一株鎖擲孢酵母菌株及其在食品、飼料中的應用的製作方法
2023-06-04 20:34:36
專利名稱：一株鎖擲孢酵母菌株及其在食品、飼料中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種可作為普通食品或保健食品原料用的新資源，一種可作為飼料添加劑的富含蛋白、類胡蘿蔔素的酵母製品，可以溼菌體或幹菌粉形式應用。
背景技術：
提取類胡蘿蔔素的一個主要問題是使用有機溶劑可能對能對這些胡蘿蔔素成分造成破壞,並且除去溶劑也增加了成本。單細胞蛋白是現代飼料工業和食品工業中重要的蛋白來源。酵母是很好的單細胞蛋白來源。其胺基酸組成不亞於動物蛋白質，營養十分豐富，含多種必需胺基酸。微生物細胞中除含有蛋白質外，還含有豐富的碳水化合物以及脂類、維生素、礦物質。目前，我國很多地區都以小麥作為畜禽日糧的主要原料，但以小麥型日糧飼餵蛋雞會出現雞蛋蛋黃髮白的問題，影響雞蛋的感觀品質。以富含類胡蘿蔔素單細胞生物用於食品和飼料行業，潛力巨大。
發明內容
本發明涉及一種鎖擲孢酵母y7 (保藏單位:中國典型培養物保藏中心；保藏時間:2012年7月19 ;保藏地址:武漢市武昌珞珈山(武漢大學)，郵編為430072 ;保藏編號:CCTCC M 2012293，分類命名為:鎖擲孢酵母 y7，拉丁名-.Sporidiobolus pararoseus y7),及其菌粉製備方法，該菌粉安全無毒，富含類胡蘿蔔素，富含蛋白，有很好的營養作用，該菌粉可作為輔料增加掛麵蛋白和類胡蘿蔔素含量，按2%原料加入色澤較好。菌粉作為輔料加入雞飼料可提高雞蛋的感觀品質，提高類胡蘿蔔素含量。作為食品新資源和飼料原料有很好的應用價值。一株紅色鎖擲孢酵母parariaseiAs y7是由實驗室發明人自實驗室分離。產類胡蘿蔔素，菌體無毒能作為食品原料，飼料。所述的一株紅色鎖擲孢酵母51 pararoseus y7其特徵在於:
細胞卵球形，在LB，PSA培養基上生長良好，菌落粉紅色，表面光滑，扁平，邊緣整齊。所述的y7菌ITS序列: AACTTCTCAATTCTAACTTTGTGCATCTGTATTAATGGCGAGCAACTTCGGTTGTGAGCCTTCACTTACAAA
ACACTAGTCTATGAATGTAAAATTTTTATAACAAATAAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATG
AAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCATCTTGCG
CTCTCTGGTATTCCGGAGAGCATGTCTGTTTGAGTGTCATGAATTCTTCAACCCAATCTTTTCTTGTAATCGATTGG
TGTTTGGATTCTGAGCGTTGCTGGCGTTTGCCTAGCTCGTTCGTAATACATTAGCATCCCTAATACAAGTTTGGATT
GACTTGGCGTAATAGACTATTCGCTAAGGATTCGGTGGAAACATCGAGCCAACTTCATTAAGGAAGCTCCTAATTTA
AAAGTCTACCTTTTGATTAGATCTCAAATCAGGCAGGATTACCCGCTGAACTTAA
菌株ITS基因序列在NCBI數據為中分析比對，鑑定為鎖擲孢酵母。
所述的鎖擲孢酵母菌體y7生產方法包括:
在PSA (馬鈴薯蔗糖瓊脂)培養基上可產生紅色的類胡蘿蔔素，經PS液體發酵生成種子培養基，按5 %的接種量在同種培養基上培養(30°C，180rpm)五天後，收集菌液；離心後凍幹(或烘乾)後粉碎過80目篩，產生菌粉(類胡蘿蔔素含量22.4mg/kg，HPLC法，SIGMA標樣β-胡蘿蔔素)。菌粉無不良氣味。蛋白含量40-50%。 用PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)等培養基，或用發酵罐等培養方式生產也屬本權利要求範圍。所述的鎖擲孢酵母菌y7菌粉和菌發酵液，經小鼠急、亞慢性經口毒理實驗證明菌體無毒。急性實驗中灌胃5g/kg bw劑量，未見動物異常；亞慢性經口毒性試驗期內灌胃Ig/kg bw劑量,未見動物異常。所述的鎖擲孢酵母菌y7菌體和菌發酵液，按I g/kg bw劑量灌胃，經小鼠營養評價，小鼠遊泳耐力實驗，體重和耐力增加。所述的鎖擲孢酵母菌y7菌液或菌粉用於生產麵製品，其特徵在於:
