一種發光菌的培養基的製作方法
2023-06-04 10:15:36
一種發光菌的培養基的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種發光菌的培養基,該培養基每升中包含胰蛋白腖5~10g,牛肉浸膏5~10g,甘油2~4mL,磷酸二氫鉀0.3~1.5g,十二水合磷酸氫二鈉11~13g,氯化鈉21~35g。本發明還提供了一種利用上述培養基培養發光菌的方法,其用於培養發光菌時接種菌液體積是培養基體積的2%。該培養基可使發光菌在液體培養基中的菌含量可穩定超過1×108CFU/mL,有利於發光菌的研究應用及其凍乾粉的生產。且本發明提供的發光菌培養基成本低,有利於發光菌的推廣應用。
【專利說明】一種發光菌的培養基
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物【技術領域】,具體涉及一種發光菌培養基的製備,以及利用該培養基培養發光菌的方法。
【背景技術】
[0002]發光細菌是進行生物發光的一類細菌。其多數為海生,與發光浮遊生物同是引起海面發光的原因。發光菌形態雖多種多樣,但生理特性卻非常相似。一般對明膠不產生液化,分解蛋白質後不形成毒物,常寄生在各種動物體上引起「發光病」,即寄生發光。目前,國內常用的3種發光細菌為:明亮發光桿菌、費氏弧菌、青海弧菌。
[0003]其中,明亮發光桿菌是革蘭氏陰性菌,可在水質急性毒性的測定中所使用。費氏弧菌是一種生長在海洋中的革蘭氏陰性菌,普遍存在於海洋環境及海洋生物體中,是某些海洋魚類的致病菌。研究人員發現當菌群密度達到一定閾值時費氏弧菌會產生集體發光現象;後來的研究表明此生物發光現象是因為其自誘導劑的積累引起的;費氏弧菌通過該自誘導劑進行相互交流,啟動相關基因的表達,從而引起其表型的變化。任何對細胞代謝機制的抑制作用,如各種無機毒物與有機毒物,都會導致其發光的減少,所以費氏弧菌目前被普遍作為環境測試指標。青海弧菌能持續穩定地發射藍綠光(最大發射波長485nm),一旦遭遇有毒有害物質,很快會被抑制發光,其發光抑制程度與所受的有毒有害物質的毒性及濃度有對應關係,且它是一種淡水菌,所以被廣泛應用於飲用水監測中。
[0004]目前,市場上現存的發光菌的液體培養基成本較高,不利於發光菌的試驗研究及推廣應用。且對於發光菌的培養條件尚未有成熟的方案,致使發光菌的液體培養菌含量不穩定。
【發明內容】
[0005]針對現有技術的不足,本發明的一個目的是提供一種適於發光菌生長的培養基。
[0006]為了實現上述目的,本發明採用如下技術方案:
[0007]本發明提供的發光菌的培養基,其每升中包含胰蛋白腖4~10g,牛肉浸膏5~10g,甘油2~4mL,磷酸二氫鉀0.3~1.5g,十二水合磷酸氫二鈉11~13g,氯化鈉21~35g。
[0008]優選為,其每升中包含胰蛋白腖5g,牛肉浸膏7.5g,甘油3mL,磷酸二氫鉀lg,十二水合磷酸氫二鈉12.6g,氯化鈉30g。
[0009]本發明的另一個目的是提供了一種使用上述培養基培養發光菌的方法。
[0010]上述培養方法,包括以下步驟:取復甦好的菌液,按培養基體積的1.5%~3%接種到上述培養基中,25°C,180rpm培養18h。
[0011]優選為,上述培養方法,包括以下步驟:取復甦好的菌液,按培養基體積的2%接種到上述培養基中,25°C,180rpm培養18h。
[0012]上述方法還包括:將費氏弧菌的凍乾粉用3%NaCl溶液進行溶解,復甦lOmin,接種到上述液體培養基中,25°C,180rpm培養18h。
[0013]使用本發明提供的用於發光菌培養的培養基,以及使用本發明提供的方法培養發光菌後,可使發光菌在液體培養基中的菌含量可穩定超過I X 108CFU/mL,有利於發光菌的研究應用及其凍乾粉的生產。且本發明提供的發光菌培養基成本低,有效降低了發光菌的研究成本,有利於發光菌的推廣應用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1是本發明提供的培養基與對照組培養基培養菌液發光度的比較。
【具體實施方式】
[0015]以下實施例用於進一步說明本發明,但不應理解為對本發明的限制。在不背離本發明精神和實質的前提下,對本發明所作的修飾或者替換,均屬於本發明的範疇。
[0016]實施例1發光菌含菌量以及生產成本的對比試驗
[0017]製備不同配比的發光菌培養基,用於對比試驗,各實驗組的具體成分見表1:
[0018]表1:培養基的成分
[0019]
【權利要求】
1.一種發光菌的培養基,其特徵在於,其每升中包含胰蛋白腖4~10g,牛肉浸膏5~10g,甘油2~4mL,磷酸二氫鉀0.3~1.5g,十二水合磷酸氫二鈉11~13g,氯化鈉21~35g。
2.根據權利要求1所述的培養基,其特徵在於,其每升中包含胰蛋白腖5g,牛肉浸膏7.5g,甘油30mL,磷酸二氫鉀lg,十二水合磷酸氫二鈉12.6g,氯化鈉30g。
3.一種使用權利要求1或2所述的培養基培養發光菌的方法。
4.根據權利要求3所述的培養方法,其特徵在於,包括以下步驟:取復甦好的菌液,按培養基體積1.5%~3%的量接種到培養基中,250C,180rpm培養18h。
5.根據權利要求4所述的方法,其特徵在於,包括以下步驟:取復甦好的菌液,按培養基體積2%的量接種到培養基中,250C,180rpm培養18h。
6.根據權利要求4或5所述的方法,其特徵在於,還包括以下步驟:將費氏弧菌的凍乾粉用3%NaCl溶液進行溶解,復`蘇lOmin,接種到培養基中,25°C,180rpm培養18h。
【文檔編號】C12N1/20GK103484408SQ201310443440
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月25日 優先權日:2013年9月25日
【發明者】袁恆 申請人:北京尚洋東方環境科技股份有限公司