蜂膠有效部位及其複方製品和應用的製作方法
2023-07-03 14:52:11 1
本發明涉及一種增強機體免疫力的蜂膠有效部位及其複方製品，屬於功能性食品技術領域。
背景技術：
人體的免疫功能與生俱來，可防禦外來物質的侵犯，保護機體的穩態，對維持人體健康具有重要意義。免疫系統是人體抵禦疾病的天然屏障，若免疫系統遭到破壞，人體免疫力下降，就容易導致患病、病情恢復緩慢、反覆感染等重大健康威脅。
蜂膠是蜂蜜從外界的膠源植物的嫩芽或樹皮傷口上採集的樹脂，並混入蜜蜂上領腺物和蜂蠟而成的一種棕紅色、棕黃色、棕褐色或帶有青綠色的粘性固體。蜂膠素有「紫色黃金」的美譽，具有多項生物活性，包括抗腫瘤、抗病原微生物、保護肝臟、增強機體免疫力、改善心血管系統等。現階段，人們普遍處於壓力大、生活節奏緊張的狀態中，亞健康人群的數量逐年上升，長年累月的亞健康狀態會使免疫功能降低，還極易引發一些慢性病如心血管和糖尿病等，而蜂膠能有效地增強人體的免疫能力，促進吞噬細胞的作用，刺激身體產生抗體，抵抗多種疾病。
技術實現要素：
本發明的目的是提供一種蜂膠有效部位及其複方製品。
本發明的另一目的是提供上述蜂膠有效部位的提取方法。
本發明還有一個目的是利用蜂膠有效部位、維生素e和蜂王漿製備可增強機體免疫力的蜂膠複方製品。
本發明實現過程如下：
一種蜂膠有效部位，其中蜂膠有效部位中活性成分組成與含量為：阿魏酸：151.8±6.8mg/100g，槲皮素：2858.9±125.3mg/100g，坎菲醇：275.2±14.7mg/100g，芹菜素：336.6±20.1mg/100g，松屬素：2838±85.4mg/100g，白楊素：6168.5±159.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：1287±48.5mg/100g，高良姜素：3082±153.8mg/100g。
上述蜂膠有效部位的提取方法：將蜂膠原料加熱到80℃，去除浮在上面的蜂蠟，然後將去除蜂蠟的蜂膠原料置於-20℃--30℃環境中冷凍8-10小時，用帶製冷的粉碎機將其粉碎成20-30目，用8-10倍重量，體積比為85-95%的乙醇提取2-3次，提取溫度為0-4℃，每次提取時間6-10小時，合併提取液，過濾；將濾液減壓濃縮到無醇味，然後將蜂膠提取物置於真空乾燥箱中乾燥，得到蜂膠有效部位。
含有上述蜂膠有效部位的蜂膠複方製品，其活性組分為蜂膠有效部位、蜂王漿和維生素e，具體生產工藝包括以下步驟：將重量份為30~35份的蜂膠有效部位在-10~-15℃條件下粉碎成20~30目顆粒，然後與3~6份蜂王漿凍乾粉、0.5~1.5份維生素e油、28~33份大豆色拉油、25~31份的藥用級聚乙二醇400、2~4份單硬脂酸甘油酯混合，置於超微粉碎機中在-12~-20℃條件下研磨、乳化和粉碎10-15分鐘，得到顆粒直徑在10-20微米的可以裝填軟膠囊的蜂膠複方製品。
通過hplc測定，上述蜂膠複方製品中活性成分組成及含量為：阿魏酸：46±2.8mg/100g，槲皮素：866±61.3mg/100g，坎菲醇：82±5.7mg/100g，芹菜素：102±7.1mg/100g，松屬素：860±28.4mg/100g，白楊素：1868±68.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：390±16.5mg/100g，高良姜素：934±61.8mg/100g，維生素e：935±16.5mg/100g，10-羥基2-癸烯酸：250±20.9mg/100g。
上述蜂膠有效部位或蜂膠複方製品可用於製備增強免疫力保健食品。
上述蜂王漿凍乾粉是在低溫真空條件下，將蜂王漿脫水粉碎得到的白色粉狀物質。低溫真空處理的蜂王漿凍乾粉最大限度的保留了蜂王漿中蛋白質、維生素a、維生素bl、維生素b2、葉酸、泛酸、酶類及乙醯膽鹼等多種活性成分，可提高小鼠單核巨噬細胞系統和細胞免疫系統功能。
維生素e，又稱生育酚，具有抗氧化、維持生育和調節免疫系統等諸多生物學功能。健康人群長期服用低劑量的維生素e非但不會對體重、血液常規生化指標、免疫指標、激素及慢性病有不良影響，甚至或可降低前列腺癌和乳腺癌的發病率。
本發明蜂膠複方製品經動物藥效學實驗證實，對動物具有顯著的增強免疫力功能。
具體實施方式
一種蜂膠有效部位的提取方法：將蜂膠原料加熱到80℃，去除浮在上面的蜂蠟，然後將去除蜂蠟的蜂膠原料置於-20℃--30℃環境中冷凍8-10小時，用帶製冷的粉碎機將其粉碎成20-30目，用8-10倍重量，體積比為85-95%的乙醇提取2-3次，提取溫度為0-4℃，每次提取時間6-10小時，合併提取液，過濾；將濾液減壓濃縮到無醇味，然後將蜂膠提取物置於真空乾燥箱中乾燥，得到蜂膠有效部位。
