抗微生物融合化合物及其用途
2023-12-11 22:36:47 1
抗微生物融合化合物及其用途
【專利摘要】本發明涉及一種融合蛋白，其包含至少一種1型核糖體失活蛋白，多肽B；以及至少一種能抑制病毒進入的多肽A；和/或至少一種陽離子抗微生物肽，多肽C。
【專利說明】抗微生物融合化合物及其用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及抗微生物融合化合物，特別是多肽，及其片段，並涉及其在微生物感染中作為治療劑的用途。
【背景技術】
[0002]微生物感染會影響人類和動物並在全世界導致高水平的發病。微生物感染物包括原生動物寄生蟲，細菌和真菌，對此通常可用抗微生物藥劑。然而，某些抗微生物藥劑附有不良副作用，且這類藥劑的微生物抗性問題是日益嚴重的問題。
[0003]微生物感染物也包括病毒，其是困擾人類以及人類伴侶動物還有專門飼養用作人類食物的動物的許多廣泛傳播疾病的起因。大多數目前可用的用於人治療應用的抗病毒藥物性質上是單功能的並僅阻礙一個特定的病毒途徑，例如，病毒進入宿主細胞，病毒基因組融合或整合入宿主細胞基因組，以適合整合入感染的宿主細胞基因組的形式的病毒ssRNA至dsDNA的翻譯或反轉錄。因此，一旦病毒獲得對單功能抗病毒藥物的抗性，藥物就失去其效用。
[0004]而且，目前沒有對多種動物病毒有效的療法，包括例如白斑綜合症病毒(WSSV)，豬流行性腹瀉病毒(PEDV)，豬繁殖與呼吸綜合症病毒(PRRSV)等。已知這些動物病毒特別影響對蝦和豬產業。每年這些病毒中每種造成的損失相信超過10億美元。
[0005]由於其高突變率，對這些病毒和大多數其他病毒的有效疫苗難以開發。而且，對一個地理小種起作用的疫苗也經常對相同病毒的其他地理小種的作用不佳。
[0006]抗病毒藥物的例子包括恩夫韋地(羅氏以FUZEON?的商品名銷售)，其為Hiv-1融合抑制劑。恩夫韋地是合成生產的修飾蛋白，並被報導指其是每年每人花費在25000美元區間中的昂貴治療方 式。由於其是每天兩次以皮下注射引入體內，其施用方式也非常不便。
[0007]抗病毒藥物的另外例子包括奧司他韋(也以其商品名TAMTFLU?公知),其能通過阻止病毒化學切割與其宿主細胞連接，來減緩流感(流感)病毒在體內細胞間的傳播。自1999年TAMTFLU:?已在超過5千萬人身上被用於治療和防止甲型流感病毒和乙型流感
病毒感染，並且其是以膠囊或者作為懸液口服的。然而，現在有許多抗TAMIFLU?的甲型流感病毒和乙型流感病毒的毒株。扎那米韋(也以其商品名RELENZA?.公知),作為神經氨酸酶抑制劑作用的另一種抗病毒藥物被用於治療和預防甲型流感病毒和乙型流感病毒。REL.ENZA?為通過吸入施用。本領域公知抗病毒藥物TAMTFLU?和生產依賴於不能被經濟合成的原料莽草酸。事實上，之前羅氏已經做出數個抗病毒藥物TAMiFLU⑧和RELENZA?產量可能嚴重受限於莽草酸的供應的新聞稿。
【發明內容】
[0008]本發明在所附獨立權利要求中限定。本發明的某些可選特徵在所附從屬權利要求中限定。
[0009]根據本發明的一個方面，提供了一種融合蛋白，其包含至少一種I型核糖體失活蛋白或其片段，多肽B;以及
[0010](i)至少一種能抑制病毒進入的多肽A ;和/或
[0011](ii)至少一種陽離子抗微生物肽(CAP)或其片段，多肽C。
[0012]所述多肽A可以為Θ防禦素，其類似物，或其片段。
[0013]特別地，根據本發明任一方面的融合蛋白可以是適合口服施用的。
[0014]根據本發明 的另一個方面，提供了一種藥物組合物，其包含根據本發明任一方面的融合蛋白。
