一種具有抗腫瘤作用的紅豆杉多糖的製備方法及其用途的製作方法
2023-12-09 03:04:36 2
專利名稱：：一種具有抗腫瘤作用的紅豆杉多糖的製備方法及其用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種紅豆杉多糖的製備方法，具體的說是一種具有抗腫瘤作用的紅豆杉多糖的製備方法及其用途。
背景技術：
：紅豆杉是當前世界上研究最熱門的藥用植物之一，現在圍繞紅豆杉的化學成分所作的研究當中，絕大多數集中在紫杉烷類化合物的研究上，對非紫杉烷類化合物，特別是對大極性成分之一——多糖的關注相對較少。多糖本身是一種重要的生物活性物質，具有廣泛的藥理活性，從多糖組分著手，尋找紅豆杉中其它具有優良生物活性的成分，是一個極具潛力的研究領域，多糖研究已成為天然藥物學和保健食品學的研究熱點問題之一，它既是尋找天然活性藥物分子的有效途徑，也是保健食品功能因子的研究項目之一。
發明內容本發明的目的是提供一種具有腫瘤治療作用的中草藥有效部位——紅豆杉多糖的製備方法與其藥物應用。通過該製備方法製備得到的紅豆杉多糖以苯酚-硫酸法測得總多糖>90%，以凱式定氮法測定，其含氮量90%，以凱式定氮法測定，其含氮量40010026,3220030.2540038.155、MTT法測定紅豆杉多糖對HT1080細胞生長的影響結果見表3。表3.紅豆杉多糖對HT1080細胞生長的影響樣品名稱濃度(|Jg/ml)抑制率IC5012.59.122524.73Abs5028,62>40010034.5020038.2040044.216、MTT法測定紅豆杉多糖對Hela細胞生長的影響結果見表4。表4.tableseeoriginaldocumentpage77、MTT法測定紅豆杉多糖對K562細胞生長的影響結果見表5。表5.tableseeoriginaldocumentpage78、MTT法測定紅豆杉多糖對PC3細胞生長的影響結果見表6。表6.紅豆杉多糖對PC3細胞生長的影響樣品名稱濃度(Hg/ml)抑制率IC5012.56.262515.89Abs5021.03>40010028.6420031.3340034.689、MTT法測定紅豆杉多糖對SMMC7721細胞生長的影響見表7。表7.紅豆杉多糖對SMMC7721細胞生長的影響樣品名稱濃度(嗎/ml)抑制率IC50Abs12.51.25>400253.645014.2510025.3120030,2140035.3210、MTT法測定紅豆杉多糖對HL-60細胞生長的影響結果見表8。表8tableseeoriginaldocumentpage9結果顯示，不同濃度的紅豆杉多糖溶液對人乳腺癌細胞MCF-7、人纖維瘤細胞HT1080、人宮頸癌細胞Hela、人慢性髓性白血病細胞K562、人前列腺癌細胞PC3、人肝癌細胞S匪C7721、人急性早幼粒白血病細胞HL-60均有抑制作用，且抑制作用與濃度呈線性關係。權利要求一種紅豆杉多糖的製備方法，其特徵在於包括以下步驟1)脫脂粉碎的紅豆杉乾燥枝葉，以有機溶劑脫脂，將脫脂過的原料晾乾，揮發除去有機溶劑。2)提取使用蒸餾水提取，水提取液過濾後，高速離心，取上清液。上清液減壓濃縮，將濃縮的水提取液用乙醇調節至含醇量為70％，低溫靜置過夜後離心，取沉澱，用水復溶，冷凍結冰後，凍幹。3)除蛋白將凍幹的提取物用水重新溶解後，使用Sevag法或酶解法除蛋白。4)除有機溶劑除蛋白後的溶液裝入透析袋進行透析以除去殘留的有機溶劑。透析後的多糖溶液濃縮後冷凍乾燥得到多糖。根據上述製備方法，其特徵在於更為具體的步驟為1)脫脂粉碎的紅豆杉乾燥枝葉，以有機溶劑脫脂，將脫脂過的原料晾乾，揮發除去有機溶劑。2)提取加入蒸餾水提取，水提取液過濾後，離心取上清液。清液減壓濃縮，將濃縮的水提取液用乙醇調節至含醇量為70％，低溫靜置過夜後離心，取沉澱，用水復溶，冷凍結冰後，凍幹。3)除蛋白將凍幹的提取物用水重新溶解後，使用Sevag法或酶解法除蛋白。4)除有機溶劑除蛋白後的溶液裝入透析袋進行透析以除去殘留的有機溶劑。透析後的多糖溶液減壓濃縮後冷凍乾燥得到粗多糖。2.如權利要求l所述的一種紅豆杉多糖的製備方法，其特徵在第(1)步驟中脫脂所用的有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮、乙醇。3.如權利要求l所述的一種紅豆杉多糖的製備方法，其特徵在第(3)步驟中多糖的除蛋白方法為Sevag法或酶解法或者兩者聯合使用。4.如權利要求1所述的一種紅豆杉多糖的製備方法，其特徵在於用該工藝製備得到的紅豆杉多糖的含量為>90X，含N量為〈1%，分子量分布範圍為12.9KDa-74.5KDa。5.如權利要求1所述的一種紅豆杉多糖的製備方法，其特徵在於用該工藝製備得到的紅豆杉多糖對腫瘤具有治療作用。全文摘要本發明涉及一種南方紅豆杉多糖的提取方法及其用途。其步驟包括紅豆杉經有機溶劑脫脂、熱水提取，乙醇沉澱，Sevag法除蛋白後，透析，冷凍乾燥後得到紅豆杉多糖。得到的紅豆杉多糖經硫酸-苯酚法測定糖含量，凝膠分子排阻色譜法測定分子量分布，凱式定氮法測定氮含量。所得紅豆杉多糖對多種癌症具有緩解和治療作用。文檔編號C08B37/00GK101735330SQ20091019299公開日2010年6月16日申請日期2009年10月12日優先權日2009年10月12日發明者於榮敏,原菲申請人:於榮敏