用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑及薄層鑑別方法與流程

2023-05-27 16:50:42

本發明涉及中藥材鑑別領域，特別涉及一種用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑及薄層鑑別方法。

背景技術：

大黃具有瀉下攻積，清熱瀉火，涼血解毒，逐瘀通經，利溼退黃的功效；常用於實熱積滯便秘，血熱吐衄，目赤咽腫，癰腫疔瘡，腸癰腹痛，瘀血經閉，產後瘀阻，跌打損傷，溼熱痢疾，黃疸尿赤，淋證，水腫；資源來源為掌葉大黃(Rheum pallmatum L.)、藥用大黃(Rheum offcinale Baill.)、唐古特大黃(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.)的乾燥根和根莖。

目前《中國藥典》2015年版本中大黃的薄層鑑別方法為：取本品粉末0.1g，加甲醇20ml，浸泡1小時，濾過，取濾液5mL，蒸乾，殘渣加水10mL使溶解，再加鹽酸1mL，加熱回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次振搖提取，每次20mL，合併乙醚液，蒸乾，殘渣加三氯甲烷1mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.1g，同法製成對照藥材溶液。再取大黃酸對照品，加甲醇製成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述三種溶液各4μL，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色螢光主斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色螢光斑點，置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色。但是該方法所用的時間過長。

技術實現要素：

本發明的目的在於提供一種用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑，該展開劑配置簡單，不需要靜止後取上層溶液，簡化了配置步驟。

本發明的另一目的在於提供一種中藥材大黃的薄層鑑別方法，該方法所用時間較短，提高了效率。

本發明解決其技術問題是採用以下技術方案來實現的。

本發明提出一種用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑，展開劑為石油醚、冰乙酸和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。

本發明提出一種中藥材大黃的薄層鑑別方法，其包括：

展開步驟：將藥材溶液點於矽膠薄層板上，用展開劑展開，展開劑為石油醚、冰乙酸和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。

本發明的一種用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑及其薄層鑑別方法的有益效果是：展開劑採用石油醚、乙酸乙酯和和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。該展開劑可以直接配置使用，不需要靜止後取上層溶液，簡化了展開劑配置步驟；同時節約了時間，提高了效率。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖僅示出了本發明的某些實施例，因此不應被看作是對範圍的限定，對於本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1為本發明實施例1的薄層色譜分析示意圖；

圖2為本發明實施例1的薄層色譜分析結果的照片；

圖3為本發明實施例2的薄層色譜分析示意圖；

圖4為本發明實施例2的薄層色譜分析結果的照片；

圖5為本發明實施例3的薄層色譜分析示意圖；

圖6為本發明實施例3的薄層色譜分析結果的照片；

圖7為本發明實施例4的薄層色譜分析示意圖；

圖8為本發明實施例4的薄層色譜分析結果的照片；

圖9為本發明實施例5的薄層色譜分析示意圖；

圖10為本發明實施例5的薄層色譜分析結果的照片；

圖11為本發明實施例6的薄層色譜分析示意圖；

圖12為本發明實施例6的薄層色譜分析結果的照片；

圖13為本發明實施例7的薄層色譜分析示意圖；

圖14為本發明實施例7的薄層色譜分析結果的照片；

圖15為本發明實施例8的薄層色譜分析示意圖；

圖16為本發明實施例8的薄層色譜分析結果的照片；

圖17為本發明實施例9的薄層色譜分析示意圖；

圖18為本發明實施例9的薄層色譜分析結果的照片；

圖19為本發明實施例10的薄層色譜分析示意圖；

圖20為本發明實施例10的薄層色譜分析結果的照片；

圖21為本發明實施例11的薄層色譜分析示意圖；

圖22為本發明實施例11的薄層色譜分析結果的照片。

圖中：薄層色譜分析圖100、200、300、400、500、600、700、800、900、100A、100B；掌葉大黃的螢光斑點110、210、510、610；藥用大黃的螢光斑點710、810、110B；唐古特大黃的螢光斑點910、110A；掌葉大黃對照藥材的螢光斑點120、220、520；唐古特大黃對照藥材的螢光斑點320；藥用大黃對照藥材的螢光斑點420；大黃素的螢光斑點130、230、330、430、530、630、730、830、930、130A、130B；大黃酚的螢光斑點140、240、340、440、540、640、740、840、940、140A、140B。

