一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法
2023-06-08 07:00:21 3
一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法
【專利摘要】本發明屬生物工程【技術領域】，具體涉及一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法。將木蘭科植物五味子的乾燥成熟果實粉碎，水浸泡後用電爐煎熬，取藥汁過濾後濃縮，加入金耳發酵基礎培養基進行深層發酵，能夠提高金耳菌絲體的產量。可應用於具有較高活性的新型發酵製劑生產。
【專利說明】一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法。屬生物工程【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 金耳為擔子菌綱，銀耳目，銀耳科，銀耳屬的乾燥子實體，主要分布於我國西藏雲南等地，野生資源稀有，古籍文獻記載用於肺熱、痰多、咳嗽、氣喘等症的治療，具有較高的藥用價值。研究表明，金耳深層發酵液中含有人體必需的胺基酸，並且有鉀、鈉、鈣、鎂、鐵、鋅等礦質元素。金耳以液體發酵進行生產時，在培養基中添加適量的中藥提取液，能促進其菌絲體的生長。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法。
[0004]本發明的技術方案為:將金耳斜面保藏菌種活化，接種至搖瓶種子液體培養基中培養，待菌絲體分散後將培養好的種子液接入添加了五味子水提液的搖瓶發酵液體培養基培養。發酵結束後，離心獲得溼菌絲體，烘乾至恆重後稱重。比較中藥材添加前後菌絲體產量的差異(結果見表1)。
[0005]本發明提出的添加中藥提取液的金耳深層發酵的具體操作步驟如下:
[0006](I)菌種培養
[0007]出發菌種為本實驗室金耳斜面保藏菌種；
[0008]①搖瓶種子培養
[0009]搖瓶種子培養基=PDAlL加磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，牛肉膏2g，蛋白腖lg，VB1IOIOmg, pH6.0 ；
[0010]培養方法:從斜面菌種中取3~4塊黃豆大小相同的菌塊，接種於搖瓶種子培養基中，250mL三角瓶裝培養基IOOmL於28°C，220r/min，振蕩培養10_14d ;搖瓶中預先裝有經過消毒滅菌的玻璃珠，用於打散菌絲體；
[0011]②搖瓶發酵培養
[0012]發酵培養基:葡萄糖4g/100mL、酵母粉lg/100mL、磷酸二氫鉀0.3g/100mL、硫酸鎂
0.15g/100mL, VB1I^mg/1OOmL, ρΗ6.0 ；
[0013]培養方法:將培養好的種子以15%的接種量接入添加了五味子水提液的搖瓶發酵培養基中28°C，220r/min，振蕩培養10_14d ；
[0014](2)中藥水提液的製備
[0015]稱取木蘭科植物五味子的乾燥成熟果實30g，粉碎後加5倍量水浸泡3h，用電爐煎熬至溫和的沸騰狀態保持30min，離心(3000r/min)15min，上清液(藥汁)待用，殘渣補加適量冷水，再煮沸20min，離心取上清液(藥汁)，合併藥汁，濃縮至對應發酵培養基體積的1/2，用於金耳深層培養。【具體實施方式】
[0016]下面的實例將具體說明本發明的操作方法，但不能作為對本發明的限定。
[0017]實例一
[0018]從斜面菌種中取3~4塊黃豆大小相同的菌塊，接種於搖瓶種子培養基(PDAlLW磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，牛肉膏2g，蛋白腖lg，VB1IO^Omg, pH6.0), 250mL三角瓶裝培養基IOOmL於28°C，220r/min，振蕩培養12d ;將培養好的種子以15%的接種量分別接入未添加和添加了五味子水提液50mL的IOOmL搖瓶發酵培養基(葡萄糖4g/100mL、酵母粉lg/100mL、磷酸二氫鉀 0.3g/100mL、硫酸鎂 0.15g/100mL、VB1I^mgZlOOmL, ρΗ6.0) ,28°C,220r/min，振蕩培養12d ;培養結束後離心獲得溼菌絲體，烘乾至恆重後稱重得到菌絲體產量。
[0019]表1五味子水提液對金耳菌絲體產量的影響
【權利要求】
1.一種添加中藥提取液的金耳深層發酵方法，其特徵在於所述的中藥提取液是五味子水提液，是將一定量木蘭科植物五味子的乾燥成熟果實粉碎，加5倍量水浸泡3h，用電爐煎熬至溫和的沸騰狀態保持30min，離心(3000r/min)15min，上清液(藥汁)待用，殘渣補加適量冷水，再煮沸20min，離心取上清液(藥汁)，合併藥汁，濃縮後得到。
2.權利要求1所述的金耳深層發酵方法，其特徵在於在發酵培養基中按照體積比1:2(五味子提取液/發酵培 養基)的比例加入了五味子水提液。
【文檔編號】A01G1/04GK103518535SQ201310491993
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月16日 優先權日:2013年10月16日
【發明者】鄧超, 付海田, 陳敬華 申請人:江南大學