[0015]根據本發明的再一個方面，提供了在有需要的脊椎動物，無脊椎動物或植物中治療和/或預防微生物感染的方法，包括給脊椎動物，無脊椎動物或植物施用有效量的根據本發明任一方面的融合蛋白或藥物組合物的步驟。特別地，所述微生物感染可以是病毒感染。所述脊椎動物可以為哺乳動物，魚類或鳥類。甚至更特別地，哺乳動物可以為非人動物。
[0016]從下面的說明中顯而易見，本發明優選實施方式融合蛋白具有最佳效果和廣譜治療，和/或如一些應用，允許蛋白質的口服遞送。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0017]現在將參考附圖通過舉例的方式描述所述融合蛋白的優選實施方式，其中:
[0018]圖1 為 RetroMADl 的翻譯圖(SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO:2)。
[0019]圖2的圖顯示了大腸桿菌BL21 (DE3)細胞中A)時間過程表達和B)RetroMADl表達溶解度。在誘導前(Oh)收穫容有pRMD的細胞，且誘導後lh，2h，3h代表沉澱相，帶星號(*)的小時數代表上清液相。在15%SDS_PAGE中分析蛋白。M:PageRuler? Fermentas蛋白梯，U:未誘導的，IND:誘導的，和IB:純化的包含體。箭頭指示大腸桿菌生產的RetroMADl(41.2kDa)。
[0020]圖3的圖顯示了經過以RetroMADl孵育24和48小時的孵育期，(A)在MOI=0.1時對HSV-1，(B)在MOI=0.5時對HSV-1的每個處理中病毒拷貝體的數量降低。
[0021]圖4的圖顯示了經過以RetroMADl孵育24和48小時的孵育期，(A)在MOI=0.1時對HSV-2，(B)在MOI=0.5時對HSV-1的每個處理中病毒拷貝體的數量降低。
[0022]圖5的圖顯示了經過以RetroMADl孵育24和48小時的孵育期，(A)對DENV1，(B)在Μ0Ι0.1時對DENV2，和在Μ0Ι0.5時對DENV2，(C)對DENV3以及(D)對DENV4的每個處理中病毒拷貝體的數量降低。
[0023]圖6的圖顯示了在以RetroMADl經72小時孵育後同時處理PBMC的正常細胞數。
[0024]圖7的圖顯示了在72小時孵育後同時處理非霍奇金淋巴瘤PBMC的細胞數。
[0025]圖8的圖顯示了在24小時，48小時和96小時終點時測量的RetroMADl細胞毒性。所有的值被表示為三個重複試驗的平均值土標準偏差。哺乳動物細胞系=(A)VeiO, (B)LLC-MK2，和(OBHK-21細胞系的最大非毒性劑量為ΙΟΟμ g/ml。
[0026]圖9的圖顯示了在24小時，48小時和96小時終點時測量的RetroMADl細胞毒性。所有的值被表示為三個重複試驗的平均值土標準偏差。人細胞系:(A)RWPE-1，(B)張氏肝細胞系，(ONL-20, (D) 184B5和(E) CCD-1127SK細胞系的最大非毒性劑量為ΙΟΟμ g/ml。[0027]圖10(A)顯示了凝膠圖，其中441bp大小的條帶顯示感染了 HPV的對照個體對蝦。22/23為HPV陽性。
[0028]圖1OB顯示了凝膠圖，其中處理過的個體蝦僅僅2/24感染了 HPV。22/24的個體蝦為HPV陰性。
[0029]圖11的圖顯示了試驗感染WSSV蝦的存活百分數，左邊為對照而右邊為處理過的。
[0030]圖12A和B為使用捕獲ELISA測定貓血清中RetroMADl濃度的標準曲線。
