一種奶牛回乳藥物組合的製作方法

2023-06-21 16:28:46 2

本發明涉及的是一種奶牛回乳藥物組合。

背景技術：

奶牛由於泌乳，機體消耗嚴重，需要幹奶期恢復體質，為下一個泌乳期做充分準備。目前使用的傳統回乳方式效果差，容易造成乳房炎、流產等副作用。

技術實現要素：

本發明所要解決的技術問題是提供一種奶牛回乳藥物組合。

本發明的技術方案如下：

一種奶牛回乳藥物組合，以重量份計，其組成為：麥芽，11；樸硝，5；升麻，2；柴胡，3；香附，3；薏仁，4；蠶蛻，2；白朮，6；黃芩，5；知母，4；蘇梗，2；芡實，3；五味子，2.5；蒲公英，2；甘草，1.5。

回乳藥對高產奶牛促回乳作用效果明顯，並可達到預防回乳期奶牛乳房炎的目的。

具體實施方式

以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。

1材料和方法

1.1試驗動物：選擇四川省某規模化奶牛場半封閉統一舍飼，體重582±41kg、2～4胎中國荷斯坦奶牛150頭。從中選取體況良好，乳房、乳汁均正常，即將進入回乳期，產奶量為15.42±0.71kg的妊娠後期健康奶牛80頭。隨機分為A、B、C、D組，每組20頭。各組均採用快速幹奶法，回乳當天記為第0天，從第1天開始，A組為對照組，不飼餵中藥，B、C、D組每日上午8:00分別飼餵回乳藥400g、500g、600g，直至回乳，停止飼餵中藥。

1.2試驗藥物：本發明提供的回乳藥物組合，用中藥粉碎機製備成0.1～0.3cm大小的顆粒，加入同等重量的水備用。

1.3試驗儀器：酶標儀MK3雷勃：THERMO FISHER；洗板機MK2雷勃：THERMO FISHER；離心機英泰TG16：長沙英泰儀器有限公司；恆溫箱DH3600A通利信達：天津市通利信達儀器。

1.4試驗試劑：牛雌激素(E)、孕激素(P4)、催乳素(PRL)、生長激素(GH)、氫化可的松(HC)和胰島素(INS)雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測均採用美國RD公司ELISA試劑盒。

1.5試驗方法

1.5.1血清採集：採集回乳過程中奶牛尾根靜脈血10ml，置於未加抗凝劑的離心管中，室溫下靜置1h，以1500r/min離心10min，轉移上層血清於EP管中，-20℃凍存，待檢。

1.5.2 ELISA檢測：採用雙抗體夾心酶聯免疫吸附技術(ELISA)，嚴格按照檢測試劑盒說明書進行牛E、P4、PRL、GH、HC和INS的檢測。

1.6統計學處理：實驗數據以平均數±標準差表示，採用t顯著性檢驗，組間採用多重比較法。

2結果

如表1所示，各組回乳期奶牛產奶量均隨時間推移呈下降趨勢，回乳期需要時間分別是11天、7天、5天和5天，回乳第0天，各組間產奶量差異均不顯著(P＞0.05)；第1天，B組產奶量極顯著高於D組(P＜0.01)；第3至5天，A、B組產奶量均極顯著高於C、D組(P＜0.01)，且A組產奶量極顯著高於B組(P＜0.01)；第7天，A組產奶量極顯著高於B組；C、D組產奶量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)。

藥物對回乳期奶牛產奶量的檢測結果

註：同列肩標有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P0.05)。下表同。

如表2所示，各組回乳期奶牛血清E含量均隨時間推移呈下降趨勢，回乳第0至1天，各組血清E含量差異均不顯著(P＞0.05)；第3至7天，A組血清E含量極顯著高於B組(P＜0.01)，A、B組血清E含量極顯著高於C、D組(P＜0.01)；第9至11天，A組血清E含量極顯著高於B、C、D組(P＜0.01)，B、C、D組間差異均不顯著(P＞0.05)；C、D組血清E含量在整個回乳期差異性均不顯著(P＞0.05)。