通過hplc測定，上述蜂膠有效部位中活性成分組成與含量為：阿魏酸：151.8±6.8mg/100g，槲皮素：2858.9±125.3mg/100g，坎菲醇：275.2±14.7mg/100g，芹菜素：336.6±20.1mg/100g，松屬素：2838±85.4mg/100g，白楊素：6168.5±159.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：1287±48.5mg/100g，高良姜素：3082±153.8mg/100g。
一種蜂膠複方製品，其活性組分為蜂膠有效部位、蜂王漿和維生素e，具體生產工藝包括以下步驟：將重量份為30~35份的蜂膠有效部位在-10~-15℃條件下粉碎成20~30目顆粒，然後與3~6份蜂王漿凍乾粉、0.5~1.5份維生素e油、28~33份大豆色拉油、25~31份的藥用級聚乙二醇400、2~4份單硬脂酸甘油酯混合，置於超微粉碎機中在-12~-20℃條件下研磨、乳化和粉碎10-15分鐘，得到顆粒直徑在10-20微米的可以裝填軟膠囊的蜂膠複方製品。
通過hplc測定，上述蜂膠複方製品中活性成分組成及含量為：阿魏酸：46±2.8mg/100g，槲皮素：866±61.3mg/100g，坎菲醇：82±5.7mg/100g，芹菜素：102±7.1mg/100g，松屬素：860±28.4mg/100g，白楊素：1868±68.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：390±16.5mg/100g，高良姜素：934±61.8mg/100g，維生素e：935±16.5mg/100g，10-羥基2-癸烯酸：250±20.9mg/100g。
藥效學研究
（1）試驗材料和給藥方法：
受試物為用1%的變性澱粉溶液分散的蜂膠複方製品，受試物設置353mg/kg、706mg/kg、1059mg/kg三個劑量組（以下表述為低劑量組、中劑量組、高劑量組），以1%的羧甲基纖維素鈉溶液為對照組。試驗動物為雌性昆明種小鼠144隻，體重18~21g，每組36隻，按0.2ml/10g體重經口灌胃，每天一次，連續灌胃30天後測定免疫指標、小鼠體重變化。
免疫指標的測定：小鼠分為免疫一組、二組、三組及對照組，其中一組用於臟器/體重比值影響試驗、遲髮型態反應試驗、抗體生成細胞檢測、血清溶血素測定和巨噬細胞吞噬雞紅細胞測定；二組用於nk細胞活性測定和淋巴細胞轉化實驗；三組用於小鼠碳廓清測定。試驗均按照《保健食品檢驗與評價技術規範》（2003版）中的方法進行。
表1給出了該蜂膠複方製品對免疫小鼠體重增長的影響，各劑量組下的小鼠體重的增長與對照組均無顯著性差異（p>0.05）。
表2為該蜂膠複方製品對小鼠臟器/體重比值的影響，由表2可知三個劑量組動物的髒/體比值與對照組相比較均無顯著性差異（p>0.05）。
表3和表4分別為蜂膠複方製品對小鼠遲髮型變態反應能力和cona誘導的淋巴細胞轉化實驗的影響。結果表明，連續灌胃30天後，低、中、高劑量組動物的足蹠腫脹度和淋巴細胞增殖能力與對照組相比均無顯著性差異（p>0.05），對小鼠細胞免疫試驗結果呈陰性。
表5和表6分別為蜂膠複方製品對抗體生成細胞和小鼠半數溶血值（hc50）的影響。同樣，連續灌胃30天後，低、中、高劑量組動物的溶血空斑數和hc50與對照組相比無顯著性差異（p>0.05），表明該蜂膠複方製品對小鼠體液免疫試驗結果呈陰性。
表7和表8分別為蜂膠複方製品對小鼠單核—巨噬細胞碳廓清功能和小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響。表7、表8數據結果表明，連續灌胃30天後，蜂膠複方製品對小鼠單核—巨噬細胞免疫試驗結果為陽性，即蜂膠複方製品對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力有提高作用。
表9給出了該蜂膠複方製品對小鼠nk細胞活性的影響，由表9可知，中、高劑量組動物的nk細胞活性顯著增強，與對照組有顯著性差異（p<0.05），蜂膠複方製品對nk細胞活性有促進作用。
結論：表1~6結果表明，連續灌胃30天後，蜂膠複方製品對小鼠的體重、髒/體比值以及細胞免疫功能、體液免疫結果均無影響。表7~9結果表明，蜂膠複方製品對小鼠的單核—巨噬細胞功能結果、nk細胞活性測定結果均為陽性。依據《保健食品檢驗與評價技術規範》能夠判定：蜂膠複方製品對動物具有增強免疫力的功能。