[0031]圖13A的圖顯示了從捕獲ELISA得到的對照和處理的小鼠血清中RetroMADl的濃度。
[0032]圖13B的圖顯示了用於導出圖13 (A)中血清RetroMADl濃度的三份數據，其確認了結果有極好的一致性。
[0033]圖14為顯不RetroMADl熱穩定性的SDS-page結果。
[0034]圖15 為使用 HPLC 的層析圖，顯示(A)PBS 對照，(Β)50 μ g/ml，(C) 100 μ g/ml，(D)200μ g/ml, (E) 400 μ g/ml 和(F) 500 μ g/ml 的 RetroMADl 峰。
[0035]圖16為凝膠圖，其顯示了誘導前後AB，BA，BC和CB的表達。在15%SDS_PAGE上分析蛋白。M:未染色蛋白標記物(Fermentas )。
[0036]圖17的圖顯示了有A-B，B-A，B_C和C-B結構的肽的抗單純皰疹病毒_2 (HSV-2)抗病毒活性。
[0037]圖18的圖顯示了使用噬菌斑減少試驗測定Amatilin藥物對HSV-2的抑制活性(如實施例19中所述)。
[0038]圖19為四幅圖，每幅顯示了用如實施例17中所述的Amatilin, Catadarcin,Kudapan和RetroMADl處理的病毒DNA減少百分數。
【具體實施方式】
[0039]定義
[0040]為方便起見，這裡收集了說明書，實施例和所附權利要求中使用的某些術語。
[0041 ] 本發明上下文中使用的術語「佐劑」是指免疫佐劑。這樣，佐劑是指能增強或促進對所考慮組分的免疫系統反應，由此在對象中誘導免疫反應或免疫反應系列的化合物。佐劑可以通過形成存儲庫(延長組分的半衰期)來促進治療組合物的效果，提供額外的T細胞輔助並刺激細胞因子的產生。如果抗原分子只是弱抗原性的或者與免疫系統的化合物，分子，或細胞僅發生弱到中度的相互作用，在某些情況下，可能需要通過佐劑的抗原存活和非特異性刺激輔助。
[0042]本發明上下文中使用的術語「類似物」是指可以通過改變胺基酸序列來修飾以包含一個或多個天然存在的和/或非天然存在胺基酸的肽，只要該肽類似物能夠減少或防止微生物生長或殺死微生物。例如，術語「類似物」涵蓋有一個或多個保守胺基酸改變的抑制肽。術語「類似物」也涵蓋有包含，例如一個或多個D-胺基酸的肽。這樣的類似物具有例如蛋白酶抗性的特性。類似物也包括肽模擬物，如其中一個或多個肽鍵已被修飾的。優選的類似物包括根據本發明任意實施方式描述的，含有一個或多個非天然存在的胺基酸類似物的肽類似物。
[0043]本發明上下文中使用的術語「抗微生物」是指本發明的肽或其類似物或衍生物的生物活性，並表示本發明的蛋白有殺死微生物，幹擾繁殖或以別的方式使微生物不能生長的能力。本發明的肽或其類似物或衍生物能夠殺死微生物和/或減少或防止微生物生長，即，肽具有殺微生物活性和/或抑微生物活性。肽可以是用於治療或防止微生物感染的藥物，化合物或分子，包括根據本發明任意實施方式的融合蛋白。測定肽或其類似物或衍生物抗微生物活性的方法對本領域技術人員顯而易見和/或在本發明中描述。例如，將肽或類似物或衍生物施加到微生物之前已經生長其上的平板上，並在適合的時間段之後，測定微生物的生長抑制和/或細胞死亡水平。
[0044]本發明上下文中使用的術語「包括」是指在實踐本發明時可以被相連使用的各種成分，組分，或步驟。因此，術語「包括」涵蓋了更嚴格的術語「基本由……組成」和「由……組成」。對術語「基本由……組成」，理解為本發明的表位/抗原「大體上」包括所示的序列作為「基本」的要素。其他的序列可以被包含在5』端和/或3』端。因此，對於偶然含有序列X的已知多肽，基本由序列X組成的多肽會是新穎的。對術語「由……組成」，理解為根據本發明的多肽，多核苷酸和/或抗原對應所示序列中的至少一個(例如以SEQ ID號表示的特定序列或其同源序列或片段)。
