從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸的製作方法

2023-06-10 21:53:16 3

專利名稱：從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗腫瘤物質，特別涉及一種從中藥土鱉蟲中分離、提取的抗腫瘤有效部位脂肪酸。
背景技術：
目前，抗腫瘤化療新藥的研製與應用發展迅速，特別是取自於天然藥物經修飾、人工合成等方法研製的化療藥物不斷問市，如紫杉醇、多希紫杉醇、草酸鉑、健擇、異長春花鹼、開普拓、希羅達、阿里米塔等藥物，具有一定的治療效果。其中，中藥是我國獨特的天然藥物寶庫。
在本發明之前，醫藥界已經認識到單味中藥土鱉蟲具有抗腫瘤作用和療效，在體外對白血病細胞有抑制作用，但到底是土鱉蟲中的哪個具體成份能夠有效抑制腫瘤發展不清楚，對其抗腫瘤機理也認識不清。現階段的認識多數停留在推測上，有說是土鱉蟲中β-谷甾醇成份和以油酸為主的不飽和脂肪酸很有可能有抗癌作用，又一說土鱉蟲在治療體外肝癌、胃癌等方面具有抗突變及抗腫瘤功能。但這些推測和說法均缺乏理論依據和機理分析，更缺乏實驗證實。因而，就無法將其真正能夠抗腫瘤的有效成份提取、分離出來，研製專門治療抗腫瘤藥物，並實現產業化。

發明內容
本發明的目的就在於克服上述缺陷，分離、提取土鱉蟲中抗腫瘤的有效部位脂肪酸。
本發明的技術方案是從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其主要技術特徵在於從土鱉蟲中提取有效部位脂肪酸。
本發明的進一步技術方案是有效部位主要為不飽和脂肪酸。
本發明的優點和效果在於採用簡單的方法分離、提取到土鱉蟲中真正具有抗腫瘤作用和療效的脂肪酸，並經實驗證實具有廣譜殺瘤作用，對多種惡性腫瘤細胞具有較強的抑制作用。製備方法簡單，藥物成本低。
具體實施例方式
首先進行有機溶劑提取以無水乙醇或石油醚等有機溶劑回流提取，經皂化反應後得脂肪酸。具體過程及步驟取1000g，無水乙醇或石油醚等有機溶劑回流提取，得提取液；回收溶劑，得粗脂肪；還可以取1000g，超臨界提取得粗脂肪；再加無水乙醇或甲醇、KOH，熱回流，蒸乾溶劑，得固體物；然後水溶解，用少量乙醚萃取，取水層，加入HCL，調節PH值至酸性，乙醚萃取，取乙醚層；揮去溶劑，得粗脂肪酸；再進行柱層析法以矽膠等為吸附劑，用於分離脂肪酸；以石油醚、氯仿、甲醇、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和乙酸等有機溶劑及任何比例組合溶劑為洗脫劑進行層析分離，得到有效部位脂肪酸。
成份分析主要為7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸，該四種物質以單個至多個任意比例組合。
除含上述7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸外，還含有肉豆蔻酸、二十酸、油酸等。
細胞毒實驗體外實驗通過體外細胞毒實驗證明本發明所述的有效部位的有效性。
實驗用藥物本發明有效部位實驗方法採用四甲基偶氮唑藍(MTT)顯色法確定藥物濃度土鱉蟲有效部位脂肪酸在100μg/ml的劑量對人胃低分化腺癌細胞株BGC-823、腸癌細胞株LOVO和原發性肝癌細胞株HepG-II即有明顯的抑制作用，抑制率達80％以上。2-4小時即開始起作用，至24小時後達最大作用效果並該效果隨時間延長保持穩定。
權利要求
1.從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特徵在於從土鱉蟲中提取有效部位脂肪酸。
2.根據權利要求1所述的從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特徵在於有效部位主要為不飽和脂肪酸。
3.根據權利要求2所述的從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特徵在於有效部位為含有7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸。
全文摘要
本發明涉及一種從中藥土鱉蟲中分離、提取的抗腫瘤有效成分脂肪酸。本發明採用有機溶劑及柱層析法從土鱉蟲提取抗腫瘤有效成分脂肪酸且為不飽和脂肪酸，主要成分為7，十八碳烯酸、十六烷酸、9，十六碳烯酸、十八酸，可以單個至多個任意比例組合。解決了現有技術不知土鱉蟲中到底哪個成分具有殺腫瘤及機理所存在的盲目性，無法製成專門的抗腫瘤藥物的缺陷。經實驗證實，無毒性，具有廣譜殺瘤作用，對多種惡性腫瘤具有抑制作用和抗腫瘤、抗突變作用。本發明藥物成本低，可形成產業化。
文檔編號A61K35/64GK1709284SQ20051004066
公開日2005年12月21日 申請日期2005年6月23日 優先權日2005年6月23日
發明者劉寶瑞, 鄒璽, 錢曉萍 申請人:南京大學醫學院附屬鼓樓醫院