檢測中藥注射液中高分子量物質的方法

2023-06-02 01:50:56 1

專利名稱：檢測中藥注射液中高分子量物質的方法
技術領域：
本發明屬於中藥檢測技術領域，具體說是涉及一種檢測中藥注射液中高分子量物質的方法。
背景技術：
含有高分子量物質的中藥注射液產品，從安全性角度考慮，患者在應用時需要進行皮試試驗。但是皮試試驗僅能對速髮型I型變態反應有預測作用，且陽性符合度僅30%， 即使皮試試驗呈陰性也不能說明以後不發生過敏反應，這是皮試試驗無法預測的。因此，為了確保臨床用藥的安全有效，對中藥注射液產品中高分子量物質的含量進行檢測，對可能帶入的高分子量物質進行有效地監控，從源頭上控制臨床過敏反應的發生，既可以節約寶貴的臨床急救時間，同時也增加了臨床醫護人員與患者的便利性，減輕了患者的用藥痛苦， 具有非常重要的意義。

發明內容
本發明的目的在於克服現有技術中的缺陷，提供一種簡便易行、耗費少、時間短、 準確性和重現性都很好的檢測中藥注射液中高分子量物質的凝膠色譜檢測方法。本發明的目的是通過以下方案來實現的一種檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，該方法包括下列步驟a、對照溶液的製備取胸腺素α、人生長激素釋放抑制因子2種溶液各^il,置於 25ml容量瓶中，加水稀釋並定容至刻度；再取上述各容量瓶中溶液2. 5ml，分別用量瓶定容至25ml，即得對照溶液；b、供試品溶液的製備取供試品中藥注射液30ml加入超濾離心管中，在6000r/ min下離心lOmin，取殘留物定容至Iml即得供試品溶液；c、檢測分別精密吸取供試品溶液和對照溶液注入高效液相色譜儀，按照高效液相色譜法測定各溶液的色譜，記錄供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖，測定供試品溶液中分子量大於對照溶液中高分子量物質的物質的含量作為供試品溶液中高分子量物質的
含量；d、測量最低檢出限取對照溶液分別依次進樣20μ 1、15μ 1、10μ 1，可發現在進樣ΙΟμΙ核糖核酸酶A的峰高與基線噪音的比例約為4 1，即得最低檢出限為0.07yg。上述步驟中高效液相色譜的條件為色譜柱為凝膠色譜柱TSK G2000 Sffxl柱；流動相為乙腈-0.83%三氟乙酸溶液GO 60)；檢測波長為214土 Inm;流速0.70 0.85ml/ min。所述供試品溶液色譜圖中，各個峰的保留時間均大於對照溶液主峰的保留時間。本發明的優點在於本發明簡便易行、耗費少、時間短、準確性和重現性都很好，可以確保臨床用藥的安全有效，對中藥注射液產品中高分子量物質的含量進行檢測，對可能帶入的高分子量物質進行有效地監控，從源頭上控制臨床過敏反應的發生，既可以節約寶貴的臨床急救時間，同時也增加了臨床醫護人員與患者的便利性，減輕了患者的用藥痛苦， 具有非常重要的意義。本發明採用TSK G2000 SWxl型凝膠柱對中藥注射液中的高分子物質進行檢測，結果在進樣體積20 μ 1，檢出限為0. 08μ g下未能檢出大分子物質，說明本發明建立了一套完整的高分子物質檢測方法。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明做進一步說明。實施例1 一種檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，該方法包括下列步驟a、 對照溶液的製備取核糖核酸酶A、人胰島素、胸腺素α、人生長激素釋放抑制因子4種溶液各Iml，置於25ml容量瓶中，加水稀釋並定容至刻度；再取上述各容量瓶中溶液2. 