凍幹的A型肝炎減毒活疫苗的製作方法

2023-12-09 03:27:56 1

專利名稱：凍幹的A型肝炎減毒活疫苗的製作方法
目前國內的A型肝炎減毒活疫苗系液體劑型，2-8℃保存有效期僅為半年(6個月)，-20℃以下冰凍保存有效期僅為12個月，從出廠地到使用現場均要求疫苗嚴格的冷鏈運輸，如保存和運輸不能嚴格冷鏈，致使疫苗的病毒滴度下降，影響接種效果，且增加了生產及使用部門的費用。
本發明專利凍幹劑型的A型肝炎減毒活疫苗從根本上解決了疫苗冷鏈運輸問題，實現了常溫(22℃)運輸，不影響疫苗的病毒滴度，在2-8℃條件下可實現18個月的有效期。技術方案配方凍幹保護劑由蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸、海藻糖配比而成。基本工藝傳代後的人胚肺二倍體細胞經培養長成單層後，感染LA-1株A型肝炎病毒，37℃吸附4小時，補加維持液置35℃培養4周，每周換液一次，洗換加疫苗液，凍化、超聲去除細胞碎片，合併疫苗液，加入凍幹保護劑(4∶1)。保護劑在疫苗最終濃度分別為明膠0.5-0.7％、蔗糖3-6％、味精0.5-2％、尿素0.3-0.8％、L-精氨酸0.1-0.4％、海藻糖3％。製品入箱前應幹箱預冷-20℃以下，製品入箱後凍結，-40℃保持4小時，開始乾燥，冷凝器真空度進入正常狀態後保持1小時後開始加溫，隔板溫度第1小時加溫至-20℃，第四小時加溫至-10℃，製品保持在-20℃以下，升華，待製品完全成型後，逐漸加溫至28℃，控制6-8小時，乾燥結束，凍幹後的樣品應為淡黃色疏鬆體，水份≤3％(g/g)。
專有設備有轉瓶機，醫用低溫冷凍乾燥機等。優點凍幹劑型的A肝減毒活疫苗易於保存，穩定性好，徹底解決了液體劑型A型肝炎減毒活疫苗的冷鏈運輸及穩定性差等問題，2-8℃製品有效期可從液體劑型的6個月延長至凍幹劑型的18個月。
實例凍幹後的A型肝炎減毒活疫苗加速熱穩定性試驗結果37℃7天，前後滴度下降不超過0.5LogTCID50/ml37℃14天，前後滴度下降不超過0.5LogTCID50/ml2-8℃18個月，病毒滴度下降不超過1.0LogTCID50/ml
權利要求
1.一種凍幹劑型的A型肝炎減毒活疫苗。該疫苗用海藻糖作凍幹保護劑，同時加入明膠、蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸等成分冷凍乾燥而成。
2.根據權利要求「1」所述的疫苗，其特徵是淡黃色疏鬆體。傳代後的人胚肺二倍體細胞經培養長成單層後，感染LA-1株A型肝炎病毒，37℃吸附4小時，洗換加疫苗液，凍化、超聲去除細胞碎片，合併疫苗液，按疫苗液凍幹保護劑＝4∶1(體積比)的比例加入保護劑。保護劑在疫苗最終濃度分別為海藻糖3-6％，明膠0.5-0.7％，蔗糖3-6％，味精0.5-2％，尿素0.3-0.8％，L-精氨酸0.1-0.4％。
3.根據權利要求「1」所述的疫苗特徵是加入凍幹保護劑混勻後冷凍乾燥製品入箱前幹箱預冷-20℃以下，製品入箱後凍結，-40℃保持4小時，開始乾燥，冷凝器真空度進入正常狀態後保持1小時後開始加溫，隔板溫度第1小時加溫至-20℃，第4小時加溫至-10℃，製品保持在-20℃以下，升華，待製品完全成型後，逐漸加溫至28℃，控制6-8小時，乾燥結束。凍幹後製品水分≤3％(g/g)。
全文摘要
A型肝炎是由A型肝炎病毒引起的傳染疾病,為有效控制A型肝炎的流行與暴發,保護人類健康,我們通過人胚肺2BS細胞傳代培養後感染A肝病毒,洗換、收穫病毒液,製成A型肝炎減毒活疫苗。本發明為在液體劑型A型肝炎減毒活疫苗中加入由蔗糖、明膠、味精、尿素、L－精氨酸、海藻糖等配比而成的保護劑,混勻,在適宜的凍幹條件下製成凍幹劑型。A型肝炎病毒在凍幹狀態下得到更好的保護,疫苗穩定性能好,2—8℃有效期為18個月,室溫運輸過程中病毒滴度不受影響,方便使用,提高免疫效果。凍幹後疫苗無需冰凍保存,一改液體疫苗低溫凍結保存及運輸過程中嚴格冷鏈,2—8℃有效期短(僅為6個月)的缺點。
文檔編號A61K39/29GK1243752SQ9811780
公開日2000年2月9日 申請日期1998年8月27日 優先權日1998年8月27日
發明者張晶, 周妍, 王壽江, 高俊芳, 魏巍, 董秀華, 郭麗姝, 趙克儉, 王德賢, 賈國富 申請人:長春長生實業股份有限公司