一種除皺祛疤的注射劑及其製備方法
2023-06-13 05:43:46 1
專利名稱：一種除皺祛疤的注射劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種除皺祛疤的注射劑及其製備方法，屬於組織工程領域。
背景技術：
二十年前人們採用注射牛的膠原蛋白來治療皺紋和疤痕，但其會出現過敏反應，同時會被組織較快的吸收，只能維持幾個月的時間。為了克服這種過敏反應的缺點，有些醫院採用自體皮製成膠原蛋白來注射，結果是製備過程需要大量的皮膚，而注射後仍會被組織很快的吸收。近年來許多人採用肉毒素注射來治療皺紋和疤痕，其結果也只能維持比較短的時間，並且治療後治療者的表情極不自然。
發明內容
為了克服這些產品的不足之處，本發明的目的是提供一種高效、長久、愈後自然的除皺祛疤的注射劑。
本注射劑採用了人的自體皮膚經過消化分離出真皮成纖維細胞，進行體外擴增，然後注射到治療者的皺紋或疤痕部位，這些細胞在其注射部位產生膠原組織，消除皺紋和填平疤痕。
本發明的另一個目的是提供這種注射劑的製備方法。
為實現上述目的，本發明採用以下技術方案一種除皺祛疤的注射劑，由1000萬-4000萬個真皮成纖維細胞和2-4ml濃度5％的葡萄糖注射液組成。
所述的真皮成纖維細胞是將來源於患者自體的真皮成纖維細胞經體外擴增、培養得到的。
一種除皺祛疤的注射劑的製備方法，是將來源於患者自體的真皮成纖維細胞在體外擴增培養，再按照每1000萬-4000萬個真皮成纖維細胞加入2-4ml濃度5％的葡萄糖注射液，製成懸濁液。
本發明是一種用患者自體皮膚細胞在體外經過增殖、培養後再次注射到皺紋、疤痕部位進行修復的除皺祛疤產品，該產品在這些部位產生膠原蛋白從而使溝紋和疤痕長平，在消除皺紋和疤痕同時又能改善局部皮膚的環境，起到年輕美顏的作用。
本發明的優點本發明使用的生物材料取自患者自體，無排斥反應，無副作用，治療者用過後美容療效顯著，表情自然，且效果作用持久，可維持數年。
下面
具體實施例方式
對本發明作進一步說明。
具體實施例方式
實施例1、除皺祛疤的注射劑的製備一.自體健康細胞的提取用70％的酒精消毒耳後或胳膊內側，然後用10％的利多卡因和十萬分之一的腎上腺素進行局部表面麻醉。用取皮器將4平方毫米的表皮和真皮組織取下，放入組織保存液(DMEM和10％胎牛血清，美國Hyclone公司)中，將創傷部位做一針縫合，創可貼覆蓋。
二.細胞懸液的製備1.組織消化(Sanya CO2培養箱)將皮膚組織塊放置於35mm培養皿中加入2ml濃度為0.05％的胰酶/EDTA液，37℃，10分鐘；DMEM+10％FBS培養液終止。
2.細胞分離將消化後的組織塊剪碎並用吸管打散。
3.離心吹散後的細胞收集至離心管中，Backman公司控溫離心機，25℃，1000轉/min，離心5分鐘，棄去上清液。
4.原代細胞培養在離心管中加入加1ml低血清真皮細胞培養液(Sigma公司，美國)吹懸，接種入1×35mm培養皿；Sanya CO2培養箱，37℃，5％ CO2，進行培養。
5.傳代細胞培養每隔2-3天換液1次，當細胞達到50-70％匯集細胞後傳代。
6.配製注射劑在體外傳代至第4-6周後的真皮成纖維細胞，按每1000萬-4000萬個成纖維細胞加入2-4ml濃度為5％的葡萄糖注射液，配製成懸濁液。
三.產品檢測1.病毒檢測將皮膚組織進行培養四周後，取1ml含有細胞的培養液送北京傳染病醫院進行HIV和肝炎病毒的檢驗，確定此為無病毒細胞。
