da的計算值。實施例6.實施例5提出的合成被重複，在C末端用D-Tyr替代2Nal。肽的切割、脫保護、環 化和純化如實施 例1進行。純化的環狀肽具有下式(環3-14)D0TA-Cpa-D-Cys-4Aph (Hor )-D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2。其根據 CZE 具有約 98% 的純度。其稱為 31 號肽。 MS分析顯示[M+H]+質量為1688. 83Da，其非常接近1688. 64Da的計算值。實施例7.實施例4提出的合成被重複，在C末端用D-Tyr替代2Nal。肽的切割、脫保護、環 化和純化如實施例1進行。純化的環狀肽具有下式(環3-14)DOTA-PNO2-Phe-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cbm)-Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2。其根據 CZE 具有約 98% 的純度。其稱為 3 號肽。MS 分析顯示[M+H]+質量為1560. 63Da，其非常接近1560. 83Da的計算值。實施例8.實施例7提出的合成被重複，具有兩個改變，在7-位置使用ITyr並且在8_位 置使用 D-Trp 以提供八肽-樹脂 ^es-AA1'4'5'6'11'12'13^^2, D-Cys3, ITyr7, D-Trp8, Lys (Fmoc)9] -SRIF-D-Tyr-MBHA 樹脂。當肽從醯胺樹脂被切割並大體上如實施例2所述進行反應之後，獲得具有下式的 肽(環 3-14) D0TA-pN02-Phe-D-Cys-ITyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2 (肽 32)。最終環 狀DOTA-肽-綴合物的純度通過分析型CZE測定為約98%純。MS分析顯示[M+H]+質量為 1667. 74Da，其非常接近1667. 52Da的計算值。實施例9.體外生物分析根據其結合在CHO-Kl細胞和CCL39細胞上表達的分離的克隆受體 的能力在體外測試各種促生長素抑制素類似物的效應。編碼多個促生長素抑制素受體亞型 的基因的分子克隆允許這些受體在哺乳動物細胞中的個體表達及其各自藥理特徵的表徵。 已經克隆了五個此類受體亞型，稱為SSTRl至SSTR5(Raynor，K.等，Mol. Pharmacol. ,43 838-844，1993 ；Raynor, K.等，Mol. Pharmacol. ,44 :385_392，1993)。這些參考文獻描述了 可用於確定特定SRIF類似物是否與物種受體亞型的一個或多個選擇性結合以及它們是以 高親和力還是低親和力與此類受體亞型結合。每個受體亞型可以介導不同但是重疊的SRIF 生理效應。結果，與受體SSTR2選擇性結合的化合物可用於調節SRIF特定的生理功能而不 可能具有由其他SRIF受體介導的另一種SRIF生理功能所引起的不希望的效應。CHO-Kl細胞在Ham』 s F-12培養基中培養，並且CCL39細胞在補充了 10 %胎牛血清、100U/ml青黴素和100yg/ml鏈黴素的Dulbecco，s改良的Eagle，s培養基/ Ham's F-12(l 1)混合物中在含有5% CO2的溼潤空氣中37°C培養。細胞用冰冷0. 05M Tris-HCKpH 7.4)洗滌並刮入冰冷0. 05M Tris-HCl(pH 7. 4)，離心收集，並使用轉子/定 子系統在相同緩衝液中勻漿。在4°C下120g離心5分鐘後，收集上清液並再次在4°C下 48，OOOg離心30分鐘。得到的沉澱懸浮於冰冷Tris緩衝液，轉移到微量離心管中，在4°C 下20，OOOg離心15分鐘。抽掉上清液後，膜沉澱在-80°C保存。對固定在顯微鏡載玻片上的20 μ m厚的膜沉澱冷凍切片進行受體放射自顯影，然 後保存在_20°C。對於每個測試化合物，使用以強親和力與全部五種受體結合的通用促生長 素抑制素配體放射性配體125I-[Leu8，D-Trp22, Tyr25]-促生長素抑制素28進行完全替換實 驗。使用範圍0. I-IOOOnM的不斷增加濃度的未標記肽。使用相同的不斷增加濃度的未標 記的促生長素抑制素-28平行運行，作為對照。在使用本領域已知的計算機輔助圖像處理 系統對數據量化之後計算IC5tl值。在IOOnM 的濃度，28 號肽對 SRIF-28 配體與 SSTRl、SSTR3、SSTR4 和 SSTR5 的結合 具有最小效應。相反，其選擇性結合SSTR2，替代放射性配體與人SSTR2的結合，IC5tl值約 1. 8nM。某些SRIF 類似物抑制 125I-[Leu8，D-Trp22，Tyr24] SRIF-28 與各種克隆的人 SRIF 受 體的放射性配體結合的效價顯示於下表1，其中IC5tl值以納米摩爾濃度給出。括號中的數 字表示特定結合測試進行的次數。 表 1.
