一種定量測量細胞鋪展速率的方法

2023-06-13 08:46:26

專利名稱：一種定量測量細胞鋪展速率的方法
技術領域：
本發明屬於生物技術領域，是用於測量貼壁細胞的鋪展速率以及各種藥物對細胞鋪展速率的影響的方法。
背景技術：
細胞鋪展是貼壁細胞的重要生理活動或功能之一，許多人體生理活動或疾病與細胞的鋪展有關。例如，血管內皮細胞通過細胞的鋪展來構建血管內壁或者修補破損的血管內皮層，因此，內皮細胞鋪展的改變往往與心血管疾病的產生、發展和腫瘤轉移等有關，而藥物對細胞鋪展的影響也必然是評估藥物療效的體外細胞試驗中的重要指標之一。遺憾的是，目前對細胞鋪展機制，特別是藥物對細胞鋪展的影響的研究，還不是很清楚，其中細胞鋪展速率的精確、定量測量方法的缺乏就是主要原因之一。目前，文獻報導的定量測量細胞鋪展的方法只有一個將細胞鋪展的狀態(只是根據細胞的形態)劃分為不鋪展、半鋪展和完全鋪展三種，再計算出處於這三種狀態的細胞的數量或數量百分比。然而，這種定量測定細胞鋪展的方法非常粗糙首先，確定不鋪展、半鋪展和完全鋪展三種狀態具有非常大的主觀性，沒有一個可定量的標準，畢竟每種細胞甚至每個單獨的細胞，它們完全鋪展時的形態或貼壁面積都可能不一樣，要判斷一個細胞是否完全鋪展是很困難的，即由此會產生一定的偏差。其次，半鋪展狀態其實包含了很多個中間階段的狀態，因而，只將細胞鋪展劃分為三種狀態無法定量比較細胞鋪展隨著時間的變化。 此外，通過計算細胞數量或數量百分比來定量細胞鋪展是間接的方法，而沒有定量測量鋪展速率來得直接。

發明內容
本發明的目的是提供一種簡單、快速、準確、定量地測定細胞鋪展速率的方法，以取代已有的傳統定量測量方法。本發明是通過以下技術方案實現的。將處於懸浮狀態的貼壁細胞種植在培養孔或板上，在細胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設備，捕獲大量細胞在不同時間點(Tn)的形貌圖，測量出每個細胞的貼壁面積(A)， 並計算出所有細胞在每個時間段的面積變化速率，此即被定義為細胞鋪展速率。細胞鋪展速率計算公式如下
權利要求
1. 一種定量測量細胞鋪展速率的方法，其特徵是將處於懸浮狀態的貼壁細胞種植在培養孔或板上，在細胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設備，捕獲細胞在不同時間點的形貌圖， 測量出每個細胞的貼壁面積，並按下式計算出細胞鋪展速率
全文摘要
一種定量測量細胞鋪展速率的方法，其特徵是將處於懸浮狀態的貼壁細胞種植在培養孔或板上，在細胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設備，捕獲細胞在不同時間點的形貌圖，測量出每個細胞的貼壁面積，並按Rs=(An+1-An)/(Tn+1-Tn)計算出細胞鋪展速率。本發明以細胞的貼壁面積為標準，根據細胞鋪展所用時間和貼壁面積的變化而計算出來的鋪展速率，解決了傳統方法的缺點，比傳統的細胞鋪展測量方法要更加精確，且需測量設備簡單，計算方法同樣簡單、可行，也易於整合到測量設備中去。
文檔編號C12Q1/02GK102253191SQ20111017581
公開日2011年11月23日 申請日期2011年6月28日 優先權日2011年6月28日
發明者曾芳發, 邵文祥, 陳勇, 黃潔 申請人:南昌大學