一種治療頭痛的中藥組合物及其製法和檢測方法

2023-05-26 23:41:06 1

專利名稱：一種治療頭痛的中藥組合物及其製法和檢測方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥組合物及其製法和檢測方法，特別是一種治療頭痛的中藥組 合物及其製法和檢測方法。
背景技術：
偏頭痛是一種間斷性反覆發作，以一側頭痛為特徵的是多發的神經系統疾病。發 作時頭痛難忍，甚則噁心，嘔吐，給患者帶來極大痛苦，導致工作效率降低，生活質量下降。 偏頭痛患者發生心臟病、缺血性中風機率較健康人增高，另外還能引發重性抑鬱症、恐怖障 礙等。目前，治療偏頭痛的藥品很多，對本病起到了一定的防治作用，但多以西藥為主，大多 價格高，副作用大，療效不盡如人意。以中醫藥理論為指導，篩選治療偏頭痛療效確切，毒副 作用小、價格適中的複方中藥，具有重要的社會和經濟意義。發明內容
本發明的目的在於提供一種既有確切療效，又能較好地改善臨床症狀、副作用少、 價格便宜的治療頭痛的中藥組合物。
本發明的又一目的在於提供該中藥組合物製劑的製備方法。
本發明的另外一個目的在於提供該中藥組合物顆粒劑的檢測方法。
本發明技術方案是這樣實現的
按照重量份計，製成該中藥組合物有效組分的原料為鉤藤360-1080、川芎 240-720、全蠍 60-180、白芷 108-324、牛膝 120-360、白芍 120-360、甘草 36-108。
優選為鉤藤540-900、川芎 360-600、全蠍 90-150、白芷 162-270、牛膝 180-300、 白芍 180-300、甘草 54-90。
最優選為鉤藤720、川芎480、全蠍120、白芷216、牛膝240、白芍240、甘草72。
本發明中藥組合物具有平肝熄風，活血止痛的作用。用於肝陽上亢，肝風上擾，瘀 血阻絡所致頭痛的治療。
本發明中藥組合物可以是藥劑學上可接受的劑型，包括丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、 軟膠囊劑、片劑、滴丸劑、口服液體製劑等，優選顆粒劑。
川芎、白芷可提取揮髮油，揮髮油包合，殘留液備用；鉤藤、全蠍兩味醇提；白芍、 牛膝、甘草水煎液與前述殘留液混合，加殼聚糖除雜；加適宜輔料，製成製劑。
本發明中的輔料可以是藥劑學上可接受的任意賦形劑或載體。
製備方法優選川芎、白芷可加8-12倍量水蒸餾4_8h，收集揮髮油，殘留液備用； 揮髮油用4-8倍量β環狀糊精在25-40°C包合0.5-2小時製成包合物，乾燥；鉤藤、全蠍加 4-8倍量40-70%乙醇提取2-4次，每次20-40min，合併提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃 縮至相對密度1. 20-1. 30，備用；白芍、牛膝、甘草等分別加6-12倍量水提取2-3次，每次提 取0.5-池，合併提取液及提油後殘留液，濾過，縮至料液比為1 1-1 3，加入1.0-1. 4倍殼聚糖絮凝液，靜置，過濾，上清液60°C濃縮至相對密度1. 10-1. 30，合併醇提稠浸膏，與揮髮油的β環狀糊精包合物加適宜輔料，製成製劑。
其中顆粒劑又優選川彎、白芷加10倍量水蒸餾他，收集揮髮油，殘留液備用；揮 髮油用6倍量β環狀糊精在30°C包合1小時製成包合物，減壓乾燥；鉤藤、全蠍加6倍 量50%乙醇提取3次，每次30min，合併提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度 1. 25，備用；白芍、牛膝、甘草等分別加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1. 5h，第二、三 次各提取lh，合併提取液及提油後殘留液，濾過，縮至料液比為1 1，加入1.2倍殼聚 糖絮凝液，靜置Mh，過濾，上清液60°C濃縮至相對密度1. 25，合併醇提稠浸膏，減壓乾燥； 將幹浸膏、揮髮油的β環狀糊精包合物加適宜輔料，製成顆粒劑。
特別是鉤藤720g、川芎480g、全蠍120g、白芷216g、牛膝240g、白芍240g、甘草 72g;川芎、白芷加10倍量水蒸餾他，收集揮髮油，殘留液備用；揮髮油用6倍量β環狀糊 精在30°C包合1小時製成包合物，減壓乾燥；鉤藤、全蠍加6倍量50%乙醇提取3次，每次 30min，合併提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度1. 25，備用；白芍、牛膝、甘草 等分別加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1.5h，第二、三次各提取lh，合併提取液及 提油後殘留液，濾過，縮至料液比為1 1，加入1.2倍殼聚糖絮凝液，靜置Mh，過濾， 上清液60°C濃縮至相對密度1. 25，合併醇提稠浸膏，減壓乾燥；將幹浸膏、甘露醇和糊精按 11 6 6的比例混勻，制粒，乾燥，與揮髮油的β環狀糊精包合物混勻，共制lOOOg，即得。