[0045]本發明上下文中使用的術語「衍生物」包括，如所述肽的片段或被加工的形式，相對所述肽包含一個或多個胺基酸取代，缺失或添加的變體或突變體，包含所述肽的融合蛋白，或相對所述肽包含一種或多種其他非肽成分，如化學成分如聚乙二醇(PEG)的肽。術語「衍生物」也涵蓋了包括根據本發明的融合蛋白的多肽。例如，該多肽包括標籤，如，例如，表位，如FLAG表位或V5表位或HA表位。例如，表位為FLAG表位。這樣的標籤可用於，例如，純化多肽。本發明抗微生物融合蛋白的優選衍生物具有增強的穩定性。例如，在融合蛋白要施用的對象中有活性的蛋白酶的切割位點被突變和/或缺失，以產生本發明抗微生物融合蛋白的穩定衍生物。術語「衍生物」也涵蓋被衍生的肽，如，例如被修飾以含有一個或多個非胺基酸化學基團的肽。所述化學基團可以通過氨基末端胺基酸殘基，羧基末端胺基酸殘基，或者在內部胺基酸殘基上被共價連接到肽。這樣的修飾包括在肽的活性基團上添加保護性或封端基團，添加可檢測標記，和不會不利破壞肽化合物活性的其他變化。
.[0046]因此，可接受的胺基酸取代通常基於胺基酸側鏈取代基的相對相似性，例如，其疏水性，親水性，電荷，大小等。考慮前面數個特徵的示例性的取代是本領域技術人員公知的，其包括:精氨酸和賴氨酸；穀氨酸和天冬氨酸；絲氨酸和蘇氨酸；穀氨醯胺和天冬醯胺；以及纈氨酸，亮氨酸和異亮氨酸。可以以本領域已知的多種適合方法製備本發明的分離的多肽，包括製備多肽序列的典型化學合成方法。
[0047]本發明上下文中使用的術語「片段」是指根據本發明任意方面融合蛋白的全序列中的不完整的或分離的部分，其包含將蛋白的特徵和功能賦予序列的活性位點。特別是，其可以為更短到至少一個胺基酸。例如根據本發明融合蛋白的片段包含能使蛋白識別微生物的活性位點。片段可以為至少10個胺基酸長。例如，RIP的非限制性片段可以至少包含大小可約為5kDa的RIP核心或生物活性位點。
[0048]本發明上下文中使用的術語「融合蛋白」是指通過將兩個或更多個原來編碼每個蛋白的基因聯合而產生的蛋白。這樣融合基因的翻譯得到了具有源自每個初始蛋白的功能特性的單一多肽。重組融合蛋白通過重組DNA技術人工產生，用於生物研究和治療。例如，根據本發明任意方面的融合蛋白可以包括I型RIP，多肽B ;以及能夠抑制病毒進入的多肽A 和 / 或 CAP，多肽 C。融合蛋白的結構可以是 A-B-C，A-C-B, C-A-B, C-B-A, B-A-C, B-C-A,A-B-C-C, A-B, B-C, B-C-C或C-C-B-C-C。特別是，融合蛋白可以包含_ 聚體和/或串聯重複序列。更特別地是，根據本發明任意方面的融合蛋白可以是上述結構的重複體。例如，結構可以是A-A-B-C-C，C-C-B-C-C, A-A-B-A-A等。當重複時，每種融合蛋白中的多肽A，B或C可以是相同的蛋白或者可以是不同的蛋白。多肽A可以為Θ防禦素，其類似物，或其片段。根據本發明的融合蛋白可以包括SEQ ID NO:1，其變體、衍生物或片段。用於本發明中的術語「RetroMADI」是指有A-B-C結構並且胺基酸序列為SEQ ID NO:1的融合蛋白。特別是，在RetroMADl中多肽A可以為RetrocyclinlOl，多肽B可以為MAP30而多肽C可以為皮抑菌肽(Dermaseptin) I。這些肽可以被直接相互融合或者通過連接肽相互連接。
