六月青多糖的製備及其抗B肝病毒的作用的製作方法

2023-06-24 01:21:56

六月青多糖的製備及其抗B肝病毒的作用的製作方法
【專利摘要】本發明是從廣西民間藥材六月青粗粉中提取分離得到的多糖。發明人對該藥進行了大量的研究，體內實驗發現，本品對四氯化碳(CCl4)、對乙醯氨基酚、D-半乳糖胺(D-Gln)等所致小鼠急性化學性肝損傷均有保護作用，能明顯降低丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)的活性。體外試驗表明：本品可降低HepG2.2.15細胞培養上清中的HBsAg、HBeAg含量，可抑制HBV-DNA的複製。六月青多糖對B型肝炎，黃疸的治療有較大的潛在應用價值。目前，尚未發現有把六月青多糖製成製劑並應用於臨床的報告。本發明是對廣西民族特色天然藥物資源進行挖掘整理，將為中草藥的深度開發提供新思路，對促進我國中草藥產業現代化具有重大意義。為B型肝炎、黃疸的治療提供一種新的天然藥物製劑。
【專利說明】六月青多糖的製備及其抗B肝病毒的作用
【技術領域】
[0001]本發明涉及以六月青多糖作為有效成份的純天然藥物製劑，以及其在治療B型肝炎、急慢性肝損傷、抗腫瘤，提高機體免疫力。
【背景技術】
[0002]六月青(LYQ),系爵床科(Acanthaceae)植物肖雞籠(頂頭馬蘭)Taraphochlamysaff inis (Griff) Bremekhu (Strobilanthes aff inis (griff) Y.C.Tang)的乾燥地上部分。是廣西民間用於治療急慢性肝損傷、B型肝炎、黃疸等的常用草藥。申請者對該藥進行了大量的研究，體內實驗發現，本品對四氯化碳(CCl4)等所致大鼠急性化學性肝損傷均有保護作用，能明顯降低丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)的活性；能增加免疫抑制小鼠的胸腺重量，提高血清溶菌酶、腫瘤壞死因子(TNF-α)的含量；能增加S180荷瘤小鼠血清中腫瘤壞死因子(TNF-α)和白細胞介素(IL-2)含量，抑制S180荷瘤小鼠的腫瘤生長。體外試驗亦表明:本品可降低H印G2.2.15細胞培養上清中的HBsAg、HBeAg含量，可抑制HBV-DNA的複製。六月青對急慢性肝損傷、B型肝炎，黃疸的治療有較大的潛在應用價值。本研究是對廣西民族特色藥材進行挖掘整理，將為廣西民族草藥的深度開發提供新思路，對促進廣西中草藥產業現代化具有重大意義。
[0003]目前，尚未發現有把六月青多糖片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑等應用於臨床的報告。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是把六月青多糖製成片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑，應用於急慢性肝損傷、B型肝炎，腫瘤的治療。
[0005]技術方案:
[0006]1、六月青多糖的提取:六月青乾燥粗粉，加10倍量水，煮3次，每次2h，收集水煮液，濃縮成稠膏，於60°C真空乾燥烘箱中烘乾，得粉末。
[0007]2、製劑的製備:六月青多糖加入適當輔料製成片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑。
[0008]3、六月青多糖片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑對肝癌細胞H印G2.2.15細胞的影響:採用MTT法測定六月青片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑對H印G2.2.15細胞毒性，ELISA法測定細胞培養上清中的HBsAg、HBeAg，測定六月青片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑的半數中毒濃度(TC50)、半數抑制濃度(IC5tl)。採用PCR體外擴增法定量檢測各活性部位對H印G2.2.15細胞HBV-DNA的拷貝數和循環數(CT)的影響。
【具體實施方式】
[0009]1、六月青多糖的製備:取1000g六月青乾燥粗粉，加IOL水，煮3次，每次2h，合併水提液，過濾，濾液濃縮後加入6倍量95%乙醇醇沉24h，回收乙醇，濃縮濾液，60°C烘箱真空乾燥，得褐色粉狀多糖。加入相應輔料製成片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑。
[0010]藥效學研究[0011]對H印G2.2.15細胞的影響
[0012]對H印G2.2.15細胞進行細胞分泌動力學實驗，以確定加入受度藥物時間和周期；採用MTT法測定六月青多糖片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑對H印G2.2.15細胞毒性，ELISA法測定細胞培養上清中的B型肝炎表面抗原(HBsAg)、B型肝炎6抗原(HBeAg)，測定其TC5Q、IC5tl ;並採用PCR體外擴增法定量檢測H印G2.2.15細胞培養上清中HBV-DNA的拷貝數和循環數(CT)。結果發現，六月青多糖片劑、膠囊劑、顆粒劑、合劑可降低HBV-DNA的拷貝數和循環數。顯示六月青多糖對HBV-DNA的複製有抑制作用。結果見下表1、2、3:
[0013]表1六月青多糖對!fepG2.2.15細胞的細胞毒作用:(= 6)
[0014]
【權利要求】
1.一種治療B肝病毒的新藥-六月青多糖，其特徵在於:六月青多糖是用水提醇沉法從六月青乾燥莖葉中提取分離得到的。
2.根據權 利要求1所述的六月青多糖，其特徵在於:六月青多糖用於治療B型肝炎，具有抗B型肝炎病毒的作用。
【文檔編號】C08B37/00GK103965367SQ201310025301
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2013年1月24日 優先權日:2013年1月24日
【發明者】黃仁彬, 張士軍, 羅秀, 葛文漪, 何巧玲, 蒙明瑜, 李映新, 吳咖, 黃莎 申請人:廣西醫科大學