對於最後方法製得的顆粒劑的檢測方法包括鉤藤、全蠍、川芎、白芷、牛膝的薄層 鑑別，白芍的含量測定等。
一、性狀本發明為棕色顆粒，氣微香，味甜。
二、鑑別
(1)取本發明3g，加熱水50ml溶解，濃氨調pH9 10，氯仿萃取2次，每次20ml， 合併萃取液至蒸發皿中，蒸乾，殘渣加氯仿Iml溶解，作為供試品溶液。取鉤藤藥材3g，濃 氨溼潤，加氯仿50ml，超聲30min，濾過，濾液蒸乾，殘渣加氯仿Iml溶解，作為對照藥材溶 液。另取鉤藤鹼對照品適量，加甲醇製成每ml含0.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層 色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品lul，對照藥材5ul，供試 品10ul，點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠GF2M薄層板上，以氯仿甲醇-氨水 (11.5 1 0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈254nm下檢視。供試品色譜中， 在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色的螢光斑點。
(2)取本發明3g，加95%乙醇提取2h，濾過，濾液蒸於，殘渣加乙醇IOml溶解，作 為供試品溶液。取全蠍藥材4g，依供試品提取方法，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，點於同一以羧甲基纖維素 鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚-乙酸乙酯(15 4)為展開劑，展開，取出，晾乾， 置碘蒸氣下顯色。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同黃色的斑點。
(3)取本發明3g，加乙醚20ml，超聲30min，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙酸乙酯溶解， 定容至1ml，作為供試品溶液。取川芎藥材lg，加乙醚20ml，加熱回流lh，濾過，濾液蒸乾， 殘渣加乙酸乙酯溶解，定容至lml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005 年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試液15ul，對照藥材2ul，點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏 合劑的矽膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外 365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。5
(4)取本發明3g，加乙醚20ml，超聲30min，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙酸乙酯溶解， 定容至lml，作為供試品溶液。取白芷藥材0. 5g，加乙醚10ml，加熱回流lh，濾過，濾液蒸乾， 殘渣加乙酸乙酯溶解，定容至lml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年 版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各15ul，點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的 矽膠G薄層板上，以石油醚(30 60°C)_乙醚(3 2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外 365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(5)取本發明3g，加石油醚20ml，超聲30min，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇溶解，定 容至1ml，作為供試品溶液。