一種藍堇林鹼的分離純化方法

2023-05-31 04:51:56 3

專利名稱：一種藍堇林鹼的分離純化方法
一種藍堇林鹼的分離純化方法技術領域
本發明屬於植物有效成分提取技術領域，涉及一種藍堇林鹼的分離純化方法。
技術背景
藍堇林鹼(Fumariline)，分子式為C2tlH17NO5，分子量為；351. 36，mp. 144°C，是從紫堇科、罌粟科植物中分離得到的一種異喹啉類生物鹼，實驗研究表明，紫堇林鹼具有廣泛的生理活性，如大鼠腹腔注射10、20、35和50mg/kg，顯示劑量依賴的鎮痛作用，誘導抗感受傷害作用呈劑量依賴關係；另外，大鼠腹腔注射10、20、35和50mg/kg，顯示中等至顯著的鎮靜作用，表現為自發運動明顯減少，反應性下降，苯巴比妥所致睡眠時間明顯延長，呈劑量依賴關係；對電休克誘導的大鼠驚厥有對抗作用，呈劑量依賴關係。
目前尚未見藍堇林鹼的提取純化方法方面的報導。發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種藍堇林鹼的分離純化方法，該方法能夠提取分離得到高含量的藍堇林鹼晶體，方法簡單可行、晶型好。
本發明的分離純化技術方案如下一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於包括以下步驟(1)提取將原料藥材粉碎，加入飽和石灰石浸泡4-8小時，然後用乙醇溶液回流提取， 減壓回收乙醇，得到提取濃縮液；(2)大孔樹脂柱層析將提取濃縮液加水分散，再通過大孔吸附樹脂吸附柱中，柱徑高比為1:8-1:20，室溫下以30-95%乙醇梯度洗脫，收集藍堇林鹼洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇， 得乙醇洗脫液；(3)氧化鋁柱層析將乙醇洗脫液加入氧化鋁柱頂端，以乙酸乙酯-乙醇混合溶液梯度洗脫，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱；(4)重結晶將步驟(3)所得沉澱物用無水乙醇回流溶解，過濾，結晶，二氯甲烷-丙酮重結晶得藍堇林鹼。
所述步驟(2)中30-95%乙醇梯度洗脫，先用30_55%乙醇洗脫，再用80_95%乙醇洗脫，收集80-95%乙醇洗脫液，洗脫流速為1-2. 5BV/h，洗脫用量為3-6BV。
所述步驟(3)中氧化鋁柱為中壓柱，氧化鋁為100-300目的中性氧化鋁。
所述步驟(3)中乙酸乙酯-乙醇溶液梯度洗脫按乙酸乙酯-乙醇體積比1:0、1:1、 1:3、1:5依次洗脫。
所述步驟(4)中二氯甲烷-丙酮體積比為5:1。
本發明的有益效果是本發明採用大孔樹脂和中壓氧化鋁柱層析結合，分離效果好，上樣量大，生產周期短；通過無水乙醇結晶，二氯甲烷-丙酮重結晶，所得產品晶型好； 所用試劑毒性較低，是一種高效、低汙染、低耗能的分離純化藍堇林鹼的方法。
具體實施方式
下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
實施例1 將卷鬚藍堇地上部分乾燥、粉碎，取5kg投入提取罐中，加入5倍量飽和石灰水室溫浸泡證，然後加入4倍量75%乙醇加熱回流提取2次，每次池，合併提取液，提取液減壓回收乙醇，得到提取濃縮液，加水分散，通過大孔吸附樹脂柱(柱徑高比為1 10)，室溫條件下先用40%乙醇洗脫，再用85%乙醇洗脫，收集85%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇，取200-300 目的中性氧化鋁裝柱，將乙醇洗脫濃縮液從頂端注入，加壓條件下將乙酸乙酯-乙醇混合溶液按體積比1:0、1:1、1:3、1:5依次注入柱中，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱，濾出沉澱，用無水乙醇回流溶解，結晶，再以二氯甲烷-丙酮(5:1)重結晶，乾燥得藍堇林鹼576mg，含量95. 7%。
實施例2:將卷鬚藍堇地上部分乾燥、粉碎，取5kg投入提取罐中，加入8倍量飽和石灰水室溫浸泡他，然後加入6倍量80%乙醇加熱回流提取3次，每次1. 5h,合併提取液，提取液減壓回收乙醇，得到提取濃縮液，加水分散，通過大孔吸附樹脂柱(柱徑高比為1 18)，室溫條件下先用50%乙醇洗脫，再用80%乙醇洗脫，收集85%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇，取100-200 目的中性氧化鋁裝柱，將乙醇洗脫濃縮液從頂端注入，加壓條件下將乙酸乙酯-乙醇混合溶液按體積比1:0、1:1、1:3、1:5依次注入柱中，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱，濾出沉澱，用無水乙醇回流溶解，結晶，再以二氯甲烷-丙酮(5:1)重結晶，乾燥得藍堇林鹼W3mg，含量97. 3%。
