柑橘精華的消毒殺菌新用途的製作方法

2024-04-01 08:15:05

專利名稱：柑橘精華的消毒殺菌新用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種柑橘精華的消毒殺菌新用途。
背景技術：
隨著工業的發展，尤其是化工合成技術的提高，傳統農牧漁業走向按工業生產模式動作，有效地提高了生產效率和產量，但同時由於生產規模的擴大，生產過程中大量使用人工合成的抗生素、激素等藥品和添加劑，使產品口味、質量退化、藥物殘留並破壞生態環境，食品安全形勢嚴峻，近年來，狂牛症、禽流感等人畜共患疾病威脅著人類健康，不斷有象蘇丹紅等全球關注的儀器安全事件發生，令人們對食品生產日益重視，綠色食品、生態養殖等概念深入人心，各國都在研究在食品生產和加工的過程中，減少和禁止使用有害於環境和身體健康的物質。
柑橘屬植物的果實，其中存在具有抗微生物生理活性的天然物質一柑橘精華(CITRUS EXTRACT)。上世紀六十年代，美國佛羅裡達大學儀器微生物研究所(著名的Gainesville實驗室)的Jacob Harich.Steven Otwell和WayneMarshall tiji研究從柑橘屬植物的果實中提取柑橘精華，其中含有柑橘果子精華、維生素C、檸檬酸、胺基酸、柑橘果膠、甘油脂，上述成分巳全部錄入FDA目錄為安全無毒性物質，現國際上巳廣泛應用於食品、保健器、化妝品和醫藥工業中。

