一種綠茶多糖的純化方法

2023-06-03 21:25:01 2

專利名稱：一種綠茶多糖的純化方法
技術領域：
本發明提供一種綠茶多糖的純化方法。
背景技術：
綠茶及其提取物具有消除自由基、抗氧化等多種生物活性。茶多糖是從茶葉中提取的與蛋白質結合在一起的酸性多糖或酸性糖蛋白，是茶葉中的重要生理活性成分之一。國內外學者對茶葉所含的多糖類複合物進行了大量研究，發現茶多糖具有增加機體免疫能力、降血糖、降血脂、減少動脈粥樣硬化、抗凝血、抗氧化、抗輻射等作用。本發明提供了一種茶多糖粗提物經過陰離子交換劑DEAE C-52纖維素柱層析、 Sephadex G-100凝膠柱層析純化茶多糖的方法，並對其純度和性質進行紫外全波段掃描和紅外光譜分析。

發明內容
本發明的目的是要提供一種綠茶多糖的純化方法。本發明是這樣實現的茶多糖粗提物經DEAE C-52纖維素柱層析，0. 1 0. 5mol/ L氯化鈉溶液進行梯度洗脫，分部收集，跟蹤檢測多糖含量，記錄數據並繪製洗脫曲線。收集合併各峰管，三倍體積無水乙醇沉澱過夜，離心，溶解後上kphadexG-100凝膠柱層析， 0. lmol/L氯化鈉溶液洗脫，分部收集，跟蹤檢測多糖含量，記錄數據並繪製洗脫曲線。收集合併各峰管，低溫去離子水透析48小時，凍幹，進行紫外光譜和紅外光譜分析。


圖1茶多糖經DEAE C_52纖維素柱的洗脫曲線圖2茶多糖的kphadex G-100凝膠柱層析洗脫曲線圖3茶多糖的紫外全波段掃描4茶多糖的紅外光譜圖
具體實施例方式取IOOmg茶多糖粗提物，溶解於IOmL 0. lmol/L氯化鈉溶液中， 超聲25min (35°C，80W)，IOOOOrpm 4°C冷凍離心20min，得到的澄清溶液上DEAE C-52纖維素柱，用0. 1 0. 5mol/L氯化鈉溶液進行梯度洗脫，洗脫液流速為60mL/h，分部收集，每管6mL，硫酸-苯酚法跟蹤檢測G90nm)，記錄數據並繪製洗脫曲線。收集合併各峰管，三倍體積無水乙醇沉澱過夜，離心，以15mL 0. lmol/L氯化鈉溶液完全溶解後，取上清液5mL 上S印hadexG-100凝膠柱，0. lmol/L氯化鈉溶液洗脫，洗脫液流速為30mL/h，分部收集，每管3mL，硫酸-苯酚法跟蹤檢測G90nm)，記錄數據並繪製洗脫曲線。收集合併各峰管，低溫去離子水透析48小時，凍幹。進行紫外全波段掃描(190-400nm)，和KBr壓片紅外掃描 (500-4000(^1)。
權利要求
1.一種綠茶多糖的純化方法，其特徵在於茶多糖粗提物經過DEAE C-52纖維素柱和 Sephadex G-100凝膠柱層析，得到純化後的茶多糖，紫外全波段掃描不含核酸或蛋白質等其他組分，紅外圖譜顯示，在500-4000(3!^1區具有多糖類物質的一般特徵吸收峰。
2.根據權利要求1所述的一種綠茶多糖的純化方法，其特徵在於粗茶多糖上DEAE C-52纖維素柱，用0. 1-0. 5mol/L的氯化鈉梯度洗脫後，第10管出峰，收集得到的洗脫液，上 Sephadex G-100凝膠柱，第28管出峰，峰形呈單一對稱。
3.根據權利要求2所述的一種綠茶多糖的純化方法，所獲得的茶多糖紫外全波段掃描顯示在200nm處有一明顯的吸收峰，而在^Onm，280nm等處均無吸收。
4.根據權利要求2所述的一種綠茶多糖的純化方法，所獲得的茶多糖紅外光譜圖顯示在500-4000(^-1區都具有多糖類物質的一般特徵吸收峰，如HMcnT1處的甲氧酯基或 0-乙醯基的-C = O的伸縮振動，1144-1020CHT1之間的吡喃糖環的醚鍵(C-O-C)伸縮振動和羥基的吸收峰^McnT1處的脫氧糖的次甲基的橫搖振動，893CHT1的β型端基差向異構的 C-H變角振動，856CHT1處的呋喃糖的特徵吸收，835CHT1的α型端基差向異構的C-H變角振動。
全文摘要
本發明提供一種綠茶多糖的純化方法。綠茶多糖粗提物經DEAE C-52纖維素柱層析，0.1～0.5mol/L氯化鈉溶液進行梯度洗脫，跟蹤檢測收集合併各峰管，再經Sephadex G-100凝膠柱層析進一步純化茶多糖，0.1mol/L氯化鈉溶液洗脫，收集合併各峰管，低溫去離子水透析48小時後凍幹，對其純度和性質進行紫外全波段掃描和紅外光譜分析。
文檔編號C08B37/00GK102153667SQ201110045110
公開日2011年8月17日 申請日期2011年2月25日 優先權日2011年2月25日
發明者餘芳 申請人:餘芳