表2藥物對回乳期奶牛血清E的檢測結果(單位：pg/ml)

如表3所示，A組回乳期奶牛血清P4含量隨時間推移無明顯變化趨勢，B、C、D組均呈下降趨勢，並在回乳期後上升，回乳第0至1天，各組血清P4含量差異性均不顯著(P＞0.05)；第3天，A、B組血清P4含量極顯著低於C、D組(P＜0.01)，A組和B組、C組和D組差異性均不顯著(P＞0.05)；第5天，A、B組血清P4含量極顯著低於C、D組(P＜0.01)；第7至11天，B、C、D組血清P4含量均呈明顯下降趨勢；C、D組血清P4在整個回乳期差異性均不顯著(P＞0.05)。

表3藥物對回乳期奶牛血清P4的檢測結果(單位：ng/ml)

如表4所示，在奶牛回乳期，各組奶牛血清PRL含量均隨時間推移呈下降趨勢，回乳第0天，A組血清PRL含量顯著低於C、D組(P＜0.05)；第1天，PRL含量在4組間差異均不顯著(P＞0.05)；第3至7天，A、B組血清PRL含量均極顯著高於C、D組(P＜0.01)，且A組血清PRL含量在第5至7天極顯著高於B組(P＜0.01)；第9至11天，A組血清PRL含量極顯著高於B、C、D組(P＜0.01)；C、D組血清PRL含量在整個回乳期差異性均不顯著(P＞0.05)。

表4藥物對回乳期奶牛血清PRL的檢測結果(單位：μIU/ml)

如表5所示，在奶牛回乳期，各組血清GH含量均呈下降趨勢，並在回乳期後上升，第0至1天，血清GH含量在四組間差異均不顯著(P＞0.05)；第3至5天，A、B組血清GH含量均極顯著高於C、D組(P＜0.01)，A組血清GH含量極顯著高於B組(P＜0.01)；第7天，A組血清GH含量極顯著高於B、C、D組(P＜0.01)，B組極顯著低於C、D組(P＜0.01)；第9天，A、B組血清GH含量均極顯著低於C、D組(P＜0.01)；第11天，A組血清GH含量極顯著低於B、C、D組(P＜0.01)，B組血清GH含量顯著低於C組(P＜0.05)，B組血清GH含量極顯著低於D組(P＜0.01)；C、D組血清GH含量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)。

表5藥物對回乳期奶牛血清GH的檢測結果(單位：ng/ml)

如表6所示，在奶牛回乳期，各組血清HC含量均隨時間推移呈下降趨勢，回乳第0至1天，各組血清HC含量差異均不顯著(P＞0.05)；第3至7天，A組血清HC含量極顯著高於B、C、D組(P＜0.01)；第9天，A、D組血清HC含量均顯著高於C組(P＜0.05)；第11天，A組血清HC含量極顯著低於B、C、D組(P＜0.01)，且B組顯著低於C、D組(P＜0.05)；C、D組血清HC含量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)。

表6藥物對回乳期奶牛血清HC的檢測結果(單位：ng/ml)

如表7所示，在奶牛回乳期，各組奶牛血清INS含量均隨時間推移呈上升趨勢，回乳第0至1天，各組血清INS含量差異均不顯著(P＞0.05)；第3至5天，A組血清INS含量極顯著低於B、C、D組(P＜0.01)，B組顯著低於C組(P＜0.05)；第7天，A、B組血清INS含量極顯著低於C、D組(P＜0.01)，A組極顯著低於B組(P＜0.01)；第9天，A組血清INS含量極顯著低於B、C、D組(P＜0.01)，B組顯著低於C、D組(P＜0.05)；第11天，A組極顯著低於B、C組(P＜0.01)，A組顯著低於D組(P＜0.05)；C、D組血清INS含量在整個回乳期均差異性不顯著(P＞0.05)。

表7藥物對回乳期奶牛血清INS的檢測結果(單位：nIU/ml)