發明內容
本發明目的是提供一種柑橘精華的消毒殺菌新用途。
本發明的技術方案是一種柑橘精華的消毒殺菌新用途。
所述柑橘精華採用下列製備方法(1)柑橘水果，用水洗淨，去除水份，用壓磨機壓碎成乳劑；(2)用離心乾燥設備把乳劑乾燥至原重量的八分之一；(3)在濃縮乳劑中加入30％重量的甘油，混合，靜放72小時，隨機搖動10分鐘；(4)用120目離心過濾濃縮乳劑，除去濾渣；(5)過濾後的清潔溶液中加入足夠的乳酸，調節PH值至2.2-3.2。
本發明的優點是
1.柑橘精華具有強力殺菌功能，通過接觸微生物，改變其細胞膜滲透性，阻止其有氧呼吸來達到殺菌效果，經檢測對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單細胞、白色念珠菌有迅速的殺滅作用。
2.柑橘精華安全無毒性，它是純天然植物提取物，經急性經口毒試驗，急性吸入毒性試驗，亞急性毒性試驗，急性皮膚試驗，眼刺激試驗確認安全無毒。
3.經濟實用，我國是一個柑橘種植大國，隨著柑橘精華產品的發展，給柑橘深加工提供了發展機遇，確保了原料的供應，所以柑橘精華消毒殺菌液與現有消毒殺菌劑價格將相差無幾，成本非常合理。
下面結合實施例對本發明作進一步描述具體實施方式
實施例一種柑橘精華的消毒殺菌新用途。
所述柑橘精華採用下列製備方法(1)柑橘水果，用水洗淨，去除水份，用壓磨機壓碎成乳劑；(2)用離心乾燥設備把乳劑乾燥至原重量的八分之一；(3)在濃縮乳劑中加入30％重量的甘油，混合，靜放72小時，隨機搖動10分鐘；(4)用120目離心過濾濃縮乳劑，除去濾渣；(5)過濾後的清潔溶液中加入足夠的乳酸，調節PH值至2.2-3.2。
經檢測，柑橘精華中含有下列成份(1)柑橘果子精華 47.6％(2)維生素C 5.0％(3)檸檬酸 7.0％(4)胺基酸 0.2％(5)柑橘果膠 5.0％(6)甘油脂 10％(7)甘油 25.2％。
用途一、空氣環境消毒潔淨劑柑橘精華能有效在抑制金黃色葡萄球菌、鏈球菌、沙門氏菌、大腸桿菌、感冒病毒等各種細菌和病毒，可直接噴灑在所有家居、會議室、客房、餐飲、娛樂、醫院、學校、飛機、汽車、輪船等公共場所，具有超強消毒滅菌效果。
二、創傷緊急處理柑橘精華優越的能力100％抑制金葡萄球菌，能夠有效地殺死細菌，能使傷口免受感染，由於有抗氧化劑、維生素C、柑橘精華有助於加速傷口的痊癒。若化膿傷口，清膿後直接噴射，效果非常好。
三、嬰兒皮膚護理柑橘精華是純天然植物萃取，經檢測對皮膚無毒、無刺激、無過敏，適用於嬰兒尿布症等皮膚的抑菌護理，是嬰兒理想的呵護產品。
四、婦女消毒護理女性的衛生護理對健康非常重要，由於陰部是溼熱地帶，是細菌的真菌的溫床，柑橘精華將有效抑制有害細菌，其抗氧化和維生素將滋養此區域。
五、口腔與鼻黏膜細菌容易在口腔中滋生，導致牙齒和口腔發炎產生異味，用柑橘精華直接噴射，排隊口腔內的有害細菌，使牙床健康保持口氣清新。
六、農副產品消毒滅菌劑柑橘精華是預防家禽、水產品、蔬菜、瓜果等動植物的天然配方，它具有消滅家禽腸內害蟲、寄生生物其它細菌的功能，它巳被證實安全可靠，效能突出而不含毒素，蓄禽、魚類的飼料裡適當加入柑橘精華可防止毒素、細菌、與寄生蟲感染，提高免疫力，柑橘精華用於蔬菜、瓜果、防病治蟲效果好，是天然高效無毒的防蟲滅菌產品，是生產無公害有機農產品的天然衛士，是可以入口的液。
柑橘精華是具有廣譜抗菌、強力高效、安全無毒的天然抗菌劑，與現有的常用抗菌劑比較，有許多優點1、廣譜抗菌柑橘精華具有令人驚奇的殺滅致病性微生物的能力，不論是細菌繁殖和真菌類，同時對病毒和寄生蟲，都具有殺滅和抑制作用。
2、強力高效經多次重複對病原微生物「最低抑菌濃度試驗」(MIC試驗)證明，柑橘精華的抗菌效力高出其它同類抗菌化合物10-100倍，即令在很稀釋的劑量下，這種高效能也能表現出來。
3、安全無毒、可食用急性經口毒性試驗、急慢性毒理試驗、長期呼吸毒理試驗結果表明，柑橘精華屬實際無毒物質，表皮腫瘤毒理試驗、腫瘤毒理試驗表明，柑橘精華不會引起腫瘤病變或系統性病變，安全服用，可清除消化系統等的有害菌。
4、無痛、無刺激和無過敏反應皮膚、黏膜刺激試驗結果表明，對皮膚無刺激、無過敏反應，使用無痛楚，即使長期使用柑橘精華，也不會產生刺激和過敏反應。
5、具生物可降解性，無汙染美國華盛頓REDMOND生物學研究實驗證實，柑橘精華對厭氧分解有機物產生的二氧化碳有抑制作用，具有生物可降解性，可在自然界自然分解，不會汙染和影響環境。
6、長效穩定，不產生耐藥性柑橘精華是純植物提取的天然殺菌劑，使用後不用清洗，並能形成保護膜，達到長效抑殺細菌、防止細菌侵染的作用，柑橘精華破壞有害菌的細胞膜達到物理殺菌的作用，性能穩定，有害菌不會產生耐藥性，因此可放心長期使用。
7、與其它藥物良好的兼容性柑橘精華具有增效功能的優勢，且因其具有抗微生物的強效，使得它成為一種極好的防腐劑，還能使藥效保持不變。
消毒與殺菌試驗第一部分金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的殺滅試驗一.器材1.試驗菌大腸桿菌(8099)第5代(軍事醫學科學院提供)金黃色葡萄球菌(ATCC6538)第5代(軍事醫學科學院提供)2.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L3.中和劑I含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB中和劑II含0.0375％硫代硫酸鈉、0.0625％卵磷脂、0.25％吐溫-80的TSB4.有機幹擾物3％牛血清白蛋白二.方法1.檢驗依據《消毒技術規範》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.4
2.中和劑I鑑定試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L 試驗菌大腸桿菌 作用時間0.5min 試驗溫度20℃±1℃ 重複3次中和劑II鑑定試驗消毒劑濃度含總酸0.0698g/L(1∶10稀釋液)試驗菌大腸桿菌 作用時間0.5min 試驗溫度20℃±1℃ 重複3次3.定量殺菌試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L作用時間1min、2min、3min 試驗溫度20℃±1℃ 試驗重複3次三.結果1.中和劑I鑑定試驗結果表明第1、2組平均生長菌落數均為0cfu/ml，第3、4、5組三組間誤差率分別為1.21％、6.24％、6.29％。
表1中和劑I鑑定試驗結果

