卡託普利在抑制瘢痕增生中的應用的製作方法
2023-06-12 19:15:56
專利名稱：卡託普利在抑制瘢痕增生中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及的是卡託普利的一種新用途，具體地說是卡託普利應用在製備抑制瘢痕增生的治療或預防藥物中的新用途。
背景技術：
卡託普利(Captopril)，又稱巰甲丙脯酸，即1_(3_巰基-2-D-甲基丙醯基)_L_脯
氨酸，結構為為白色或類白色結晶性粉末，有類似蒜的特臭，味鹹，微溶於水，易溶於乙醇。卡託普利是最早應用於臨床的血管緊張素轉化酶抑制劑，隨著對腎素一血管緊張素系統的深入研究，認識到血管緊張素不僅僅存在於血液循環中，而且還存在於各種組織，如血管、腎、 腎上腺、腦、垂體和子宮等，發揮著各種生理作用。自20世紀90年代問世以來.卡託普利已經從治療高血壓專用藥物向治療其它心血管疾病、肝硬化腹水、類風溼性關節炎、甲狀腺機能亢進、特發性水腫等疾病的臨床用藥發展，並取得了良好的臨床效果。以上結果均提示 ACE-I類藥物在機體內有多方面的生物功能，其作用無法用降壓來解釋，抗高血壓的作用僅是其作用的一部分。病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，一直是整形外科乃至整個外科界研究的焦點問題之一，儘管已有大量研究結果表明，眾多錯綜複雜的細胞因子和基因參與了病理性瘢痕的生成，但其明確的病因學機制至今仍不清楚，也沒有一種普遍有效的臨床治療方法。然而，綜合目前對於病理性瘢痕機制研究的結果，TGF-β 1細胞因子成為現今公認的瘢痕疙瘩生成機制中最為重要的因素之一。TGF-β 1不但能誘導自身和其他因子(TNF-a， IL-Ιβ，PDGF等)的表達，而且還可以使成纖維細胞活化、增殖並轉化為肌成纖維細胞，促進纖維連接蛋白、糖蛋白和膠原等胞外基質成分的沉積。同時TGF-β 1還可以通過抑制膠原酶產生和增加MMP抑制物質(ΤΙΜΡ、ΡΑΙ、α -巨球蛋白)產生而抑制前膠原的降解，導致膠原沉積增加。近年來實驗研究證實，卡託普利具有抑制TGF-β 1的作用。卡託普利針對心臟、腎臟及肝臟均具有良好的抗纖維化的功效。然而，當前針對病理性瘢痕作為皮膚的纖維化疾病的卡託普利的防治作用的相關研究及報導卻少之又少。
發明內容
本發明的目的是針對上述新領域的研究方向提供卡託普利的一種新用途。
本發明的研究表明，卡託普利具有抑制瘢痕增生的作用，應用於製備治療和/或預防瘢痕增生性疾病的藥物中。具體的說，本發明所述的卡託普利在抑制增生性瘢痕的治療和/或預防藥物中的應用；在抑制瘢痕疙瘩的治療和/或預防藥物中的應用；所述卡託普利也可以做出凝膠，應用在尿道瘢痕性狹窄的治療和/或預防；所述卡託普利製作成注射液應用於矽凝膠假體隆胸術後包膜攣縮的治療和/或預防。在治療和/或預防瘢痕增生性疾病時，以卡託普利為活性成分，以常規的製劑工藝，製備成臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。如乳膏、凝膠、注射液及各種外用製劑寸。本發明的研究表明，卡託普利能降低病理性瘢痕成纖維細胞膠原蛋白合成及分泌膠原蛋白能力，減弱成纖維細胞的增殖能力，下調TGF-β 1表達。卡託普利軟膏對於病理性瘢痕具有良好的治療或預防作用。本研究應用卡託普利對瘢痕疙瘩成纖維細胞進行幹預，發現卡託普利對於成纖維細胞具有直接的抑制增生作用。將卡託普利製作成乳膏、凝膠或注射液，通過對病理性瘢痕進行探索性治療後，表明成纖維細胞合成膠原蛋白含量減少及分泌膠原蛋白能力下降；同時一些與瘢痕疙瘩生成相關的重要細胞因子TGF-β 1發生了相應的下調表達。臨床上通過對病理性瘢痕患者進行卡託普利乳膏外用，能有效減輕瘢痕的疼、癢等症狀；瘢痕色澤變淡；顯著降低瘢痕的高起皮膚表面的高度。通過對手術後患者傷口的預防性應用，未發現傷口部位出現病理性瘢痕發生。本發明具有以下優點1、治療針對病理性瘢痕發病因素重要的細胞因子 TGF-β 1，具有特異性；2、採用霜劑等外用製劑，直接作用於瘢痕組織，故劑量小，療效高，副作用小；3、卡託普利屬於常規的心血管藥物，具有價格便宜、工藝成熟、易得等特點，將其應用於抗纖維化治療屬於老藥新用，有望成為臨床上主要的瘢痕治療和預防方法。
圖1為卡託普利組TGF-β ImRNA表達於成纖維細胞胞質，胞質淡染(Χ200)圖2為非卡託普利組TGF-β ImRNA表達於成纖維細胞胞質，胞質濃染(Χ200)圖3為卡託普利組I型膠原表達，膠原含量少，排列整齊(Χ200)圖4為非卡託普利組I型膠原表達，膠原含量多，排列紊亂(Χ200)
