一種土黴素的精製方法
2023-06-15 21:18:51
專利名稱：一種土黴素的精製方法
技術領域：
本發明 涉及一種土黴素的精製方法，屬於抗生素製劑領域。
背景技術：
土黴素是一種廣譜的四環素類抗生素，主要用於防治豬、牛、羊及家禽的立克次體、支原體、衣原體和部分革蘭氏陰性菌感染，對於痢疾、皮膚化膿感染和地方性肺炎有明顯的療效。土黴素微溶於水，可溶於乙醇等有機溶劑，可製成散劑、注射液等，便於臨床的應用。口服級粗土黴素，用藥次數較多，引起的動物應激反應較強，且含有熱源、病毒等雜質，容易引起毒性反應。而精製的土黴素藥效高，雜質少，從而大大降低動物的應激反應和毒性反應，可以製作長效土黴素注射液，臨床效果明顯，經濟效益高。但目前精製土黴素的方法製得的土黴素純度不高，且操作繁瑣，不利於工業上的廣泛應用。
發明內容
本發明的目的是提供一種土黴素的精製方法，以提高土黴素的純度。為了實現以上目的，本發明所採用的技術方案在於提供一種土黴素的精製方法，具體步驟如下I)取粗土黴素，溶於鹽酸溶液中，攪拌使之溶解；2)加入硫氰酸銨溶解，再調pH至I. 2-1. 8，靜置lh，過濾至澄清，取濾液；3)加入硫酸鋅和亞鐵氰化鉀，攪拌，靜置2h，過濾至澄清，取濾液；4)將上述濾液進行超濾；5)取超濾液，調其pH至4. 5-5. 0，靜置4h，中速濾紙過濾，取濾餅；6)將上述濾餅，用鹽酸溶液溶解，再調其pH至4. 5-5. 0，靜置4h，中速濾紙過濾，取濾餅；7)將上述濾餅，真空乾燥2h，得精製土黴素。步驟I)和步驟6)中鹽酸溶液的pH= I. O。步驟2)中加入硫氰酸銨的量為I. 5-3. Og/ml。步驟3)中硫酸鋅和亞鐵氰化鉀的加入量為4-6g/ml，質量比為0. 5-0. 8:10步驟4)中超濾壓差為0. IMPa，超濾膜截留分子量為1(T30K。步驟7)中真空乾燥溫度為50_60°C。本發明土黴素的精製方法簡單可行，所需設施簡單，原料廉價易得，在實際生產中容易實施。本發明精製土黴素的土黴素含量大於99%，而相同方法及條件測定Pliva公司精製土黴素產品含量為98. 2%，產品含量達到了國際水平。經過純化後所得的精製土黴素，不僅提高了生物利用度，而且具有安全可靠、無毒副作用、生理生化性質穩定等優點，可以在臨床上廣泛應用。
具體實施例方式實施例I本實施例提供的土黴素的精製方法，具體步驟如下I)取IOg粗土黴素，溶於pH=1.0的鹽酸中；2)在上述溶液中加入I. 5g/ml硫氰酸銨溶解，再加鹽酸調pH至I. 2，靜置lh，過濾
至澄清，取濾液；3)在上述濾液中加入4. Og/ml的硫酸鋅和亞鐵氰化鉀，其質量比為0. 5 :1，攪拌，靜置2h，過濾至澄清，取濾液；4)將上述濾液在0. IOMpa下進行超濾，超濾膜截留分子量為IOK ；5)取上述超濾液，用氫氧化鉀溶液調其pH至4. 5，靜置4h，中速濾紙過濾，取濾餅；6)將上述濾餅,用pH=l. 0的鹽酸溶解,再用氫氧化鉀溶液調其pH至4. 5,靜置4h,中速濾紙過濾，取濾餅；7)將上述濾餅，在50°C真空乾燥2h，得精製土黴素。精製土黴素的純度測定I)稱取精製土黴素樣品25mg，置於50ml容量瓶中，加0. lmol/L鹽酸溶液5ml使之溶解，加水稀釋至刻度，搖勻；2)量取步驟I)製得溶液5ml，置於25ml容量瓶中，加0. Olmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勾;3)量取步驟2)製得溶液10 yl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取土黴素對照品，同法測定。按外標法以峰面積比計算其中的土黴素含量。待測精製土黴素樣品的含量(cx) =cR*Ax/AR,其中cR為對照品的土黴素含量，Ar為對照品的峰面積，Ax為待測精製土黴素 樣品的峰面積。本實施例精製土黴素含量如表所示。實施例2本實施例提供的土黴素的精製方法，具體步驟如下I)取IOg粗土黴素，溶於pH=1.0的鹽酸中；2)在上述溶液中加入2. 5g/ml的硫氰酸銨溶解，再加鹽酸調pH至I. 5，靜置lh，過濾，取濾液；3)在上述濾液中加入6. Og/ml的硫酸鋅和亞鐵氰化鉀，其質量比為0. 6 :1，攪拌，靜置2h，過濾至澄清，取濾液；4)將上述濾液在0. IOMpa下進行超濾，超濾膜截留分子量為20K ；5)取上述超濾液,用氫氧化鈉溶液調其pH至4. 8,靜置4h,中速濾紙過濾,取濾餅；6)將上述濾餅，用pH=l. 0的鹽酸溶解，再用氫氧化鈉溶液調其pH至4. 8，靜置4h，中速濾紙過濾，取濾餅；7)將上述濾餅，在55°C真空乾燥2h，得精製土黴素。精製土黴素的純度測定I)稱取精製土黴素樣品25mg，置於50ml容量瓶中，加0. lmol/L鹽酸溶液5ml使之溶解，加水稀釋至刻度，搖勻；