所述的y7菌粉菌粉添加對麵粉品質的影響:應用粉質拉伸儀研究分析，3%添加量降低了麵團的粉質指數和拉伸特性指數。主要體現在:降低了麵團的穩定時間、拉伸能量、延伸度、拉伸阻力，麵團的粉質指數，增加了麵團的弱化度。但是2%及以下添加量(1%，1.5%未顯示)對麵粉粉質指數和拉伸特性指數影響不大。所述的y7菌粉菌粉添加掛麵感官品質的影響:經感官品質評分試驗，菌粉添加量為1.5%時，掛麵感官品質最佳。隨菌粉添加量的增加，麵條色澤加重，食味增強變濃，其他感官指標無明顯變化。掛麵在色澤食味方面應有該成份的屬性，但色澤不能太重，顏色太重反而造成食慾減退。因此添加量為1.5%較適宜。胡蘿蔔素掛麵在蒸煮過程中，色澤下降，這說明該β —胡蘿蔔素具有熱不穩定性。為了彌補蒸煮色澤損失，可適當增加菌粉添加量，經試驗，添加2.0 %比較適宜。所述的y7菌粉與其它如葡糖糖氧化酶、海藻酸鈉、複合磷酸鹽、食鹽等輔料和改良劑復配。經單因素預實驗後，再利用5因素4水平的正交試驗優化配方，結果表明，菌粉對掛麵品質影響極顯著，海藻酸鈉、食鹽對掛麵品質影響顯著，而葡萄糖氧化酶、複合磷酸鹽對掛麵品質影響不顯著，但其對掛麵感官品質具有不可忽略的改良作用。優化配方為:菌粉2%、食鹽2 %、海藻酸鈉0.09%、葡萄糖氧化酶0.9 X 10 —4%、複合磷酸鹽0.4%為配方，製作胡蘿蔔素掛麵並測定其理化指標。該配方製作胡蘿蔔素掛麵在理化指標上都及格，無彎折斷和熟斷條現象，烹調損失很低，僅為0.2%。因此，無論從感官品質還是理化指標方面，該配方胡蘿蔔素掛麵的品質都達到SB/T 10069-92標準要求。所述的y7菌粉和菌發酵液可用於雞飼料生產其特徵在於:
取菌粉按>1%的添加量與一般配合基礎飼料混合，攪拌混勻後餵產蛋雞，10天後，所產蛋與未加菌粉飼料餵雞產蛋相比，蛋黃內胡蘿蔔素含量增加顯著，蛋黃色澤明顯偏紅。飼料領域技術人員在不脫離本發明構思的前提下，所作其它技術參數優化，當屬本發明的保護範圍。
圖1 為鎖擲抱酵母菌 Sporidiobolus pararoseus y7 (保藏編號:CCTCC M2012293)光鏡下圖像(放大200倍)。
具體實施例方式實施例一:鎖擲孢酵母5: pararoseus y7用於富含胡蘿蔔素掛麵的研製。材料與試劑:
小麥粉:溼麵筋含量30.5% ；
菌粉:鎖擲酵母(又稱鎖擲孢酵母)菌株Sporidiobolus pararoseus y7經PS液體培養，離心收集菌體，烘乾粉碎過80目篩得乾粉(類胡蘿蔔素含量22.4mg/kg, HPLC法，SIGMA標樣盧一胡蘿蔔素)；
葡糖糖氧化酶；海藻酸鈉；複合磷酸鹽；食鹽。主要儀器:
壓面機；電子天平；電磁爐；燒杯:200mL。電子式粉質儀。試驗方法。菌粉對麵粉物理性質影響
按照GB/T 14614-2006小麥粉麵團的物理特性，吸水量和流變學特性的測定(粉質儀法)。掛麵的製作及感官評價方法
按照SB/T 10137-93麵條用小麥粉附錄A中的方法進行。掛麵的理論指標測定方法
按照SB/T 10068掛麵中第四章規定的方法測定。結果與討論。
菌粉對麵粉品質的影響
應用粉質拉伸儀研究分析了菌粉對麵團流變性的影響。結果表明，3%添加量降低了麵團的粉質指數和拉伸特性指數。主要體現在:降低了麵團的穩定時間、拉伸能量、延伸度、拉伸阻力，麵團的粉質指數，增加了麵團的弱化度。但是2%及以下添加量(1%，1.5%未顯示)對麵粉粉質指數和拉伸特性指數影響不大。單一輔料與改良劑對掛麵品質的影響。菌粉對掛麵感官品質的影響:
在麵粉中分別添加0-2.5%的菌粉，感官品質評分結果見表I所示。菌粉對掛麵感官品質的影響
權利要求
1.株紅色鎖擲孢酵母5)9ο_τΥ￡//οΑο7 5.pararoseus y7是由發明人自實驗室分離；產類胡蘿蔔素，菌體無毒能作為食品原料，飼料。
2.據權利I所述的一株紅色鎖擲孢酵母5:pararoseus y7其特徵在於: a.細胞卵球形，在LB，PSA培養基上生長良好，菌落粉紅色，表面光滑，扁平，邊緣整齊； b.1TS序列:AACTTCTCAATTCTAACTTTGTGCATCTGTATTAATGGCGAGCAACTTCGGTTGTGAGCCTTCACTTACAAAACACTAGTCTATGAATGTAAAATTTTTATAACAAATAAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCATCTTGCGCTCTCTGGTATTCCGGAGAGCATGTCTGTTTGAGTGTCATGAATTCTTCAACCCAATCTTTTCTTGTAATCGATTGGTGTTTGGATTCTGAGCGTTGCTGGCGTTTGCCTAGCTCGTTCGTAATACATTAGCATCCCTAATACAAGTTTGGATTGACTTGGCGTAATAGACTATTCGCTAAGGATTCGGTGGAAACATCGAGCCAACTTCATTAAGGAAGCTCCTAATTTAAAAGTCTACCTTTTGATTAGATCTCAAATCAGGCAGGATTACCCGCTGAACTTAAo
3.據權利要求1所述的菌體生產方法包括: a.在PSA(馬鈴薯蔗糖瓊脂)培養基上可產生紅色的類胡蘿蔔素，經PS液體發酵生成種子培養基，按5%的接種量在同種培養基上培養(30°C，180rpm)五天後，收集菌液；離心後凍幹(或烘乾)後粉碎過80目篩，產生菌粉(類胡蘿蔔素含量22.4mg/kg，HPLC法，SIGMA標樣β —胡蘿蔔素)；菌粉無不良氣味；蛋白含量40-50%; b.用PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)等培養基，或用發酵罐等培養方式生產也屬本權利要求範圍。
4.據權利要求1所述的菌體和菌發酵液，經小鼠急、亞慢性經口毒理實驗證明菌體無毒；急性實驗中灌胃5g/kg bw劑量，未見動物異常；亞慢性經口毒性試驗期內灌胃I g/kg bw劑量，未見動物異常。
5.據權利要求1所述的菌體和菌發酵液，按Ig/kg bw劑量灌胃，經小鼠營養評價，小鼠遊泳耐力實驗，體重和耐力增加。
6.據權利I所述利用菌體(菌液或菌粉)生產麵製品，其特徵在於: a.菌粉添加對麵粉品質的影響:2%及以下添加量對麵粉粉質指數和拉伸特性指數影響不大； b.菌粉添加掛麵感官品質的影響:添加2.0%比較適宜； c.與其它如葡糖糖氧化酶、海藻酸鈉、複合磷酸鹽、食鹽等輔料和改良劑復配；優化配方為:菌粉2 %、食鹽2%、海藻酸鈉0.09%、葡萄糖氧化酶0.9X10 —4%、複合磷酸鹽0.4%為配方，製作胡蘿蔔素掛麵並測定其理化指標；該配方胡蘿蔔素掛麵的品質達到SB/T 10069-92標準要求。
7.據權利要求1所述的菌體和菌發酵液可用於雞飼料生產其特徵在於:食添加菌粉雞所產蛋與未加菌粉飼料餵雞產蛋相比，蛋黃內胡蘿蔔素含量增加顯著，蛋黃色澤明顯偏紅。
全文摘要
本發明涉及一種鎖擲孢酵母菌株，及其菌粉製備方法，該菌粉安全無毒，富含類胡蘿蔔素，富含蛋白，有很好的營養作用，該菌粉可作為輔料增加掛麵蛋白和類胡蘿蔔素含量，按２%原料加入色澤較好。菌粉作為輔料加入雞飼料可提高雞蛋的感觀品質，提高類胡蘿蔔素含量。作為食品新資源和飼料原料有很好的應用價值。
文檔編號A23L1/16GK103087930SQ20121031215
公開日2013年5月8日 申請日期2012年8月29日 優先權日2012年8月29日
發明者王飛, 羅海瀾, 豆康寧 申請人:漯河醫學高等專科學校