具體實施例方式以下實施例僅用於闡述本發明，而本發明的保護範圍並非僅僅局限於以下實施方式。所述技術領域的普通技術人員依據以上本發明的公開內容，均可實現本發明的目的。卡託普利乳膏的製備基質按重量比硬脂酸4-10%，司盤1-2%，十八醇4-10%，液體石蠟6-12%，白凡士林4-10%配製溶液甲；吐溫3-10%，甘油4-20%，山梨酸0. 2%，蒸餾水50-70%配製溶液乙。將甲、乙兩液分別加熱至80°C，將乙液緩緩加入甲液中，攪拌至近凝，得基質備用。按重量比將蒸餾水80-88%溶解卡託普利6-20%;在該溶液中加入等量基質，冷凝既得3-10%卡託普利乳膏。
實驗例將上述實施方式中製得的卡託普利乳膏產品對不同情況病例實施所得實驗結果如下實驗例1 病理性瘢痕患者臨床治療應用選擇整形外科醫院就診的病理性瘢痕患者30例，標本為燒傷後5-8個月病理性瘢痕需經整形手術治療的標本，其中男性12例，女性18例；年齡17-39歲；瘢痕部位分別為耳垂、胸部、腿部。使用方法5%卡託普利乳膏外用瘢痕部位，3次/天，每次5-lOOmg/cm2。 使用後分別於0. 5小時、1小時、2小時監測血壓；使用3個月後評定瘢痕治療情況，分別為效果佳、改善、無效、嚴重。患者使用3-7個月後，未發生皮膚的過敏反應及其他不良反應， 未監測到血壓明顯波動情況。大體觀察及組織學觀察可見經卡託普利治療的瘢痕色澤暗紅，表面隆起，質地較軟；而非卡託普利治療的瘢痕顏色較紅，表面粗糙，質地較硬。組織學觀察可見經卡託普利治療的病理性瘢痕膠原含量較少，排列整齊；而非卡託普利治療的病理性瘢痕膠原含量多，排列紊亂。瘢痕評價結果為22例患者效果佳，8例效果改善。改善率 100%，明顯改善率73. 3%。實驗例2 術後患者預防性應用選擇整形外科醫院就診的手術患者30例，針對傷口部位進行預防性應用。其中男性15例，女性15例，年齡6-33歲。使用方法5%卡託普利乳膏外用手術傷口部位，3次/ 天，每次5-lOOmg/cm2。使用後分別於0. 5小時、1小時、2小時監測血壓；使用3_6個月後評定瘢痕治療情況，分別為瘢痕增生嚴重、中度增生、無增生。患者使用3-7個月後，未發生皮膚的過敏反應及其他不良反應，未監測到血壓明顯波動情況。四例未發生瘢痕增生，1例患者傷口中度增生，繼續使用3個月後出現症狀改善。預防增生效果非常明顯。實驗例3 =MTT檢測實驗分為4組，KO代表對照組，KU K5、KlO分別代表藥物濃度為1、5、10 μ g/L的實驗組，MTT1-5分別代表5個瘢痕疙瘩樣本的成纖維細胞。實驗分組後，(1)用0. 25%胰蛋白酶消化細胞使其成為單細胞，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培養液配成1X109細胞/L的單細胞懸液，將細胞接種於96孔培養板中，每孔100 μ L。(2)將培養板置C02孵箱中，在37°C 5% C02條件下，培養3 5天。(3)培養3 5天後，每孔加入MTT溶液(將 MTT按5mg/mL溶於0. 01mol/L, pH7. 2的PBS中，輕輕吹打至全部溶解，過濾除菌，4°C避光保存，保存時間一般不超過兩周)10 μ L，繼續置培養箱孵育3 6小時，終止培養，加10% SDS-HCl 100 μ L/孔37°C數小時，使細胞內和細胞周圍的MTT顆粒充分溶解。(4)用酶聯免疫檢測儀測定各孔光吸收值(OD)，選波長490nm，在酶聯免疫檢測儀上測定各孔吸光度值。 數據表明藥物對細胞生長有直接抑制作用，隨著劑量增加，MTT數值下降(表1)。表1不同藥物濃度的MTT值
權利要求
1.卡託普利作為製備治療和/或預防瘢痕增生性疾病的藥物中的應用。
2.如權利要求1所述的卡託普利的應用，其特徵在於所述的疾病為增生性瘢痕。
3.如權利要求1所述的卡託普利的應用，其特徵在於所述的疾病為瘢痕疙瘩。
4.如權利要求1所述的卡託普利的應用，其特徵在於所述的疾病為尿道瘢痕性狹窄。
5.如權利要求1所述的卡託普利的應用，其特徵在於所述的疾病為矽凝膠假體隆胸術後包膜攣縮。
全文摘要
本發明涉及了卡託普利在製備治療和/或抑制瘢痕增生性疾病的應用。具體的說，所述的疾病為增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、尿道瘢痕性狹窄和矽凝膠假體隆胸術後包膜攣縮。在治療上述疾病時，以卡託普利為活性成分，以常規的製劑工藝，製備成臨床上使用的各種不同劑型的乳膏、凝膠、注射液等。本發明的研究表明，卡託普利能降低病理性瘢痕成纖維細胞膠原蛋白合成及分泌膠原蛋白能力，減弱成纖維細胞的增殖能力，下調TGF-β1表達，對於病理性瘢痕具有良好的治療或預防作用。同時，本發明具有直接作用於瘢痕組織，劑量小、療效高、副作用小，原料工藝成熟、易得、價格便宜等優點，有望成為臨床上主要的瘢痕治療和預防藥物。
文檔編號A61P17/02GK102335167SQ20101023967
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月28日 優先權日2010年7月28日
發明者嚴笠, 劉學紅, 莊洪興, 潘博, 蔣海越, 郄淑燕 申請人:中國醫學科學院整形外科醫院