3討論

3.1目前，人醫運用麥芽口服，芒硝外敷等回乳方式已不少見。現有回乳方中多有麥芽，且已經人工合成麥角衍生物——卡麥角林對PRL的生成明顯抑制，進而控制泌乳。然而，中藥運用於奶牛回乳還未見研究報導，本試驗結果顯示，在奶牛回乳過程中，各組奶牛產奶量均隨時間推移呈降低趨勢，回乳第1天，400g組產奶量極顯著高於500g組(P＜0.01)；第3至5天，對照組和400g組產奶量極顯著高於500g、600g組(P＜0.01)，且對照組產奶量極顯著高於400g組(P＜0.01)，表明了回乳藥具有較好回乳效果，可能是回乳藥以炒麥芽消食、回乳；升麻、柴胡、香附、白朮疏肝理氣；黃芩、知母、蘇梗安胎；五味子、蒲公英固精斂陰，清熱解毒，統籌全局，斷其生化之源，使肝氣調達四運，有效抑制乳汁分泌而回乳，500g、600g組產奶量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)，表明回乳藥在達到500g時，效果即可達到最佳。

3.2 E是卵巢和胎盤合成和分泌的一種類固醇激素，是乳腺發育、泌乳啟動與維持必不可少的激素之一。乳腺發育早期，E和生長因子協同調控導管上皮末端終芽增生，乳腺發育中、後期，E促進乳腺導管生長，誘導P4受體表達，促進乳腺發育，提高乳腺上皮組織PRL水平，並與E受體(estrogen receptor，ER)結合直接發揮促乳功能，提高泌乳量。同時，E可誘導生長激素活性，影響胰島素敏感性，間接調控乳腺泌乳。本研究發現，在奶牛回乳過程中，對照組奶牛血清E含量下降較中藥組緩慢，回乳藥400g組血清E含量在第3至7天極顯著高於500g、600g組(P＜0.01)，第9至11天，400g組與500g、600g組差異不顯著(P＞0.05)，500g組和600g組在整個回乳期差異不顯著(P＞0.05)，說明回乳藥對降低回乳期奶牛E含量效果明顯，飼餵500g/日即可達到最佳效果，且中藥組E含量在回乳期後無明顯變化，可能是由於奶牛停止泌乳引起。表明回乳藥能夠使奶牛血清E降低，明顯縮短回乳持續時間，從而降低回乳期乳房炎發病率。

3.3 P4是介於內分泌和免疫系統交互作用的重要因子，具有促進乳腺小葉及腺泡發育，維持妊娠等作用。在E刺激乳腺導管發育的基礎上，P4能使乳腺發育更充分，刺激豚鼠乳腺增生，本研究結果顯示，回乳藥能夠極顯著提高回乳期奶牛血清P4含量(P＜0.01)，400g組在奶牛回乳期P4含量升高趨勢較500g、600g組慢，且500g、600g組P4含量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)，表明回乳藥500g和600g飼餵量對奶牛回乳期血清P4含量影響一致，在停止飼餵回乳藥後，P4含量有一定程度的下降，但各中藥組仍極顯著高於對照組(P＜0.01)，表明奶牛回乳期飼餵回乳藥能夠提高奶牛血清P4含量，以500g為佳，可能是由於回乳藥中黃芩、蘇梗、白朮等中藥提高妊娠奶牛體內P4含量引起，P4含量的升高使子宮內膜和子宮肌鬆弛，從而保證胎犢宮內生長發育。

3.4 PRL是垂體分泌的一種蛋白質激素，主要受神經內分泌調節，具有促進乳腺生長、啟動和維持泌乳的作用。婦女哺乳期大量分泌PRL，其與乳腺中受體結合，激活JAK2激酶，通過JAK2/STAT5信號通路刺激乳腺發育，增強乳蛋白合成，促進乳汁生成、啟動和維持。另有研究表明，通過抑制奶牛PRL可促使奶牛回乳。本研究結果發現，回乳期奶牛血清PRL含量隨時間推移降低，第3至11天，空白對照組PRL含量均極顯著高於中藥組(P＜0.01)，且400g中藥組下降趨勢較500g、600g組緩慢，而500g、600g組PRL含量差異性不顯著(P＞0.05)；在停餵回乳藥後，各中藥組血清PRL含量差異均不顯著(P＞0.05)。表明在奶牛回乳過程中，回乳藥能顯著降低血清中PRL含量，且在回乳藥500g時即可達到最佳，可能是麥芽與其它中藥成分共同作用，刺激垂體降低PRL的分泌。