注陰性對照均無菌生長。
2.中和劑II鑑定試驗結果表明第1、2組平均生長菌落數分別為0cfu/ml、7.23×102cfu/ml，第3、4、5組三組間誤差率分別為7.58％、3.46％、2.23％。
表2 中和劑II鑑定試驗結果

注陰性對照均無菌生長。
3.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的許多寶牌消毒液作用1分鐘、2分鐘、3分鐘對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的殺滅對數值均＞5.00。
表3 對試驗菌的殺滅效果


注陰性對照均無菌生長。
四.結論1.含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB和含0.0375％硫代硫酸鈉、0.0625％卵磷脂、0.25％吐溫-80的TSB能有效中止含總酸0.5584g/L和含總酸0.0698g/L(1∶10稀釋液)消毒液的殘留毒性，中和劑及中和產物對試驗菌和培養基均無不良影響，故判其為該樣品定量殺菌試驗的中和劑。
2.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的消毒液作用1分鐘、2分鐘、3分鐘對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的殺滅對數值均＞5.00。
第二部分白色念珠菌的殺滅試驗一.器材1.試驗菌白色念珠菌(ATCC10231)第6代(軍事醫學科學院提供)2.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L3.中和劑含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB4.有機幹擾物3％牛血清白蛋白二.方法1.檢驗依據《消毒技術規範》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.42.中和劑鑑定試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L作用時間2.5min 試驗溫度20℃±1℃ 重複3次3.定量殺菌試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L作用時間2.5min、5min、7min 試驗溫度20℃±1℃ 試驗重複3次三.結果1.中和劑鑑定試驗結果表明第1、2組平均生長菌落數分別為0cfu/ml和1.70×104cfu/ml，第3、4、5組三組間誤差率分別為4.33％、2.99％、7.45％。
表1 中和劑鑑定試驗結果

注陰性對照均無菌生長。
2.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的許多寶牌柑橘精華消毒液作用2.5分鐘、5分鐘、7.5分鐘對白色念珠菌的殺滅對數值分別為2.16(1.99～2.73)、＞4.00、＞4.00。
表3 對試驗菌的殺滅效果

注陰性對照均無菌生長。
四.結論1.含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB能有效中止含總酸0.5584g/L消毒液的殘留毒性，中和劑及中和產物對試驗菌和培養基均無不良影響，故判其為該樣品定量殺菌試驗的中和劑。
2.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的消毒液作用2.5分鐘、5分鐘、7.5分鐘對白色念珠菌的殺滅對數值分別為2.16(1.99～2.73)、＞4.00、＞4.00。
第三部分銅綠假單胞菌的殺滅試驗一.器材1.試驗菌銅綠假單胞菌(ATCC15442)第5代(中國普通微生物菌種保藏中心提供)2.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L3.中和劑I含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB
中和劑II含0.0375％硫代硫酸鈉、0.0625％卵磷脂、0.25％吐溫-80的TSB二.方法1.檢驗依據《消毒技術規範》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.42.中和劑I鑑定試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L作用時間0.5min 試驗溫度20℃±1℃ 重複3次中和劑II鑑定試驗消毒劑濃度含總酸0.0698g/L(1∶10稀釋液)作用時間0.5min 試驗溫度20℃±1℃ 重複3次3.定量殺菌試驗消毒劑濃度含總酸0.5584g/L作用時間1min、2min、3min 試驗溫度20℃±1℃ 試驗重複3次三.結果1.中和劑I鑑定試驗結果表明第1、2組平均生長菌落數均為0cfu/ml，第3、4、5組三組間誤差率分別為4.65％、8.05％、7.44％。
表1中和劑I鑑定試驗結果

注陰性對照均無菌生長。
2.中和劑II鑑定試驗結果表明第1、2組平均生長菌落數分別為5.78×103cfu/ml、1.39×104cfu/ml，第3、4、5組三組間誤差率分別為5.13％、6.67％、4.44％。
表2中和劑II鑑定試驗結果