5ml，分別用量瓶定容至25ml，即得對照溶液；b、供試品溶液的製備取供試品中藥注射液20ml加入超濾離心管中，在6000r/min下離心lOmin，取殘留物定容至Iml即得供試品溶液；C、檢測 分別精密吸取供試品溶液和對照溶液注入高效液相色譜儀，按照高效液相色譜法測定各溶液的色譜，記錄供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖，測定供試品溶液中分子量大於對照溶液中高分子量物質的物質的含量作為供試品溶液中高分子量物質的含量；d、測量最低檢出限取對照溶液分別依次進樣25μ 1、20μ 1、15μ 1、10μ 1、5μ 1，可發現在進樣10 μ 1核糖核酸酶A的峰高與基線噪音的比例約為3 1，即得最低檢出限為0.04yg。上述步驟中高效液相色譜的條件為色譜柱為凝膠色譜柱TSK G2000SWxl柱；流動相為乙腈-0.83%三氟乙酸溶液GO 60)；檢測波長為214 土 Inm ；流速0. 70 0. 75ml/min ；所述供試品溶液色譜圖中，各個峰的保留時間均大於對照溶液主峰的保留時間。表1為最低檢出限中的各對照出峰時間及其分子量表1各對照品分子量及出峰時間
對照品名稱分子量(D)IgM出峰時間(min)胸腺素α31083.49213.033人生長激素釋放抑制因子16383. 21413.589 綜上所述本實施例不過是本發明的優選實施方案，不可理解為對本發明保護範圍的限定，對於該領域的技術工作人員根據本發明本實施例所做的不超出本發明技術方案的調整和改動，應該認為落在本發明的保護範圍內。
權利要求
1.檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，其特徵在於該方法包括下列步驟a、對照溶液的製備取胸腺素α、人生長激素釋放抑制因子2種溶液各anl，置於25ml容量瓶中，加水稀釋並定容至刻度；再取上述各容量瓶中溶液2. 5ml，分別用量瓶定容至25ml，即得對照溶液；b、供試品溶液的製備取供試品中藥注射液30ml加入超濾離心管中，在6000r/min下離心lOmin，取殘留物定容至lml即得供試品溶液；C、檢測分別精密吸取供試品溶液和對照溶液注入高效液相色譜儀，按照高效液相色譜法測定各溶液的色譜，記錄供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖，測定供試品溶液中分子量大於對照溶液中高分子量物質的物質的含量作為供試品溶液中高分子量物質的含量；d、測量最低檢出限取對照溶液分別依次進樣20 μ 1、15 μ 1、10 μ 1，可發現在進樣10 μ 1核糖核酸酶A的峰高與基線噪音的比例約為4 1，即得最低檢出限為0.07 μ g。
2.根據權利要求1所述的檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，其特徵在於上述步驟中高效液相色譜的條件為色譜柱為凝膠色譜柱TSK 62000Sffxl柱；流動相為乙腈-O. 83%三氟乙酸溶液(40 60)；檢測波長為214 土 Inm ；流速0. 70 0. 85ml/min。
3.根據權利要求1或2所述的檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，其特徵在於 所述供試品溶液色譜圖中，各個峰的保留時間均大於對照溶液主峰的保留時間。
全文摘要
檢測中藥注射液中高分子量物質的方法，該方法包括對照溶液的製備取溶液加水稀釋並定容至刻度得到對照溶液；供試品溶液的製備取供試品中藥注射液加入超濾離心管中離心，取殘留物定容得到供試品溶液；檢測分別精密吸取供試品溶液和對照溶液，注入高效液相色譜儀，按照高效液相色譜法測定，記錄供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖，測定分子量大於對照溶液的物質的含量作為中藥注射液高分子量物質含量，最後測量最低檢出限。本發明的方法對中藥注射液產品中的高分子量物質進行檢測，對可能帶入的高分子量物質進行有效地監控，具有非常重要的意義。
文檔編號G01N30/02GK102411033SQ20101028997
公開日2012年4月11日 申請日期2010年9月25日 優先權日2010年9月25日
發明者張恆 申請人:張恆