一種紫薯花色苷的分級方法與流程
2023-05-28 13:04:26 3
一種紫薯花色苷的分級方法一、技術領域本發明為一種紫薯花色苷的分級方法，屬於農產品深加工技術領域。二、
背景技術：
國內外關於紫薯的研究表明，紫薯富含花色苷類物質，具有較強的降血壓、降血脂、抗突變、抗氧化、抗腫瘤等生理活性和功能。目前已從紫薯中鑑定出20多種花色苷，包括無醯基花色苷、單醯基花色苷和雙醯基花色苷，紫薯花色苷絕大多數為醯基花色苷。花色苷作為一種安全無毒的天然食用色素在食品、保健品、醫藥、化妝品等方面具有很大的開發潛力，但是天然色素易受各種條件的影響而變得不穩定，這就限制了其在加工和儲藏過程中的廣泛應用。影響其不穩定的主要內部因素是分子結構，醯基化可提高花色苷穩定性和呈色效果已得到學術界公認，雙醯化花色苷比單醯化花色苷更穩定。將紫薯花色苷根據醯基化程度進行分級，獲得不同醯基化度的花色苷組分，除了為醯基花色苷功能性研究方面提供有用的材料外，還可以獲得穩定性不同的天然色素原料，並根據需要進行應用，因此，高效的花色苷分級方法具有重要的理論價值和現實意義。三、
技術實現要素：
技術問題天然花色苷分離常見的方法如高效液相色譜法等存在的主要問題是樣品製備量小，只能進行分析檢測，而且成本較高。本發明主要針對目前不同醯基化度的紫薯花色苷無法實現大量高效分離的技術難題，通過簡單的多次柱層析分離方法，將初步純化的紫薯花色苷根據醯基化度不同進行分級，分別獲得無醯基花色苷、單醯基花色苷和雙醯基花色苷組分。技術方案本發明提供的一種紫薯花色苷的分級方法，包括：1)紫薯花色苷粗提物的製備：將紫薯清洗後切成1釐米小塊，加入2倍重量的95％食用酒精，進行高速打漿，60℃保溫1小時，冷卻，離心。濾液真空濃縮至原重量的十分之一。2)紫薯花色苷的純化：將粗提液上大孔樹脂柱，樹脂型號為AB-8，上樣液量為1倍樹脂柱體積，上樣流速為1倍柱體積/小時，然後用去離子水衝柱，當流出液澄清後，以體積比70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時。將洗脫液真空濃縮至原體積的的五分之一，加入2倍體積的乙酸乙酯萃取脂溶性雜質，收集水相既為純化後的紫薯花色苷。3)花色苷的分級：將萃取後的水相立刻上聚醯胺樹脂柱，上樣量為0.5倍樹脂柱體積，上樣流速為1倍柱體積/小時，然後用去離子水衝柱，收集有色部分流出液，為無醯基紫薯花色苷組分。再用以體積比30％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時，收集洗脫液既為單醯基紫薯花色苷組分。再以體積比70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時，收集洗脫液既為雙醯基紫薯花色苷組分。有益效果1.獲得了無醯基花色苷、單醯基花色苷和雙醯基花色苷3個組分，具有不同的特性，可作為花色苷理論研究的好材料，也可作為天然食品色素，根據穩定性要求的不同應用於不同領域。2.採用柱層析方法和價格低廉的填料，成本低，適合大量生產，工業化前景好。3.使用食用酒精為溶劑和洗脫劑，安全可靠，產品可作為食品添加劑。四、附圖說明使用液相色譜-質譜連用技術對本技術方案獲得的無醯基花色苷、單醯基花色苷和雙醯基花色苷3個組分的主要花色苷成分進行了鑑定，確定了主要花色苷成分的分子量，並參考相關文獻確定了主要成分，獲得3個組分的HPLC-MS譜圖，詳見附圖。圖1：無醯基紫薯花色苷組分HPLC譜圖；圖1-1：無醯基紫薯花色苷組分1號峰MS圖；圖1-2無醯基紫薯花色苷組分2號峰MS圖；圖2單醯基紫薯花色苷組分HPLC譜圖；圖2-1單醯基紫薯花色苷組分1號峰MS圖；圖2-2單醯基紫薯花色苷組分2號峰MS圖；圖2-3單醯基紫薯花色苷組分3號峰MS圖；圖2-4單醯基紫薯花色苷組分4號峰MS圖；圖2-5單醯基紫薯花色苷組分5號峰MS圖；圖2-6單醯基紫薯花色苷組分6號峰MS圖；圖3雙醯基紫薯花色苷組分HPLC譜圖；圖3-1雙醯基紫薯花色苷組分1號峰MS圖；圖3-2雙醯基紫薯花色苷組分2號峰MS圖；圖3-3雙醯基紫薯花色苷組分3號峰MS圖；圖3-4雙醯基紫薯花色苷組分4號峰MS圖。五、具體實施方式將紫薯清洗後切成1釐米小塊，加入2倍重量的95％食用酒精，進行高速打漿，60℃保溫1小時，冷卻，離心。濾液真空濃縮至原重量的十分之一。將粗提液上大孔樹脂柱，樹脂型號為AB-8，上樣液量為1倍樹脂柱體積，上樣流速為1倍柱體積/小時，然後用去離子水衝柱，當流出液澄清後，以體積比70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時。將洗脫液真空濃縮至原體積的的五分之一，加入2倍體積的乙酸乙酯萃取脂溶性雜質，收集水相既為純化後的紫薯花色苷。將萃取後的水相立刻上聚醯胺樹脂柱，上樣量為0.5倍樹脂柱體積，上樣流速為1倍柱體積/小時，然後用去離子水衝柱，收集有色部分流出液，為無醯基紫薯花色苷組分。再用以體積比30％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時，收集洗脫液既為單醯基紫薯花色苷組分。再以體積比70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，洗脫液為2～2.5倍樹脂柱體積，流速為1倍柱體積/小時，收集洗脫液既為雙醯基紫薯花色苷組分。實施例將1千克紫薯清洗後切成1釐米小塊，加入2升95％食用酒精，進行高速打漿，60℃保溫1小時，冷卻，離心。濾液真空濃縮至約300毫升既為粗提液，將粗提液上500mm×50mm大孔樹脂柱，樹脂型號為AB-8，上樣流速為300毫升/小時，然後用去離子水衝柱，當流出液澄清後，以750毫升70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，流速為300毫升/小時。將洗脫液真空濃縮至150毫升，加入300毫升乙酸乙酯萃取脂溶性雜質，收集水相既為純化後的紫薯花色苷。將萃取後的水相150毫升立刻上500mm×50mm聚醯胺樹脂柱，上樣流速為300毫升/小時，然後用500毫升去離子水衝柱，收集有色部分流出液，為無醯基紫薯花色苷組分。再用750毫升體積比30％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，流速為300毫升/小時，收集洗脫液既為單醯基紫薯花色苷組分。再以750毫升體積比70％的乙醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，流速為300毫升/小時，收集洗脫液既為雙醯基紫薯花色苷組分。