實施例3:將卷鬚藍堇地上部分乾燥、粉碎，取5kg投入提取罐中，加入10倍量飽和石灰水室溫浸泡4h，然後加入3倍量65%乙醇加熱回流提取2次，每次1. 5h,合併提取液，提取液減壓回收乙醇，得到提取濃縮液，加水分散，通過大孔吸附樹脂柱(柱徑高比為1:20)，室溫條件下先用55%乙醇洗脫，再用90%乙醇洗脫，收集85%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇，取100-200 目的中性氧化鋁裝柱，將乙醇洗脫濃縮液從頂端注入，加壓條件下將乙酸乙酯-乙醇混合溶液按體積比1:0、1:1、1:3、1:5依次注入柱中，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱，濾出沉澱，用無水乙醇回流溶解，結晶，再以二氯甲烷-丙酮(5:1)重結晶，乾燥得藍堇林鹼57ang，含量95. 9%。
實施例4:將卷鬚藍堇地上部分乾燥、粉碎，取5kg投入提取罐中，加入6倍量飽和石灰水室溫浸泡他，然後加入5倍量70%乙醇加熱回流提取3次，每次池，合併提取液，提取液減壓回收乙醇，得到提取濃縮液，加水分散，通過大孔吸附樹脂柱(柱徑高比為1:8)，室溫條件下先用 30%乙醇洗脫，再用95%乙醇洗脫，收集85%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇，取200-300目的中性氧化鋁裝柱，將乙醇洗脫濃縮液從頂端注入，加壓條件下將乙酸乙酯-乙醇混合溶液按體積比1:0、1:1、1:3、1:5依次注入柱中，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱，濾出沉澱，用無水乙醇回流溶解，結晶，再以二氯甲烷-丙酮(5:1)重結晶， 乾燥得藍堇林鹼557mg，含量96. 3%。
權利要求
1.一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於包括以下步驟(1)提取將原料藥材粉碎，加入飽和石灰石浸泡4-8小時，然後用乙醇溶液回流提取， 減壓回收乙醇，得到提取濃縮液；(2)大孔樹脂柱層析將提取濃縮液加水分散，再通過大孔吸附樹脂吸附柱中，柱徑高比為1:8-1:20，室溫下以30-95%乙醇梯度洗脫，收集藍堇林鹼洗脫液，減壓蒸餾回收乙醇， 得乙醇洗脫液；(3)氧化鋁柱層析將乙醇洗脫液加入氧化鋁柱頂端，以乙酸乙酯-乙醇混合溶液梯度洗脫，收集藍堇林鹼流分，減壓回收試劑至有沉澱析出，放置沉澱；(4)重結晶將步驟(3)所得沉澱物用無水乙醇回流溶解，過濾，結晶，二氯甲烷-丙酮重結晶得藍堇林鹼。
2.根據權利要求1所述的一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於所述步驟(2)中 30-95%乙醇梯度洗脫，先用30-55%乙醇洗脫，再用80-95%乙醇洗脫，收集80-95%乙醇洗脫液，洗脫流速為1-2. 5BV/h，洗脫用量為3-6BV。
3.根據權利要求1所述的一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於所述步驟(3)中氧化鋁柱為中壓柱，氧化鋁為100-300目的中性氧化鋁。
4.根據權利要求1所述的一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於所述步驟(3)中乙酸乙酯-乙醇溶液梯度洗脫按乙酸乙酯-乙醇體積比1:0、1:1、1:3、1:5依次洗脫。
5.根據權利要求1所述的一種藍堇林鹼的分離純化方法，其特徵在於所述步驟(4)中二氯甲烷-丙酮體積比為5:1。
全文摘要
本發明涉及植物有效成分提取技術領域，具體涉及一種藍堇林鹼的分離純化方法。本發明的技術方案包括以下步驟將卷鬚藍堇藥材粉碎，用飽和石灰水浸泡，浸提液濃縮成浸膏，再用乙醇回流提取，減壓回收乙醇，通過大孔吸附樹脂，乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮後通過氧化鋁柱層析，乙酸乙酯-乙醇混合溶液梯度洗脫，收集目標成分，減壓回收試劑，放置沉澱，收集沉澱物用無水乙醇回流溶解，結晶，二氯甲烷-丙酮重結晶得到產品。
文檔編號C07D491/20GK102503948SQ20111030350
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月10日 優先權日2011年10月10日
發明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司