取牛膝藥材2g，加乙醇20ml，加熱回流40min，靜置，取上清液 10ml，加鹽酸1ml，加熱回流lh，濃縮至5ml，加水10ml，用石油醚(60 90°C ) 20ml提取， 提取液蒸乾，殘渣加乙醇溶解，定容至ani，作為對照藥材溶液。另取齊墩果酸對照品製成 每Iml含Img對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸 取上述溶液各20ul，點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以三氯甲烷 甲醇GO 1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴磷鉬酸試液顯色，置110°C加熱至斑點顯色清 晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同藍色的斑點。
三、檢查應符合顆粒劑項下有關的各項規定
四、含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)測 定。色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-0. 磷酸 (14 86)為流動相；檢測波長為230nm。理論塔板數按芍藥苷計算應不低於2000對照品 溶液的製備取芍藥苷對照品適量，精密稱稱定，用甲醇配製成每ImL含0. 040mg的對照品 溶液。
供試品溶液的製備取本發明約2g，精密稱定，加入50%甲醇25mL，稱定重量，超 聲提取20min，放冷，再次稱定重量，用50 %甲醇補足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜濾過 (孔徑0. 4um)，取續濾液，即得。
測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，分別注入液相色譜儀，測定， 即得。
本發明每袋含白芍以芍藥苷(C23H28O11)計，不得少於12. Omg0
五、用法用量口服，每次1袋，一日3次。
六、規格15g/袋。
偏頭痛屬中醫「頭痛」、「頭風」、「偏頭痛」範疇，是臨床常見病。因其病程長，多反覆 發作，多以內傷頭痛辯證治之，其發生是肝臟本虛，風、痰、瘀凝滯經絡，脈絡失和所致。病理 特徵為上虛下實，實中夾虛，病邪特徵風多動變，在外挾寒；在內挾火，痰瘀恆存，互結致絡， 證型複雜。本發明由鉤藤、川芎、炙全蠍、懷牛膝、白芷、白芍、生甘草組成，具有活血息風，通 絡止痛功效，主要用於肝陽上亢，肝風上擾，瘀血阻絡所致的頭脹痛，或鈍痛、刺痛、跳痛，眩 暈、心煩失眠，情志不舒，舌質紅，或紫黯有瘀點，苔薄黃，脈弦等症的治療。
本發明所治偏頭痛系情志抑鬱，木鬱化火生風；或精神緊張，肝陽激變，化為風火； 肝腎陰虛，水不涵木，陽無以制，化為風火。肝經風火上擾，盤旋於腦，風卷痰，痰可凝血，使 絡脈阻滯所致。治宜平肝熄風，活血止痛。方中鉤藤味甘性寒，歸肝、心包經，可清熱平肝， 熄風定驚，既能清肝瀉熱肝陽，又能熄風止痙清頭目，用於肝經有熱，肝陽上亢之頭脹頭痛， 為君藥；全蠍味辛、鹹，入肝經，既散肝經風熱，而平肝熄風止痙，又能祛風以治疼痛，配伍君藥，一長於平肝，一偏於息風，相輔相助，具有較強的平肝熄風，通絡止痛之功，也為施今墨 老先生治偏頭痛之常用藥對，川芎升清開鬱，活血止痛，被譽為六經頭痛必用之藥，行血中 之氣、祛血中之風，和君藥相須為用，既可平抑肝陽，熄風止痛，又可活血通絡止痛，治頭痛、 眩暈有良效，亦有「治風先治血，血行風自滅」之意，與全蠍共為臣藥；白芍養血斂陰，柔肝以 息風，白芷長於止痛，助祛風止痛，牛膝活血祛瘀，引熱下行，制約風藥過於升散，三藥為佐， 助君臣藥以熄風活血止痛；高巔之上，唯風藥可到，川芎引諸藥上行頭目，直達病所，兼為 使，輔助君臣環周腦戶，充分發揮中醫方藥配伍之優越性，甘草調和諸藥。全方涼溫並用，風 血並調，則清竅空靈，風熄絡通痛止，驗之臨床，確有療效。
本發明中藥製劑主要藥效學實驗結果如下
一、受試藥物
川芎、白芷加8倍量水蒸餾他，收集揮髮油，殘留液備用；揮髮油用6倍量β環狀 糊精在30°C包合1小時製成包合物，減壓乾燥；鉤藤、全蠍加6倍量50%乙醇提取3次，每 次30min，合併提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度1.25，備用；白芍、牛膝、甘 草等分別加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1.證，第二、三次各提取lh，合併提取液及 提油後殘留液，濾過，縮至料液比為1 1，加入1.2倍殼聚糖絮凝液，靜置Mh，過濾，上 清液60°C濃縮至相對密度1.25，合併醇提稠浸膏，與揮髮油的β環狀糊精包合物混勻，即 得。