注陰性對照均無菌生長。
3.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的許多寶牌柑橘精華消毒液作用1分鐘、2分鐘、3分鐘對銅綠假單胞細菌的殺滅對數值均＞5.00。
表3對試驗菌的殺滅效果

注陰性對照均無菌生長。
四.結論1.含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB和含0.0375％硫代硫酸鈉、0.0625％卵磷脂、0.25％吐溫-80的TSB能有效中止含總酸0.5584g/L和含總酸0.0698g/L(1∶10稀釋液)消毒液的殘留毒性，中和劑及中和產物對試驗菌和培養基均無不良影響，故判其為該樣品定量殺菌試驗的中和劑。
2.20℃±1℃試驗溫度下，含總酸0.5584g/L的消毒液作用1分鐘、2分鐘、3分鐘對銅綠假單胞細菌的殺滅對數值均＞5.00。
第四部分一年穩定性試驗(微生物法)一.器材1.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L2.試驗菌白色念珠菌(ATCC10231)第6代(軍事醫學科學院提供)3.電熱乾燥培養箱(HG303-4A型)(南京實驗儀器廠)4.有機幹擾物3％牛血清白蛋白5.中和劑含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB二.方法1.檢驗依據衛生部《消毒技術規範》2002年版2.2.3.32.保存條件密閉完好原包裝，置54℃存放14天3.消毒劑濃度含總酸0.5584g/L4.檢測環境20℃±1℃ 試驗重複3次三.結果該樣品存放前對白色念珠菌作用5分鐘殺滅對數值＞4.00，54℃存放14天後對白色念珠菌作用5分鐘殺滅對數值＞4.00。
對試驗菌的殺滅效果

注陰性對照均無菌生長。
四.結論結果表明，該樣品54℃存放14天後對白色念珠菌作用5分鐘殺滅白色念珠菌仍＞4.00，有效期為一年。
第五部分兩年穩定性測定一.器材1.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701、040702、040703)2.標準溶液0.05262mol/L氫氧化鈉標準溶液3.試劑酚酞(AR)4.調溫調溼箱(302A型)(上海實驗儀器廠)二.方法1.檢驗依據企業標準Q/320500JCKJ02-2004和《消毒技術規範》2002版 2.2.3.2.12.保存條件密閉完好原包裝，置37℃存放3個月3.檢驗環境溫度21℃ 相對溼度50％～55％三結果存放前，批號為040701、040702、040703樣品總酸含量分別為0.6980g/L、0.7016g/L、0.7128g/L；37℃存放3個月總酸含量分別為0.6980g/L、0.7016g/L、0.7128g/L，其總酸下降率為0％。
穩定性測定結果

注樣品經37℃存放3個月後顏色稍微加深，無懸浮物產生。
四.結論結果表明，批號為040701、040702、040703的樣品37℃存放3個月後總酸含量下降率為0％，有效期為兩年。
第六部分兩年穩定性試驗(微生物法)一.器材1.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L2.試驗菌白色念珠菌(ATCC10231)第6代(中國普通微生物菌種保藏管理中心提供)3.調溫調溼箱(302A型)(上海實驗儀器廠)4.有機幹擾物3％牛血清白蛋白5.中和劑含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB二.方法1.檢驗依據衛生部《消毒技術規範》2002版2.2.3.32.保存條件密閉完好原包裝，置37℃存放3個月3.消毒劑濃度含總酸0.5584g/L4.檢測環境20℃±1℃ 試驗重複3次三.結果該樣品存放前對白色念珠菌作用5分鐘殺滅對數值＞4.00，37℃存放3個月後對白色念珠菌作用5分鐘殺滅對數值＞4.00。
對試驗菌的殺滅效果


注陰性對照均無菌生長。
四.結論結果表明，該樣品37℃存放3個月後對白色念珠菌作用5分鐘殺滅白色念珠菌仍＞4.00，有效期為兩年。
第七部分消毒劑對皮膚消毒現場試驗一.器材1.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L2.中和劑採樣液含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB3.滅菌棉籤4.規格板5cm×5cm二.方法1.檢驗依據參照《消毒技術規範》2002年版 2.1.2.82.消毒部位上臂內側中段皮膚 消毒方式塗檫3.消毒劑濃度含總酸0.6980g/L 消毒時間5min4.檢測環境25℃～28℃ 相對溼度50％～60％三.結果25℃～28℃試驗溫度，50％～60％相對溼度條件下，樣品原液對上臂內側中段皮膚擦拭消毒5分鐘，對皮膚上自然菌的殺滅對數值均＞1.00。
皮膚消毒現場試驗結果


