變色劑組合物及其用途的製作方法
2023-12-09 04:40:36
專利名稱：變色劑組合物及其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及含有兩種有機酸鹼指示劑的變色劑組合物，特別是涉及可用來完成酶聯免疫診斷試劑盒樣品液加血清變色顯示的變色劑組合物。
已知一般單色酸鹼指示劑的變色範圍在1-2個PH單位，在中和滴定中，選擇合適的酸鹼指示劑能夠指示強酸滴定強鹼，強鹼滴定強酸，強酸滴定弱鹼以強鹼滴定弱酸，但對於弱鹼滴定弱酸的反應，由于敏銳指數要求較高，單一酸鹼指示劑不能達到實際要求。比如在酶聯免疫診斷試劑盒的操作中，極弱鹼性的臨床血清加入極弱酸性樣品稀釋液時，採用單一指示劑不能明顯指示顏色變化，因為該操作中樣品液在加入臨床血清前後，PH的變化在0.05-0.1個單位。
但在酶聯免疫試劑盒臨床實際操作時，由於微孔反應板板孔多，每次血清加樣量小，只有5微升，加入血清與否肉眼無法直觀判斷，所以臨床操作中容易發生漏加血清或重複加血清的差錯。如果能使微量血清加入樣品液後有直觀的顏色變化，臨床操作時就不容易再出差錯。
本發明的目的就是提供一種靈敏變色的變色劑，用它加入試劑盒樣品液後，樣品液成為一種能長期穩定存放的可變色樣品液，試劑盒使用者在用這種樣品液操作時不會漏加血清樣品，也不會重複加入血清樣品。
現已發現，將兩種單色酸鹼指示劑按一定比例混合就能形成一種靈敏指示微小酸度變化的變色劑。
根據本發明，上述變色劑組合物中包括有機指示劑(A)和有機指示劑(B)。組分(A)為(i)或(ii)。(i)的結構式為
式中R1代表H，Na，K；R2代表溴基或H；(ii)結構式如下
式中R3代表H，Na，K；組分(B)為另一種有機指示劑，其結構式為
其中R4代表I或Cl；這兩種組分均為常用酸鹼指示劑，一般均有市售。
組分(A)用無水乙醇或稀鹼溶液配製，乙醇兌水濃度為40-60％，最好為60％，稀鹼濃度為0.1M-1.0M，最好使用0.1M NaOH，(A)組分固體指示劑含量為0.1-2％，最佳含量為1.0％；組分(B)用無水醇或稀鹼溶液配製，採用乙醇兌水濃度為40-60％，最好為60％，稀鹼濃度為0.1M-1.0M，最好為0.1M NaOH，(B)組分固體指示劑含量為0.1-2％，最佳含量為0.1％。
本發明組合物由上述(A)的溶液與(B)的溶液按一定體積配製，VA/VB可以為5-20，最佳比例為VA/VB＝10。
本發明變色劑在酶聯免疫診斷試劑盒中使用時直接加入樣品稀釋液使用，配比濃度為2.0％-0.05％，最佳為1％，即每100毫升樣品液加1毫升變色劑。
本發明敘述了變色劑的組成，各組分結構特徵及在組合物所佔比例，以及該變色劑的配製方法和在酶聯免疫診斷試劑盒的使用方法。
本發明提出的組合物可應用於酸度變化為0.05-0.10個PH單位的變色指示，尤其適用於酶聯免疫診斷試劑盒中樣品液的加血清變色顯示中。採用本發明變色劑配製成的樣品稀釋液配色穩定，臨床操作加入微量血清即有直觀顏色變化，防止漏加血清或重複加入血清的差錯發生。
實施例
以下所述實施例說明了本發明。但本發明不僅限於下述實施例。
準確稱取溴甲酚紫1.000克固體，用60毫升無水乙醇溶解，再加純水定溶至100毫升，即得本發明中(A)式的指示劑溶液，再準確稱取0.100克中性紅固體，用40毫升無水乙醇溶解，再加純水定容至100毫升，即得符合本發明中(B)式的指示劑。然後取上述10毫升溴甲酚紫指示劑加入100毫升上述中性紅乙醇液指示劑，充分混勻，即得本發明所述變色指示劑。
按以下組分配製酶聯免疫試劑盒樣品稀釋液(純水定溶至100毫升)
為了觀察本發明變色劑能否適應實際應用酸度略有不同的樣品稀釋液，採用幾種不同動物血清配製成五種酸度略有差異的樣品稀釋液，編號為①、②、③、④、⑤，取上述五種樣品稀釋液各100ml加入1ml本發明變色指示劑，結果均得一呈玫瑰紅色半透明液體，用酸度計測這五種變色樣品稀釋液酸鹼度，然後在96孔微孔反應板中各加入100μl該樣品稀釋液，分別按編號加入臨床血清，各孔加5μl，觀察顏色變化，記錄結果如下
權利要求
1.一種變色劑組合物，包括有機指示劑(A)和有機指示劑(B)，組分(A)為(i)或(ii)，其中(i)的通式為
式中R1代表H，K，Na；R2代表溴基或H，(ii)為結構式為
式中R3代表H，K，Na；組分(B)的結構式為
其中R4代表I或Cl。
2.按照權利要求1所述組合物，其中組分(A)中含固體指示劑的含量為0.10-2.0％，最佳含量為1.0％。
3.按照權利要求1-2所述組合物，其中組分(A)用無水乙醇或稀鹼溶液配製，無水乙醇加純水的濃度為40-60％，最佳為60％，稀鹼濃度為0.1M-1.0M，最佳為0.1MNaOH。
4.按照權利要求1所述組合物，其中組分(B)含固體指示劑的含量為0.1-2.0％，最佳含量為0.1％。
5.按照權利要求1～4所述組合物，其中組分(B)用無水乙醇或稀鹼溶液配製，乙醇兌水濃度為40-60％，最佳為60％；稀鹼濃度為0.1M-1.0M，最佳為0.1MNaOH。
6.按照權利要求1所述組合物，本發明由(A)的溶液與(B)的溶液按一定體積配製，VA/VB可以為5～20，最佳比例VA/VB為10。
7.按照權利要求1～6所述任何一種組合物用於酶聯免疫診斷試劑樣品稀釋液加血清變色顯示。
8.按照權利要求1～7所述組合物，用於酶聯診斷試劑盒本發明變色組合物按100～200毫升樣品稀釋液加1毫升本發明變色組合物，其中最佳為每100毫升樣品稀釋液加入1毫升本發明變色組合物。
9.按照權利要求1～7所述組合物用於酸聯免疫診斷試劑盒時，樣品稀釋液的PH值可以為7.00-7.30，其中最佳為7.20。
10.按照權利要求1～8所述組合物，本發明適用於任何一種酸度變化為0.05-0.10個PH單位的變色要求。
全文摘要
本發明變色劑組合物中包括兩種有機指示劑溶液,其中一種為溴甲酚紫或間甲酚紫或對硝基苯酚的醇或稀鹼溶液。另一種為中性紅的醇或稀鹼溶液。該變色劑組合物可以有效地應用於酶聯免疫診斷試劑盒樣品稀釋液加血清變色顯示,能有效防止臨床操作中漏加血清或重複加血清的差錯。
文檔編號G01N33/531GK1201907SQ9710446
公開日1998年12月16日 申請日期1997年6月9日 優先權日1997年6月9日
發明者金紅軍, 汪建, 李志傑, 張久春, 熊雲陵 申請人:金紅軍