分子印跡與超聲耦合提取靈芝酸的辦法的製作方法
2023-06-15 16:24:16 2
本發明涉及天然產物的提取分離技術領域，尤其是一種分子印跡與超聲耦合提取靈芝酸的辦法。
背景技術：
靈芝又稱林中靈、瓊珍（學名：Ganoderma Lucidum Karst）是多孔菌科真菌靈芝的子實體。靈芝含有多種化學成分，其主要活性成分有多糖及肽多糖類、生物鹼類和核苷酸類、胺基酸和蛋白質類、三萜類、微量元素。該三萜類化合物具有保肝作用、抗腫瘤作用、抗HIV1及HIV2蛋白酶活性、抑制組胺釋放、抑制血管緊張素轉化酶（ACE）、抑制膽固醇合成、陣痛作用、對血小板聚集的影響、對蛋白金合歡酯轉移酶的抑制作用、抗氧化作用等。而靈芝三萜類化合物的重要活性成分就是靈芝酸，目前靈芝酸的提取方法常是用氯仿作為提取溶劑經矽膠反覆純化而得到，存在環境汙染大、得率低、純度低等技術問題。
分子印跡技術是目前研究的熱點，它具有構效預定性、特異識別性的特點，是一種比較具有產業化價值的技術。這種技術一般是將目標分子作為模版分子，選擇在官能團結構上與之相匹配的功能單體，讓兩者間發生共價作用或非共價作用，再加入交聯劑通過熱聚合或光聚合，在引發劑的致孔劑的誘發下產生聚合反應，從而形成包裹有目標分子的高聚物，即分子印跡聚合物（MIPs），隨後，利用物理或者化學方法，將目標分子從聚合物內部洗脫出來，一次獲得具有與目標分子形狀相同且官能團位置一定的記憶空穴。
技術實現要素：
本發明提供一種分子印跡與超聲耦合提取靈芝酸的辦法，它可以解決目前靈芝酸的提取方法存在環境汙染大、得率低、純度低等的技術問題。
為了解決上述問題，本發明所採用的技術方案是：這種分子印跡與超聲耦合提取靈芝酸的辦法是以靈芝粉末作為提取原料，以水作為提取媒介，利用分子印跡材料吸附提取液中的靈芝酸，再用超聲提取設備從提取液中提取吸附有靈芝酸的分子印跡材料，提取完畢後，洗脫所述分子印跡材料上吸附的靈芝酸即可；
所述分子印跡材料由如下方法製得：
A、將乾燥的靈芝進行粉碎，所得的靈芝粉用質量比濃度為80%的乙醇水溶液浸提3次，合併3次所得的浸提液，每次浸提過程中控制溫度為60℃，每次時間為5h；
所述靈芝粉末的用量與所述乙醇水溶液的用量，按所述靈芝粉末1kg，所述乙醇水溶液5～10L的比例計算；
B、將步驟A所得的浸提液濃縮得到靈芝酸；
C、將1～1.5mmol靈芝酸與6mmol甲基丙烯酸溶解在5～10ml氯仿中，置於0℃下保持30min，然後加入15～30mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯與15～30mmolN-異丙基丙烯醯胺和40～100mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣10min，封口，在65℃條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用體積比為9：1的甲醇：乙醇混合液洗脫靈芝酸，即可得到分子印跡材料。
上述技術方案中，更具體的技術方案還可以是：所述超聲提取過程控制在250W，40MHz。
進一步的：提取完畢後，先用60倍所述分子印跡材料重量的50℃水洗脫吸附在所述分子印跡材料上的雜質，再用30倍所述分子印跡材料重量的25℃水洗脫即可得到靈芝酸溶液。
由於採用了上述技術方案，本發明與現有技術相比具有如下有益效果：
1、本發明的提取靈芝酸的辦法工藝環保，沒有用到任何有機試劑，即提高了超聲提取效率，又容易獲得純度較高的靈芝酸水溶液。
2、本發明製備的印跡材料的最低臨界溶解溫度（LCST）為38℃左右，超聲提取因為會積熱，溫度很容易達到38℃以上，不用外加熱源，節能環保。
具體實施方式
以下結合具體實施例對本發明作進一步詳述：
這種分子印跡與超聲耦合提取靈芝酸的辦法首先要製備分子印跡，製備方法如下：
A、將1kg乾燥的靈芝進行粉碎，所得的靈芝粉用5L質量比濃度為80%的乙醇水溶液浸提3次，合併3次所得的浸提液，每次浸提過程中控制溫度為60℃，每次時間為5h；
B、將步驟A所得的浸提液濃縮得到靈芝酸；
C、將1mmol靈芝酸與6mmol甲基丙烯酸溶解在5ml氯仿中，置於0℃下保持30min，然後加入15mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯與15mmolN-異丙基丙烯醯胺和40mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣10min，封口，在65℃條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用體積比為9：1的甲醇：乙醇混合液洗脫靈芝酸，即可得到分子印跡材料。
然後將製得的分子印跡材料與超聲耦合進行靈芝酸的提取，提取過程如下：
以靈芝粉末作為提取原料，以水作為提取媒介，利用製得的分子印跡材料吸附提取液中的靈芝酸，再用超聲提取設備從提取液中提取吸附有靈芝酸的分子印跡材料，提取過程控制在250W，40MHz。提取完畢後，先用60倍所述分子印跡材料重量的50℃水洗脫吸附在所述分子印跡材料上的雜質，再用30倍所述分子印跡材料重量的25℃水洗脫即可得到靈芝酸水溶液。
該分子印跡材料可重複使用。