注陰性對照均無菌生長。
四.結論25℃～28℃試驗溫度，50％～60％相對溼度條件下，樣品原液對上臂內側中段皮膚擦拭消毒5分鐘，對皮膚上自然菌的殺滅對數值均＞1.00。
第八部分物體表面消毒現場試驗一.器材1.樣品許多寶牌柑橘精華消毒液(批號040701)有效成分含總酸0.6980g/L2.中和劑採樣液含0.3％硫代硫酸鈉、0.5％卵磷脂、2％吐溫-80的TSB3.滅菌棉籤4.規格板5cm×5cm
二.方法1.檢驗依據《消毒技術規範》2002年版 2.1.2.102.消毒部位木質油漆表面 消毒方式塗檫3.消毒劑濃度含總酸0.6980g/L 消毒時間2min4.檢測環境23℃相對溼度55％～60％三.結果試驗溫度23℃，55％～60％相對溼度條件下，含總酸0.6980g/L的許多寶牌柑橘精華消毒液對木質油漆表面擦拭消毒2分鐘，對其表面自然菌的平均殺滅對數值＞1.00。
對物體表面消毒現場試驗結果


注陰性對照均無菌生長。
四.結論結果表明，試驗溫度23℃，55％～60％相對溼度條件下，含總酸0.6980g/L的許多寶牌柑橘精華消毒液對木質油漆表面擦拭消毒2分鐘，對其表面自然菌的平均殺滅對數值＞1.00。
第九部分小鼠急性經口毒性試驗一.材料和動物1.受試樣品名稱許多寶牌柑橘精華消毒液 批號040703 劑型液體顏色無色 保存條件乾燥通風直接取樣品原液配置成受試物。
2.動物健康ICR小鼠20隻，雌雄各半，體重18～22g，上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，二級，合格證號SCXK(滬)2003-0003號。
3.試驗條件試驗動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號。飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號。主要儀器電子秤(TCS-100)、電子天平(L p123)。
二.方法1.檢測依據衛生部(2002.11)《消毒技術規範》，第二部分，消毒產品檢驗技術規範，2.3.1急性經口毒性試驗。
2.測定方法一次最大限度試驗，設計劑量為5000mg/kg b.wt。稱取樣品5000mg加雙蒸水至20ml配製成受試物。小鼠禁食過夜後，受試物經口一次灌胃給予，灌胃容量為20ml/kg b.wt。灌胃後4h給食，自由攝食。觀察期14d。
三.試驗結果雌雄小鼠灌胃後未見明顯中毒表現，觀察期內無動物死亡。動物死亡情況見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液小鼠急性經口毒性試驗結果

四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液對雌雄小鼠急性經口LD50值均大於5000mg/kgb.wt，屬實際無毒級。
第十部分小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗。取樣品原液用雙蒸水配置成以下表內劑量。
2.陽性對照物環磷醯胺，上海華聯製藥有限公司提供，以雙蒸水配製成2mg/ml濃度備用。
3.動物健康ICR小鼠50隻，上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，二級，體重25～30g，雌雄各半，合格證號SCXK(滬)2003-0003號。
4.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度40-70％；主要儀器電子秤(TCS-100)、電子天平(L p123)。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002年版)《消毒技術規範》第二部分2.3.8小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗。
2.試驗方法陽性對照組、陰性對照組(雙蒸水)和各劑量組均用30h兩次灌胃法(間隔24h)，第2次灌胃後6h殺鼠。取股骨骨髓懸於小牛血清中直接塗片、固定、染色，每鼠鏡驗嗜多染紅細胞1000個，計數具有微核的細胞，觀察200個嗜多染紅細胞並同時計數所見正染紅細胞，計算嗜多染紅細胞和正染紅細胞比率(PCE/NCE)用卡方檢驗進行統計分析。
三.實驗結果染毒後各組動物未見明顯中毒症狀。結果見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液對小鼠骨髓細胞微核試驗結果