3.5 GH是由腦垂體分泌的一種單一肽鏈的蛋白質激素，有促進生長發育，調控泌乳等作用。運用牛生長素可調節奶牛機體物質代謝，提高飼料轉化率，增加產奶量，對早期泌乳奶牛注射GH可增加產奶量，其主要通過JAK2/STAT5信號通路、IGF-I和GH受體等增加乳腺血流量，使營養成分向乳腺聚集，促進乳腺發育。本研究表明，在奶牛回乳過程中，對照組血清GH含量在回乳第1至11天均呈下降趨勢，且在第3至7天，對照組血清GH含量極顯著高於中藥組(P＜0.01)，400g組在第3至5天極顯著高於500g、600g組(P＜0.01)，隨後，中藥組GH含量均上升，且500g與600g組在整個回乳期差異性不顯著(P＞0.05)。說明回乳藥對回乳期奶牛降GH含量效果明顯，每日飼餵500g即可達到最佳效果，且在回乳期後，中藥組GH含量回升，推測回乳藥對胎兒生長發育有促進作用，而對照組GH在回乳期呈現逐漸下降趨勢，可能是由於對照組奶牛回乳速度較慢，GH還未達到回升期。表明回乳藥能夠使奶牛快速回乳，減少GH低含量持續時間，進而間接促進胎犢生長發育。

3.6 HC是哺乳動物腎上腺皮質分泌的主要糖皮質激素之一，近年來，關於HC對提高奶牛泌乳量及改善乳品質逐漸成為研究熱點。HC與乳腺細胞胞內核受體結合，啟動並調控泌乳相關基因表達和乳蛋白合成，通過基因組機制實現其生理和藥理功能。HC能夠增強PRL對酪蛋白mRNAs累積，進而對奶牛乳腺上皮細胞增殖起重要調控。本研究發現，在奶牛回乳過程中，回乳藥各組均可極顯著降低血清HC含量(P＜0.01)，說明回乳藥降HC含量效果明顯，在回乳期後，中藥組HC明顯回升，且各中藥組間差異性不顯著(P＞0.05)，可能是由於奶牛及胎犢對糖、脂肪和蛋白質等代謝調節需求HC，而對照組繼續下降，可能是由於對照組回乳持續時間較長，致使HC還未達到回升期，綜上所述，奶牛在回乳期HC明顯降低，並在回乳期後回升，表明各組回乳藥降奶牛血清HC含量均有良好效果。

3.7 INS具有加強糖原合成、維持血糖恆定並調控泌乳等作用。其可激活胰島素亞基受體I，通過配體約束力和自動磷酸化的誘導，促使生成INS受體蛋白位點，從而調控乳腺上皮細胞乳糖、乳脂的生物合成。但INS對反芻動物乳腺發育的作用仍存在爭議，本研究顯示，在奶牛回乳過程中，回乳藥能夠極顯著提高回乳期奶牛INS含量(P＜0.01)，400g組在奶牛回乳期INS含量升高趨勢較500g、600g組慢，且500g、600g組P4含量在整個回乳期差異均不顯著(P＞0.05)，可能是回乳藥中黃芩和知母等可提升INS含量，促進機體糖脂沉積，減少產奶量，表明回乳藥500g和600g飼餵量對奶牛回乳期血清INS含量影響一致。

應當理解的是，對本領域普通技術人員來說，可以根據上述說明加以改進或變換，而所有這些改進和變換都應屬於本發明所附權利要求的保護範圍。