2.免疫反應測試第四周將0.1ml細胞懸浮液對受術者進行皮試(同青黴素皮試方法)，以確保無免疫反應。
3.成品檢測1)外觀本品為淡白色混懸液。
2)無菌試驗按《中國生物製品規程》(2000版)通則《生物製品無菌試驗規程》A/B項進行，結果符合無菌要求。
產品的儲存和運輸應在2℃-10℃、陰涼、乾燥、清潔、避免陽光直射、無腐蝕性氣體、無重壓的環境中進行。
實施例2、臨床報告一.病例標準(病例數28例)1.納入標準年齡在55歲以下(包括55歲)；皺紋者為額頭、眼周、口周皺紋；疤痕者為粉刺、創傷疤痕(大小範圍無要求)。
2.排除標準年齡在55歲以上患者；有自身免疫性疾病；有慢性皮膚病者；有傳染病者。
二.製備注射劑依照實施例1的方法進行。
三.治療1.患者術前檢查血尿便常規、心電圖、肝腎功能、HIV、HbsAg。
2.將注射部位用70％的酒精消毒，局部注射1％的利多卡因，或者表皮用2.5％利多卡因和2.5％丙氨卡因軟膏麻醉。
3.將1.5ml細胞懸液吸入3ml的注射器中備用。
4.取2.2cm長的4.5號針頭，採用多點斜面(針頭與皮膚的角度20°-45°)將細胞懸液注入到真皮層的上層與中層，每個注射部位選取15-20點，每點注射細胞懸液0.05-0.1ml。注射時應將注射部位表皮拉緊，使其發白，注射時應使注射部位留有彌散空間。對皺紋或疤痕部全部注射，注射完後用冰袋外敷2小時。
術後24小時內注射局部可能有輕度腫脹、麻木等感覺，一般無其它的局部和全身反應。
療程一般皺紋注射2次，大的皺紋或瘢痕注射三次，每次注射間隔2-4周。
四、術後觀察、調護1.手術後，用冰袋敷注射處2小時。
2.觀察局部及全身的情況。
3.每天二次口服維生素C(每次200mg，每天共400mg)，或者局部搽含有維生素C的面霜，約6個月。
4.術後3天內防曝曬及慎用刺激性化妝品。
五.療效分析經過對28例的病例分析，其中一次注射的病例有20例，兩次注射的有8例，觀察時間6個月，結果為病人我感覺滿意的有24例(其滿意率為85.7％)，其皺紋、疤痕明顯消失，皮膚基質狀況明顯得到改善。
其中有個別治療者至今已觀察二年，其皺紋、疤痕已完全消失，皮膚光滑而富有彈性。
權利要求
1.一種祛皺除疤的注射劑，其特徵在於該注射劑由1000萬-4000萬個真皮成纖維細胞和2-4ml濃度5％的葡萄糖注射液組成。
2.根據權利要求1所述的除皺祛疤的注射劑，其特徵在於所述的真皮成纖維細胞是由來源於患者自體的真皮成纖維細胞經體外擴增、培養得到的。
3.一種祛皺除疤的注射劑的製備方法，其特徵在於該方法是將來源於患者自體的真皮成纖維細胞在體外擴增和培養，再按照每1000萬-4000萬個真皮成纖維細胞加入2-4ml濃度5％的葡萄糖注射液，製成懸濁液。
全文摘要
本發明涉及了一種祛皺除疤的注射液及其製備方法，屬於組織工程領域。該注射劑由1000萬－4000萬個真皮成纖維細胞和2－4ml濃度5％的葡萄糖注射液組成。其製備方法是將來源於患者自體的真皮成纖維細胞經體外擴增培養，再按照每1000萬－4000萬個真皮成纖維細胞，加入2－4ml濃度5％的葡萄糖注射液，製成懸濁液。本發明的優點是使用的生物材料取自患者自體，無排斥反應，無副作用，治療者用過後美容療效顯著，表情自然，且效果作用持久，可維持數年。
文檔編號A61K45/00GK1486702SQ0315583
公開日2004年4月7日 申請日期2003年8月25日 優先權日2003年8月25日
發明者韓斌, 韓 斌 申請人:北京以嶺生物工程有限公司