二、藥效試驗
(一 )對偏頭痛模型大鼠5-ΗΤ、β -EP及腦幹中NO的影響
將SD大鼠60隻，雌雄各半，體重18_22g，按體重和性別隨機分為6組，每組10 只，即本發明高劑量組(31.32g生藥/kg)、中劑量組(15. 66g生藥/kg)、低劑量組(7. 83g 生藥/kg)，陽性組(正天丸)(9g/kg)、對照組(蒸餾水)、模型組(蒸餾水)。給藥體積為 lml/100g體重，每日一次，連續10天。次日除空白對照組外其餘各組皮下注射硝酸甘油注 射劑(10mg/kg)，複製實驗性偏頭痛動物模型。造模30min後按相應分組給藥，造模成功後 4h，頸動脈取血，採用放免法測定內啡肽含量、酶聯免疫吸附法測定5-羥色胺含量。
將動物迅速斷頭處死，取腦，用濾紙吸盡腦組織表面血跡，放入預先冰冷的生理鹽 水中，去除腦膜和血管，從腦組織中分離出下丘腦和腦幹，將腦幹部分置於稱量杯中用電子 分析天平稱取約0. 3g，放入預冷的玻璃勻漿器中，加入適量冰冷生理鹽水作組織勻漿(重 量體積比約1:9)，充分勻漿後低溫離心IOmin (4°C，2000r/min)，取上清液測定腦幹中NO 的含量。將結果以表示，採用t檢驗比較組間差異性。
一般狀態除空白對照組外，其餘動物造模後30min左右，均出現雙耳發紅、前肢 頻繁搔頭，爬籠次數增多，煩躁不安現象。治療組動物在給藥後，上述現象逐漸消失，歸於正 常。模型組動物上述現象持續約3小時，繼而出現蜷臥，活動減少狀態。
表1對偏頭痛模型大鼠5-ΗΤ、β -ΕΡ、NO的影響(I 土S)
7
注與模型組比較，*P < 0. 05
本發明高劑量組能升高偏頭痛模型大鼠血清中β -ΕΡ、降低下丘腦及腦幹中NO含 量，高、中、低劑量組能升高血清中5-ΗΤ含量，與對照組比較有顯著性差異(Ρ<0.05)。表 明本發明具有鎮痛作用，達到治療偏頭痛的作用。
( 二 )對醋酸致小鼠疼痛的影響
將KM小鼠60隻，雌雄各半，體重18-22g，按體重和性別隨機分為5組，每組12隻， 分別為本發明高劑量組(45. 24g生藥/kg)、中劑量組(22. 62g生藥/kg)、低劑量組(11. 31g 生藥/kg)、對照組(蒸餾水)、阿司匹林組(0. 28g/kg)。給藥體積為0. lml/10g體重，連續 給藥7天。末次給藥後lh，除空白組外其餘各組腹腔注射0. 7%冰醋酸0. lmL/10g體重。記 錄小鼠20min內扭體次數，並計算抑制率，將結果以 士S表示，並比較組間差異性。
抑制率=(空白組平均扭體次數-實驗組平均扭體次數)/空白組平均扭體次 數 Χ100%ο
表2對醋酸致小鼠疼痛的影響( ±S) χ. ............ .................,..,丨… .....丨..組別(g/kg)劇組...........................—
本發明低劑量組 11.31 本發明中劑量組 22.62 本發明高劑量組 45.24阿司匹林組0.28
注與對照組比較< 0. 05
由表可見，本發明高、中、低劑量組能明顯減少小鼠扭體次數，與對照組比較有顯 著性差異(P < 0. 05)。表明本發明具有鎮痛作用。
(三)對熱板法致小鼠疼痛的影響
調節智能熱板儀使溫度設定在55. O士0. 5°C，將雌性小鼠置於熱板上，開始記時， 直至小鼠舔後足(跳躍者棄去)停止記時，這段時間為該只小鼠的基礎痛閾。取基礎痛閾 值在5-30s之間的小鼠60隻，按體重和性別隨機分為5組，每組12隻，分別為本發明高劑8η 扭體次數抑制率(%) (只) /20min1243.67±13.43—1237.58士 14.1713.951230.67±9.62*29.771222.75±9.63*47.901214.17±9.36*67.55量組(45. 24g生藥/kg)、中劑量組(22. 62g生藥/kg)、低劑量組(11. 31g生藥/kg)、對照組 (蒸餾水)、阿司匹林組(0. 28g/kg)。給藥體積為0. lml/10g體重，連續給藥7天。末次給 藥後45min、90min、120min分別測定小鼠痛閾值。如60s仍無反應，其痛閾以60s計算，將 結果以[士 S表示，並比較組間差異性。
表3對熱板法致小鼠疼痛的影響(χ ±S, n=10)
權利要求
1.一種治療頭痛的中藥組合物，其特徵在於按照重量份計，製成該中藥組合物有效組 分的原料為鉤藤360-1080、川芎240-720、全蠍60-180、白芷108-324、牛膝120-360、白芍 120-360、甘草 36-108。