注微核細胞率(‰)和PCE/NCE均以小鼠為單位統計，表示為均值±標準差。
**與陰性對照組相比，P＜0.01四.結論劑量達5000mg/kg b.wt，未檢出許多寶牌柑橘精華消毒液對雌雄小鼠骨髓嗜多染紅細胞的致微核作用。
第十一部分大鼠急性吸入毒性試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗。直接取樣品原液配置成受試物。
2.動物健康SD大鼠20隻，雌雄各半，體重180～220g，上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，二級，合格證號SCXK(滬)2003-0003號。
3.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度40-70％；主要儀器電子秤(TCS-100)、電子天平(L p123)。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002.11)《消毒技術規範》第二部分，消毒產品檢驗技術規範，2.3.2急性吸入毒性試驗。
2.測定方法靜式染毒，按一次最大限度試驗法，設計劑量為10000mg/m3。染毒櫃空間為30L/h/鼠，稱取1000mg樣品放入霧化器中，直接噴入染毒櫃中染毒，染毒時間2h，2h後取出動物，自由攝食。觀察期14d。
三.試驗結果
雌雄大鼠染毒後未見明顯中毒表現，觀察期內無動物死亡。動物死亡情況見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液大鼠急性吸入毒性試驗結果

四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液對雌雄大鼠急性經呼吸道LC50值均大於10000mg/m3b.wt，屬實際無毒級。
第十二部分大鼠急性經口毒性試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗。直接取樣品原液配置成受試物。
2.動物健康SD大鼠20隻，雌雄各半，體重180～220g，上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，二級，合格證號SCXK(滬)2003-0003號。
3.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度40-70％；主要儀器電子秤(TCS-100)、電子天平(L p123)。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002.11)《消毒技術規範》第二部分，消毒產品檢驗技術規範，2.3.1急性經口毒性試驗。
2.測定方法一次最大限度試驗，設計劑量為5000mg/kg b.wt。稱取樣品15000mg加雙蒸水至30ml配製成受試物。大鼠禁食過夜後，受試物經口一次灌胃給予，灌胃容量為10ml/kg b.wt。灌胃後4h給食，自由攝食。觀察期14d。
三.試驗結果
雌雄大鼠灌胃後未見明顯中毒表現，觀察期內無動物死亡。動物死亡情況見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液大鼠急性經口毒性試驗結果

四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液對雌雄大鼠急性經口LD50值均大於5000mg/kgb.wt，屬實際無毒級。
第十三部分一次完整皮膚刺激試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗，取樣品原液為受試物。
2.動物健康無皮疾紐西蘭白兔4隻，一級，金陵種兔場提供，合格證號SCXK(蘇)2002-0025號，雌性2隻，雄性2隻。
3.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度40-70％。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002年版)《消毒技術規範》第二部分2.3.3皮膚刺激試驗。
2.試驗方法動物試驗前24h脊柱兩側剪毛備皮各約3cm×3cm，次日將受試物0.5ml滴於2.5em×2.5cm大小的2層紗布上並敷貼在一側去毛區皮膚上，以無刺激膠布固定，另一側用雙蒸水作對照，敷用4小時後以溫水洗去殘餘受試物，於1h、24h、48h後觀察、記錄皮膚反應。
三.試驗結果試驗中未見紅斑、水腫刺激反應。試驗結果見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液對家兔皮膚一次刺激反應評分


四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液對家兔一次完整皮膚刺激試驗皮膚刺激指數為0，屬無刺激性。
第十四部分急性眼刺激試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗，取樣品原液為受試物。
2.動物健康無眼疾紐西蘭白兔3隻，一級，金陵種兔場提供，合格證號SCXK(蘇)2002-0025號，體重2.3-2.5kg，雌性1隻，雄性2隻。
3.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度40-70％。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002年版)《消毒技術規範》第二部分2.3.4急性眼刺激試驗。
2.試驗方法取受試物0.1ml直接滴入家兔一側眼結膜囊內，被動閉合眼瞼4s，30s後用生理鹽水衝洗，另一眼滴以生理鹽水作為對照。於滴眼後1h、24h、48h、72h觀察記錄眼刺激反應。
三.試驗結果動物滴眼後，見結膜輕度充血反應，未見其他明顯中毒反應。結果見下表。
許多寶牌柑橘精華消毒液對家兔急性眼刺激試驗結果