具體實施方式

為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未註明具體條件者，按照常規條件或製造商建議的條件進行。以下實施例所用的中藥材大黃如下：掌葉大黃購自同仁堂，掌葉大黃對照藥材購自中國食品藥品檢定研究所，唐古特大黃對照藥材購自中國食品藥品檢定研究所，藥用大黃對照藥材購自中國食品藥品檢定研究所。所用試劑或儀器未註明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。

下面對本發明實施例的中藥材大黃的薄層鑑別方法進行具體說明。

本發明實施例提供的一種用於中藥材大黃薄層鑑別方法的展開劑，展開劑為石油醚、冰乙酸和第一溶劑的混合物，所述第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。優選地，石油醚、第一溶劑和冰乙酸的體積比為5～20∶0.5～5：0.1～5。進一步地，石油醚、乙酸乙酯和冰乙酸的體積比為9∶2∶0.6。優選地，石油醚、氯仿和冰乙酸的體積比為9：4：0.5。優選地，石油醚、二氯甲烷和冰乙酸的體積比為9：5：0.5。

展開劑採用石油醚、乙酸乙酯和和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。該展開劑可以直接配置使用，不需要靜止後取上層溶液，簡化了展開劑配置步驟。石油醚、第一溶劑和冰乙酸選擇合適的比例能達到很好的展開效果。

本發明實施例提供的一種中藥材大黃的薄層鑑別方法，其包括：

展開步驟：將藥材溶液點於矽膠薄層板上，用展開劑展開，展開劑為石油醚、乙酸乙酯和和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。優選地，展開劑中石油醚、第一溶劑和冰乙酸的體積比為5～20∶0.5～5：0.1～5。

展開劑採用石油醚、乙酸乙酯和和第一溶劑的混合物，第一溶劑為乙酸乙酯、氯仿和二氯甲烷中的任一種。該展開劑可以直接配置使用，不需要靜止後取上層溶液，簡化了展開劑配置步驟。同時節約了時間，提高了中藥材大黃的薄層鑑別效率。

進一步地，藥材溶液的製備步驟包括：

A步驟：將中藥材大黃和第一有機溶劑混合，進行第一超聲處理，然後進行固液分離並去除固態物得到第一液體，接著將第一液體蒸乾後得到第一浸膏；第一有機溶劑為乙醇、甲醇、丙酮和異丙醇中的任一種。

進一步地，第一超聲處理為多次，先將每次第一超聲處理後得到的液體進行固液分離並去除固態物，然後混合得第一液體。

採用超聲法提取大黃藥材中的活性成分，簡化了實驗步驟，縮短了製備時間，提高了鑑別效率。第一超聲處理的時間越長、次數越多，中藥材大黃裡提取出來的活性成分越多。第一有機溶劑選用乙醇、甲醇、丙酮和異丙醇中的任一種，能將中藥材大黃裡的活性成分很好地提取出來。

B步驟：將第一浸膏和水混合後進行第二超聲處理，然後和第二有機溶劑混合進行萃取，第二有機溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚中的任一種。再收集萃取後的第二有機溶劑並蒸乾得到第二浸膏，將第二浸膏和第三有機溶劑混合溶解得藥材溶液。第三有機溶劑為乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二氯甲烷、三氯甲烷和乙酸乙酯中的任一種。

優選地，B步驟中的萃取次數為多次，先將每次萃取後的第二有機溶劑混合，再進行蒸乾得到第二浸膏。

第二有機溶劑選用二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚中的任一種，能夠對從中藥材大黃中提取出來的活性成分進行有效地分離。第三有機溶劑選用乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二氯甲烷、三氯甲烷和乙酸乙酯中的任一種，能夠對樣品中的活性成分進行很好地溶解。