權利要求
1.一種與SSTR2結合的促生長素抑制素拮抗劑，選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-Aph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
2.權利要求1所述的促生長素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑不顯著內化入表達 SSTR2的細胞中，並且減少奧曲肽誘導的SSTR2內化。
3.權利要求1所述的促生長素抑制素拮抗劑，還包含螯合劑、絡合劑、綴合劑或標記。
4.權利要求1所述的促生長素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑相對於其他組織優先被 腫瘤吸收。
5.權利要求1所述的促生長素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑相對於其他組織優先被 腫瘤吸收。
6.權利要求1所述的促生長素抑制素拮抗劑，其中在施用後4小時測量的腫瘤細胞中 拮抗劑吸收與腎細胞中拮抗劑吸收的比值為至少約2. O。
7.一种放射成像癌症的方法，包括(a)施用包含促生長素抑制素拮抗劑和放射性核素的組合物；和(b)檢測所述放射性核素，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
8.權利要求7所述的方法，其中所述促生長素抑制素拮抗劑結合SSTR2。
9.權利要求8所述的方法，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。
10.組合物製備用於治療腫瘤的藥劑的用途，其中所述組合物包含促生長素抑制素拮 抗劑和放射性核素，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(v)H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
11.權利要求13所述的方法，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。
12.一種用於診斷放射成像癌症的試劑盒，包含(a)適合容器中的促生長素抑制素拮抗劑，其中促生長素抑制素拮抗劑 (i)用至少一种放射性核素標記；( )未標記並與適合容器中至少一種用於標記的放射性核素一起提供；或 (iii)未標記並能夠隨後用至少一种放射性核素標記；和(b)使用說明書，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
13.權利要求12所述的試劑盒，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。
14.一種用於治療癌症的試劑盒，包含(a)適合容器中的促生長素抑制素拮抗劑，其中，在放射性核素標記所述促生長素抑制 素拮抗劑後，所述拮抗劑以對於癌症治療而言的治療有效量存在，並且其中所述促生長素 抑制素拮抗劑(i)用至少一种放射性核素標記，( )未標記並與適合容器中至少一種用於標記的放射性核素一起提供，或 (iii)未標記並能夠隨後用至少一种放射性核素標記；和(b)使用說明書，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr—Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
15.權利要求14所述的試劑盒，其中所述促生長素抑制素拮抗劑選擇性結合SSTR2。
16.一種用於放射成像癌症或治療癌症的化合物，包含有效量的、與促生長素抑制素拮 抗劑偶聯的放射性核素，其中所述拮抗劑結合SSTR2並選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲醯基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OCH3) -DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
17.權利要求16所述的化合物，其中所述拮抗劑選擇性結合SSTR2，並且不顯著內化入 表達SSTR2的細胞，並且減少奧曲肽誘導的SSTR2內化。
全文摘要
本發明公開了作為促生長素抑制素受體的受體拮抗劑的促生長素抑制素類似物，包括SSTR2-選擇性拮抗劑。本發明還公開了相關的化合物、試劑盒和方法，包括與放射性核素絡合或綴合的拮抗劑及其用途。本發明拮抗劑用於診斷和治療贅生性和非贅生性哺乳動物疾病。
文檔編號C07K14/655GK102089321SQ200980122566
公開日2011年6月8日 申請日期2009年4月15日 優先權日2008年4月16日
發明者H·R·馬克夫, J·C·儒貝, J·E·F·瑞維爾, J·爾學藝 申請人:伯爾尼大學, 巴塞爾醫學院, 索爾克生物學研究院