2.如權利要求1所述的治療頭痛的中藥組合物，其特徵在於按照重量份計，製成該 組合物有效成分的原料為鉤藤M0-900、川芎360-600、全蠍90-150、白芷162-270、牛膝 180-300、白芍 180-300、甘草 54-90。
3.如權利要求2所述的治療頭痛的中藥組合物，其特徵在於按照重量份計，製成該組 合物有效成分的原料為鉤藤720、川芎480、全蠍120、白芷216、牛膝M0、白芍M0、甘草 72。
4.如權利要求1、2或3所述的治療頭痛的中藥組合物，其特徵在於所述中藥組合物為 丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、滴丸劑或口服液體製劑。
5.如權利要求4所述的治療頭痛的中藥組合物，其特徵在於所述中藥組合物為顆粒劑。
6.如權利要求5所述的治療頭痛的中藥組合物的顆粒劑，其特徵在於它是通過以下方 法製備的鉤藤720g、川芎480g、全蠍120g、白芷216g、牛膝240g、白芍240g、甘草72g ；川 芎、白芷加10倍量水蒸餾他，收集揮髮油，殘留液備用；揮髮油用6倍量β環狀糊精在30°C 包合1小時製成包合物，減壓乾燥；鉤藤、全蠍加6倍量50%乙醇提取3次，每次30min，合 並提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度1.25，備用；白芍、牛膝、甘草等分別加 10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1.證，第二、三次各提取lh，合併提取液及提油後殘留 液，濾過，縮至料液比為1 1，加入1.2倍殼聚糖絮凝液，靜置Mh，過濾，上清液60°C 濃縮至相對密度1.25，合併醇提稠浸膏，減壓乾燥；將幹浸膏、甘露醇和糊精按11 :6:6 的比例混勻，制粒，乾燥，與揮髮油的β環狀糊精包合物混勻，共制lOOOg，即得。
7.如權利要求1-5任一權利要求所述的治療頭痛的中藥組合物的製備方法，其特徵在 於川芎、白芷可提取揮髮油，揮髮油包合，殘留液備用；鉤藤、全蠍兩味醇提；白芍、牛膝、 甘草水煎液與前述殘留液混合，加殼聚糖除雜；加適宜輔料，製成製劑。
8.如權利要求7所述的治療頭痛的中藥組合物的製備方法，其特徵在於川芎、白芷 可加8-12倍量水蒸餾4- ，收集揮髮油，殘留液備用；揮髮油用4-8倍量β環狀糊精在 25-40°C包合0. 5-2小時製成包合物，乾燥；鉤藤、全蠍加4-8倍量40-70%乙醇提取2-4次， 每次20-40min，合併提取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度1. 20-1. 30，備用；白 芍、牛膝、甘草等分別加6-12倍量水提取2-3次，每次提取0. 5-池，合併提取液及提油後殘 留液，濾過，縮至料液比為1 1-1 3，加入1.0-1. 4倍殼聚糖絮凝液，靜置，過濾，上 清液60°C濃縮至相對密度1.10-1. 30，合併醇提稠浸膏，與揮髮油的β環狀糊精包合物加 適宜輔料，製成製劑。
9.如權利要求7或8所述的治療頭痛的中藥組合物的製備方法，其特徵在於川芎、白 芷加10倍量水蒸餾他，收集揮髮油，殘留液備用；揮髮油用6倍量β環狀糊精在30°C包合 1小時製成包合物，減壓乾燥；鉤藤、全蠍加6倍量50%乙醇提取3次，每次30min，合併提 取液，回收乙醇至無醇味，60°C濃縮至相對密度1.25，備用；白芍、牛膝、甘草等分別加10、 8、8倍量水提取3次，第一次提取1.證，第二、三次各提取lh，合併提取液及提油後殘留液， 濾過，縮至料液比為1 1，加入1.2倍殼聚糖絮凝液，靜置Mh，過濾，上清液60°C濃縮至相對密度1.歷，合併醇提稠浸膏，減壓乾燥；將幹浸膏、揮髮油的β環狀糊精包合物加適 宜輔料，製成顆粒劑。
10.權利要求1、2或3所述的中藥組合物在製備治療頭痛藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種用於治療頭痛的中藥組合物及其製法和檢測方法，由鉤藤、川芎、全蠍、白芷、牛膝、白芍、甘草製成，劑型包括丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、滴丸或口服液體製劑等，具有確切療效，較好地改善臨床症狀，副作用少、價格便宜的特點；顆粒劑的檢測方法包括鉤藤、全蠍、川芎、白芷、牛膝的薄層鑑別，白芍的含量測定。
文檔編號A61P25/04GK102028782SQ20101058429
公開日2011年4月27日 申請日期2010年12月9日 優先權日2010年12月9日
發明者龐來祥 申請人:龐來祥