第二超聲處理不會破壞大黃的活性成分；同時，萃取次數越多，樣品裡的活性成分也越多，在展開步驟中展開的效果也會更好。

本發明的優選實施例中，採用超聲法提取大黃藥材中的活性成分，簡化了實驗步驟，縮短了製備時間，提高了鑑別效率；採用用石油醚-乙酸乙酯-冰乙酸溶劑體系作為展開劑，配製步驟簡單，展開效果良好；也優化了製備樣品溶液所用的溶劑。綜上所述，鑑別方法簡單、易操作，是一種能夠快速、準確的鑑別中藥材大黃的方法。

以下結合實施例對本發明的特徵和性能作進一步的詳細描述。

實施例1

供試品溶液的製備：將0.75g掌葉大黃(購自同仁堂)和10mL的85％乙醇混合，進行第一超聲處理兩次，每次15分鐘，接著進行過濾，然後收集兩次濾液並混合得第一濾液，將第一濾液蒸乾得到第一浸膏。再將第一浸膏和10mL的水混合後進行第二超聲處理15min，然後加二氯甲烷萃取兩次，每次加入的二氯甲烷為15mL，收集兩次二氯甲烷液並蒸乾，用1mL的甲醇溶解，得掌葉大黃藥材溶液。

對照藥材溶液的製備：將0.75g掌葉大黃對照藥材和10mL的85％乙醇混合，進行第一超聲處理兩次，每次15分鐘，接著進行過濾，然後收集兩次濾液並混合得第一濾液，將第一濾液蒸乾得到第一浸膏。再將第一浸膏和10mL的水混合後進行第二超聲處理15min，然後加二氯甲烷萃取兩次，每次加入的二氯甲烷為15mL，收集兩次二氯甲烷液並蒸乾，用1mL的甲醇溶解，得掌葉大黃對照藥材溶液。

對照品溶液的製備：取大黃酚和大黃素，分別加甲醇製成質量濃度為1mg/mL的大黃酚藥材溶液和質量濃度為1mg/mL的大黃素藥材溶液。

薄層色譜法鑑別：吸取3μL的掌葉大黃藥材溶液、3μL掌葉大黃對照藥材溶液和2μL大黃酚藥材溶液、2μL大黃素藥材溶液分別點於矽膠薄層板上，用展開劑展開，然後取出置于波長為365nm的紫外光燈下檢視，其中展開劑是體積比為9:2:0.6的石油醚(60～90℃)、乙酸乙酯和冰乙酸的混合物。

如圖1和圖2所示，圖1和圖2的螢光斑點一一對應。薄層色譜分析圖100中掌葉大黃的螢光斑點110，掌葉大黃對照藥材的螢光斑點120，大黃素的螢光斑點130，大黃酚的螢光斑點140。

實施例2

供試品溶液的製備：將1.5g掌葉大黃和20mL的85％乙醇混合，進行第一超聲處理兩次，每次30分鐘，接著進行過濾，然後收集兩次濾液並混合得第一濾液，將第一濾液蒸乾得到第一浸膏。再將第一浸膏和20mL的水混合後進行第二超聲處理30min，然後加二氯甲烷萃取兩次，每次加入的二氯甲烷為25mL，收集兩次二氯甲烷液並蒸乾，用1mL的甲醇溶解，得掌葉大黃藥材溶液。

對照藥材溶液的製備：將1.5g掌葉大黃對照藥材和20mL的85％乙醇混合，進行第一超聲處理兩次，每次30分鐘，接著進行過濾，然後收集兩次濾液並混合得第一濾液，將第一濾液蒸乾得到第一浸膏。再將第一浸膏和20mL的水混合後進行第二超聲處理30min，然後加二氯甲烷萃取兩次，每次加入的二氯甲烷為25mL，收集兩次二氯甲烷液並蒸乾，用1mL的甲醇溶解，得掌葉大黃對照藥材溶液。