#平均評分即每隻動物的24h、48h和72h評分之和除以觀察數3。
四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液對家兔急性眼刺激強度屬無刺激性。
第十五部分亞急性經口毒性試驗一.材料和動物1.受試物樣品及批號同小鼠急性經口毒性試驗，直接取樣品原液配置成受試物。
2.動物6-8周齡健康SD大鼠40隻，雌雄各半。上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，二級，合格證號SCXK(滬)2003-0003號。
3.試驗條件試驗動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號。飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號。雌雄大鼠進室適應4日選取體重為150g-170g的動物分性別按體重隨機分入各組，每組10隻，雌雄各半，分組分性別盒養，自由進水、進食。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002版)《消毒技術規範》第二部分2.3.7亞急性經口毒性試驗2.劑量組選擇與試驗方法大鼠急性經口LD50值大於5000mg/kg b.wt，高劑量採用1000mg/kg b.wt，設0(雙蒸水對照)、60、250和1000mg/kg b.wt4個劑量組，分別稱取樣品0、300、1250、5000mg加入雙蒸水至50ml配置成為各劑量組受試物，採用灌胃方式經口染毒，每次灌胃容量為10ml/kg b.wt，連續灌胃28天。
3.觀察和測試指標臨床檢查每天觀察動物表現，每周稱量體重一次。實驗結束時，經眼眶靜脈叢取血後處死，解剖觀察並取臟器。
血液學檢查包括血紅蛋白含量(HGB)、紅細胞數(RBC)、白細胞數(WBC)及其分類計數淋巴細胞(L)、中性(N)、嗜酸(E)、嗜鹼(B)、中性顆粒細胞和單核細胞(M)。
血液生化檢查天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、尿素氨(BUN)、肌酐(CRE)、血清總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)、總膽固醇(CHO)。
臟器重量稱量肝、腎重量，並計算其臟器重量係數(臟器重/體重×100％)。
大體解剖和組織病理學檢查處死所有動物後進行全面的肉眼屍檢，並將肝、腎、胃、腸、脾、胸腺、睪丸、卵巢固定保存。進行高劑量組和陰性對照組動物的以上組織病理學檢查。如發現病變，對中、低劑量組動物相應的器官進行組織病理學檢查。
4.統計方法各項測定指標的測定數據均以單因素方差分析進行統計，使用SPSS軟體。
三.試驗結果1.一般觀察各劑量組動物未見異常。
2.許多寶牌柑橘精華消毒液對大鼠生長發育的影響見表1-表1許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠體重變化(g，x±s)

由表1，各劑量組雌雄大鼠多個觀察點的體重與對照組值相比，均無顯著性差異(p＞0.05)。
3.許多寶牌柑橘精華消毒液對大鼠血液學指標的影響見表2表2 許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠血液學變化(x±s)

由表2，各劑量組雌雄大鼠的紅細胞計數、白細胞計數及分類、血紅蛋白含量均在正常波動範圍內。
4.許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠血液生化學指標的影響見表3表3 許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠血液生化學指標

由表3，各劑量組雌雄大鼠的丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、尿素氮、肌酐、總蛋白、白蛋白及總膽固醇值雖有一些與對照組值相比有差異，但均在正常波動範圍內。
5.許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠臟器重量及臟器重量係數見表4表4許多寶牌柑橘精華消毒液亞急性毒性試驗大鼠臟器重量及臟器重量係數


由表4可見，各劑量組肝體比、腎體比與對照組相比均無顯著性差異。
6.大體解剖和組織病理學檢查大體解剖未見異常。
表5 許多寶牌柑橘精華消毒液對大鼠組織病理學影響 單位只