2)量取步驟I)製得溶液5ml，置於25ml容量瓶中，加0. Olmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勾;3)量取步驟2)製得溶液10 yl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取土黴素對照品，同法測定。按外標法以峰面積比計算其中的土黴素含量。待測精製土黴素樣品的含量(cx) =cR*Ax/AR,其中cR為對照品的土黴素含量，Ar為對照品的峰面積，Ax為待測精製土黴素樣品的峰面積。本實施例精製土黴素含量如表所示。實施例3本實施例提供的土黴素的精製方法，具體步驟如下I)取IOg粗土黴素，溶於pH=l. 0的鹽酸溶液中；2)在上述溶液中加入3. Og/ml硫氰酸銨溶解，再用鹽酸調pH至I. 8，靜置lh，過濾，取濾液； 3)在上述濾液中加入5. Og/ml的硫酸鋅和亞鐵氰化鉀，其質量比為0. 8 :1，攪拌，靜置2h，過濾至澄清，取濾液；4)將上述濾液在0. IOMpa下進行超濾，超濾膜截留分子量為30K ；5)取上述超濾液,用氨水調其pH至5. 0,靜置4h,過濾,取濾餅；6)將上述濾餅,用pH=l. 0的鹽酸溶液溶解,再用氨水調其pH至5. 0,靜置4h,過濾，取濾餅；7)將上述濾餅，在60°C真空乾燥2h，得精製土黴素。精製土黴素的純度測定I)稱取精製土黴素樣品25mg,置於50ml容量瓶中，加0. lmol/L鹽酸溶液5ml使之溶解，加水稀釋至刻度，搖勻；2)量取步驟I)製得溶液5ml，置於25ml容量瓶中，加0. Olmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勾;3)量取步驟2)製得溶液10 yl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取土黴素對照品，同法測定。按外標法以峰面積比計算其中的土黴素含量。待測精製土黴素樣品的含量(cx) =cR*Ax/AR,其中cR為對照品的土黴素含量，Ar為對照品的峰面積，Ax為待測精製土黴素樣品的峰面積。本實施例精製土黴素含量如表所示。表精製土黴素含量統計表
權利要求
1.一種土黴素的精製方法，其特徵在於，具體步驟如下 1)取粗土黴素，溶於鹽酸溶液中，攪拌使之溶解； 2)加入硫氰酸銨溶解，再調pH至I.2-1. 8，靜置lh，過濾至澄清，取濾液； 3)加入硫酸鋅和亞鐵氰化鉀，攪拌，靜置2h，過濾至澄清，取濾液； 4)將上述濾液進行超濾； 5)取超濾液，調其pH至4.5-5. O，靜置4h，用中速濾紙過濾，取濾餅；6)將上述濾餅,用鹽酸溶液溶解,再調其pH至4.5-5. O，靜置4h，中速濾紙過濾，取濾餅； 7)將上述濾餅，真空乾燥2h，得精製土黴素。
2.根據權利要求I所述的一種土黴素的精製方法，其特徵在於，步驟I)和步驟6)中鹽酸溶液的PH=LO。
3.根據權利要求I所述的一種土黴素的精製方法，其特徵在於，步驟2)中加入硫氰酸銨的量為1.5-3. Og/ml。
4.根據權利要求I所述的一種土黴素的精製方法，其特徵在於，步驟3)中硫酸鋅和亞鐵氰化鉀的加入量為4-6g/ml,質量比為0. 5-0. 8:1。
5.根據權利要求I所述的一種土黴素的精製方法，其特徵在於，步驟4)中超濾壓差為0.IMPa，超濾膜截留分子量為1(T30K。
6.根據權利要求I所述的一種土黴素的精製方法，其特徵在於，步驟7)中真空乾燥溫度為 50-60°C。
全文摘要
本發明公開了一種土黴素的精製方法，具體步驟如下1)將粗土黴素溶解於鹽酸中；2)加入硫氰酸銨，攪拌溶解，調節溶液pH，靜置1h後過濾雜質；3)將上述濾液中添加黃血鹽-硫酸鋅淨化劑，攪拌，靜置2h後過濾雜質；4)將上述濾液進行超濾；5)將上述超濾液調節pH至4.5-5.0，靜置4h後過濾得結晶；6)將上述晶體用鹽酸溶解，調節pH至4.5-5.0，靜置4h後，過濾得晶體；7)將上述晶體進行真空乾燥，得精製土黴素。本發明精製土黴素的方法簡單，成本低廉，製得的土黴素純度高，生理生化性質穩定，無毒副作用，具有廣泛的應用價值。
文檔編號C07C237/26GK102796024SQ201210312189
公開日2012年11月28日 申請日期2012年8月29日 優先權日2012年8月29日
發明者吳紅雲, 李建正, 張聽盼 申請人:鄭州后羿製藥有限公司