幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA及其應用的製作方法

2023-06-15 14:04:01 1

幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA及其應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA及其應用，stealth?siRNA-69，stealth?siRNA-294，stealth?siRNA-319是以EV712A蛋白酶基因為靶序列化學合成的三個siRNA，其可以與EV71病毒2A蛋白酶基因區域有效的互補結合，將病毒核酸降解，從而達到抑制病毒複製擴增的目的。以siRNA為基礎的RNAi因其基因沉默的高度特異性和高效性，為病毒感染類疾病的臨床治療開闢了新的途徑。
【專利說明】幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個s iRNA及其應用
【技術領域】[0001]本發明涉及的是幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA及其應用，包括stealth siRNA_69stealth siRNA_294stealth siRNA-319。
【背景技術】
[0002]EV71病毒屬於微小RNA病毒科腸道病毒A組,病毒基因組為單股正鏈RNA,大小約7500bp，病毒衣殼為二十面體立體對稱球形結構，直徑約為24-30nm，無包膜和突出。EV71感染主要引起手足口病，多發生於學齡前兒童，其臨床症狀主要表現為發熱，手、足、口腔黏膜等部位出現皰疹，重症病例在發病1-5天後出現腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫和循環障礙等症狀，甚至死亡。1957年，加拿大首次報告手足口病，之後在歐洲、美洲和亞洲多個地區相繼發生大流行。在我國，手足口病早有流行。1981年，上海首次報告了手足口病，2008年3月，安徽省阜陽市發生了較大規模的疫情，感染人數達176000人，並有23例死亡，隨即在全國其他地區也出現了手足口病的疫情，引起了社會的恐慌。目前，尚無有效抵抗EV71的抗病毒藥物，所以，尋找一種潛在有效的抗病毒方法是十分必要的。
[0003]RNA幹擾是一種分子生物學上由雙鏈RNA誘發的基因沉默現象，其機制是通過阻礙特定基因的翻譯或轉錄來抑制基因表達。當細胞中導入與內源性mRNA編碼區同源的雙鏈RNA時，該mRNA發生降解而導致基因表達沉默。研究中導入的雙鏈RNA分子為具有基因沉默功能的大小約21-25核苷酸的雙鏈小RNA分子(稱為siRNA)，由RNAaseIII家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶Dicer加工而成。
[0004]近些年已經報導過以EV71基因的其他區域比如vpl，vp2，5』UTR，3』UTR，2C, 3Cproand3Dpol為靶序列化學合成siRNR治療病毒的文章，但還沒有以2A蛋白酶基因作為抑制病毒複製的靶標，所以本發明的目的是探討以EV712A蛋白酶基因為靶序列化學合成的三個siRNA是否具有潛在的抗病毒作用。
[0005]因此，現有技術存在缺陷，需要改進。

【發明內容】

[0006]本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足提供幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA及其應用。
[0007]本發明的技術方案如下:
[0008]幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個siRNA，包括如下表所示的三個siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
[0009]
【權利要求】
1.幹擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個SiRNA，其特徵在於，包括如下表所示的三個siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
2.權利要求1所述的三個siRNA的應用，其與EV71病毒2A蛋白酶基因區域有效的互補結合，將病毒核酸降解，從而達到抑制病毒複製擴增的目的。
【文檔編號】A61K48/00GK103642808SQ201310646161
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月6日 優先權日:2013年12月6日
【發明者】陳建國, 劉海冰, 王勝軍, 孔枕枕, 趙培培 申請人:陳建國, 劉海冰