由表5可見，肝、腎、脾、胃、腸、卵巢、睪丸組織切片未見與樣品明顯有關的不可逆的組織病理改變。
四.結論許多寶牌柑橘精華消毒液以60mg/kg b.wt、250mg/kg b.wt和1000mg/kg b.wt的劑量灌胃給予大鼠28天，結果顯示動物活動、生長正常；各劑量組體重、髒體比與對照組比較無顯著性差異(p＞0.05)；雌雄各劑量組的血液學檢測值、生化指標檢測值均在正常波動範圍內；未顯示不良的組織病理學改變。試驗結果表明，未見許多寶牌柑橘精華消毒液明顯毒性。最大未觀察到有害作用劑量(NOAEL)值為1000mg/kg b.wt。
檢驗依據衛生部《消毒技術規範》(2002版)檢驗結論1.小鼠急性經口毒性試驗樣品對雌雄小鼠急性經口LD50值均大於5000mg/kg b.wt，屬實際無毒級。
2.小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗劑量達5000mg/kg b.wt，未檢出樣品對雌雄小鼠骨髓嗜多染紅細胞的致微核作用。
3.大鼠急性吸入毒性試驗樣品對雌雄大鼠急性經呼吸道LC50值均大於10000mg/kg b.wt，屬實際無毒級。
4.大鼠急性經口毒性試驗樣品對雌雄大鼠急性經口LD50值均大於5000mg/kg b.wt，屬實際無毒級。
5.一次完整皮膚刺激試驗樣品原液對家兔一次完整皮膚刺激試驗皮膚刺激指數為0，屬無刺激性。
6.急性眼刺激試驗家兔一次眼刺激強度屬無刺激性。
7.亞急性經口毒性試驗樣品以60mg/kg b.wt、250mg/kg b.wt和1000mg/kg b.wt的劑量灌胃給予大鼠28天，試驗結果表明未見明顯毒性。許多寶牌柑橘精華消毒液最大未觀察到有害作用劑量(NOAEL)值為1000mg/kgb.wt。
第十六部分陰道黏膜刺激試驗一.材料和動物1.受試物樣品為液體，直接取原液為受試物。
2.動物健康雌性家兔6隻，一級，金陵種兔場提供，合格證號SCXK(蘇)2002-0025號，體重2.0-2.5kg。
3.試驗條件飼料來源及證號江浦振興試驗動物飼料廠，蘇動(飼)字第95001號；實驗動物環境設施合格證號SYXK(蘇)2002-0004號；環境溫度22±2℃；相對溼度50-70％。
二.方法1.檢驗依據衛生部(2002.11)《消毒技術規範》，第二部分，消毒產品檢驗技術規範，2.3.5陰道黏膜刺激試驗。
2.試驗方法動物分入染毒組、對照組，每組3隻。仰面固定動物，暴露會陰和陰道口，將2ml的注射器與導尿管相連並注滿受試物，導尿管以受試物溼潤後輕柔地插入陰道4-5cm，緩慢注入受試液2ml。抽出導尿管，完成染毒。對照組以生理鹽水代替受試物同樣處理。24h後處死動物，取出局部陰道組織，觀察有無充血、水腫等現象。進行病理組織學檢查。
三.實驗結果實驗組和對照組均有個別動物出現輕度充血、水腫現象。
受試物對動物陰道黏膜刺激反應評分

四.結論受試物對家兔陰道黏膜刺激指數為0.22，屬無刺激性。
毒理學檢驗結論陰道黏膜刺激試驗受試物對家兔的陰道黏膜刺激指數為0.22，屬無刺激性。
權利要求
1.一種柑橘精華的消毒殺菌新用途。
2.根據權利要求1所述的柑橘精華，其特徵在於採用下列製備方法(1)柑橘水果，用水洗淨，去除水份，用壓磨機壓碎成乳劑；(2)用離心乾燥設備把乳劑乾燥至原重量的八分之一；(3)在濃縮乳劑中加入30％重量的甘油，混合，靜放72小時，隨機搖動10分鐘；(4)用120目離心過濾濃縮乳劑，除去濾渣；(5)在過濾後的清潔溶液中加入足夠的乳酸，調節PH值至2.2-3.2。
全文摘要
本發明公開了一種柑橘精華的消毒殺菌新用途，所述柑橘精華包括柑橘精華74.8％、甘油25.2％，所述柑橘精華採用下列製備方法(1)柑橘水果，用水洗淨，去除水分，用壓磨機壓碎成乳劑；(2)用離心乾燥設備把乳劑乾燥至原重量的八分之一；(3)在濃縮乳劑中加入30％重量的甘油，混合，靜放72小時，隨機搖動10分鐘；(4)用120目離心過濾濃縮乳劑，除去濾渣；(5)過濾後的清潔溶液中加入足夠的乳酸，調節pH值至2.2－3.2。
文檔編號A61L101/56GK1887355SQ20061004087
公開日2007年1月3日 申請日期2006年7月27日 優先權日2006年7月27日
發明者懷星, 懷紅 申請人:懷星, 懷紅