[0049]本發明上下文中使用的術語「連接肽」在本發明中與術語「連接物」可交替的使用。連接肽是共價或非共價連接兩個或更多個分子或肽，從而產生由包括連接肽在內的全部分子或肽組成的更大複合體的肽。連接肽的非限制性例子可以為SEQ ID NO=Il0
[0050]本發明上下文中使用的術語「微生物感染」是指微生物在其他生物中或上的侵入，生長和/或增殖。微生物感染可以局限於生物或全身的特定區域。本發明的融合肽，類似物和/或衍生物用於治療的感染包括由任何微生物例如但不限於細菌，真菌，酵母菌，原生動物和病毒引起的，影響哺乳動物，無脊椎動物，脊椎動物和/或植物的任何感染。技術人員應理解什麼被認為是微生物感染。特別是，本發明的融合蛋白或類似物或衍生物或製劑可用於治療病毒感染。所述病毒的例子包括但不限於麻疹病毒，單純皰疹病毒(HSV-1和-2)，皰疹病毒家族成員(HIV，C型肝炎，水泡性口膜炎病毒(VSV)，綿羊髓鞘脫落病毒，巨細胞病毒(CMV)等。
[0051]本發明上下文中使用的術語「微生物」涵蓋了任何微小的生物或微生物。例如，但不限於，微生物包括細菌，古細菌，病毒，酵母菌，真菌或原生動物。特別地，微生物為病毒。病毒可以包括但不限於巨細胞病毒(CMV)肺炎，腸炎和視網膜炎；埃潑斯坦-巴爾(Epstein-Barr)病毒(EBV)淋巴增殖疾病；水痘/帶狀皰疹(由水痘-帶狀皰疹病毒，VZV引起)；HSV-1和-2黏膜炎；HSV-6腦炎；BK病毒出血性膀胱炎；病毒性流感；呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎；AIDS (由HIV引起)；以及甲型，乙型或C型肝炎。其他病毒例子包括但不限於逆轉錄病毒科；小核糖核酸病毒科(例如，脊髓灰質炎病毒，A型肝炎病毒，腸道病毒，人柯薩奇病毒，鼻病毒，艾柯病毒);杯狀病毒科(Calciviridae)(如引起腸胃炎的毒株);披膜病毒科(例如，馬腦炎病毒，風疹病毒);黃病毒科(Flaviridae)(例如，登革熱病毒，腦炎病毒，黃熱病毒)；冠狀病毒科(例如，冠狀病毒)；彈狀病毒(例如，水皰性口炎病毒，狂犬病毒)；絲狀病毒科(例如，伊波拉病毒)；副粘病毒科(例如，副流感病毒，腮腺炎病毒，麻疹病毒，呼吸道合胞體病毒)；正粘病毒(如流感病毒)；布尼亞病毒科(Bungaviridae)(例如,漢坦病毒，布尼亞病毒(bunga viruses),白蛉熱和內羅病毒)；沙粒病毒科(出血熱病毒)；呼腸孤病毒科(例如，呼腸孤病毒，環狀病毒和輪狀病毒)；雙RNA病毒科；肝0嫩病毒科(B肝病毒),細小病毒科(細小病毒);乳多空病毒科(乳頭狀瘤病毒，多瘤病毒);腺病毒科(多數腺病毒);皰疹病毒科(單純皰疹病毒(HSV)I和HSV-2，水痘-帶狀皰疹病毒，巨細胞病毒(CMV)，皰疹病毒);痘病毒科(天花病毒，牛痘病毒，痘病毒);和虹彩病毒科(如非洲豬瘟病毒)；以及未分類的病毒(例如，海綿狀腦病病原因子，丁型肝炎因子(被認為是B型肝炎病毒的缺陷衛星病毒)，非甲型非B型肝炎因子(I類=體內傳播；2類=非腸道傳播(B卩，C型肝炎)；諾沃克及相關病毒，星狀病毒)。
[0052]例如，病毒可以是特異對水產養殖業的，如但不限於如甲殼類病毒如WSSV，HPV,MBV, IHHNV, YHV, TSV, GAV, LSNV, IMNV, MoV, KHVl，KHV2, KHV3, VNN。特異對水產養殖業的病毒可以包括來自雙RNA病毒科,皰疫病毒科,虹彩病毒科，逆轉錄病毒科或彈狀病毒科家族中的任意一種魚類病毒。特別地，魚類病毒可以是來自雙RNA病毒科家族的胰腺壞死病毒(IPNV)，來自皰疹病毒科家族的水道貓魚病毒(CCV)，來自虹彩病毒科家族的淋巴囊腫病毒(FLDV),屬於彈狀病毒科家族的造血組織壞死病毒(IHNV)和病毒性出血敗血症病毒(VHSV)等。鮑魚病毒包括-MG，AMAV等。
[0053]例如，病毒可以是特異對家禽的，如但不限於引起禽痘，雞新城疫，傳染性支氣管炎，鵪鶉支氣管炎，雞馬立克氏病(內臟白血病)，淋巴白血病，傳染性法氏囊病，禽流感，流行性震顫等的病毒。
[0054]例如，病毒可以是特異對豬的，如但不限於豬戊型肝炎病毒，圓環病毒，皰疹病毒等。特別地，病毒可以是豬巨細胞病毒，偽狂犬病毒。
[0055]對貓重要的病毒包括但不限於貓泛白細胞減少症病毒(FPV)，貓皰疹病毒，貓杯狀病毒，貓白血病病毒(FeLV)，貓免疫缺陷病毒(FIV)等。病毒可以是特異對狗的，且其可以包括但不限於狂犬病病毒，犬細小病毒，犬冠狀病毒，犬瘟熱病毒，犬流感病毒，犬肝炎病毒，犬皰疹病毒，導致偽狂犬病的病毒，犬極小病毒等。
[0056]本發明上下文中使用的術語「多肽」是指長的，連續的，無分枝的肽並包括環狀多肽。蛋白由一個或多個按生物功能方式排列的多肽組成並經常可以與輔助因子，或其他蛋白連接。特別地，根據本發明任意方面的蛋白可以是天然存在的，從頭和/或合成的。
[0057]本發明上下文中使用的術語「對象」是指可能被微生物感染的任何動物，包括人，非人動物，植物或昆蟲。特別地，對象為可能被微生物感染的任何動物，包括人，植物或昆蟲，本發明的融合蛋白或類似物或衍生物對該微生物有活性。
[0058]本發明上下文中使用的術語「治療」是指防止，緩解，治療性或治癒性治療。
[0059]本發明上下文中使用的術語「變體」交替或附加的以對其衍生來源母多肽一定程度的序列同一性為特徵。更準確的，本發明上下文中的變體顯示至少30%的序列同一性，特別地，至少40 %，50 %，60 %，70 %，80 %或90 %的序列同一性。更特別地，本發明的上下文中的變體顯示與其母多肽至少95%的序列同一性。本發明的變體顯示所示的序列同一性，而優選的序列同一性在超過100，150，200，300，315，320，330，340，344個或更多個胺基酸的連續延伸上。核苷酸和胺基酸序列的相似性，即序列同一性百分數可以通過序列比對確定。可以以多種本領域已知的算法進行這樣的比對，優選用Karlin和Altschul的數學算法(Karlin&Altschul (1993)Proc.Natl.Acad.ScL USA90:5873-5877)，用 hmmalign(HMMER包，http://hmmer.wustl.edu/)或用如在 http://www.eb1.ac.uk/Tools/clustalw/ 上可用的CLUSTALo 優選使用的參數為如 http://www.eb1.ac.uk/Tools/clustalw/ 或 http://www.eb1.ac.uk/Tools/clustalw2/index, html 上設置的默認參數。可以使用如 BLAST,BLAT 或BlastZ (或BlastX)來計算序列同一性級別(序列匹配)。優選的，序列匹配分析由有已建立的同源繪圖技術如 Shuffle_LAGAN(Brudno M.,Bioinformatics2003b, 19Suppll: 154-162)或Markov隨機場補充。當本申請中提及序列同一性百分數時，如果沒有特別指出其他的方式，這些百分數是對於更長序列的全長計算。[0060]本領域技術人員會理解根據本發明給出的方法可以無需過多試驗來實踐本發明。方法，技術和化學藥品如給出的參考文獻中所描述或來自標準生物技術和分子生物學教科書的方案。
[0061 ] 在本發明的一個方面，提供了至少一種融合蛋白，其包含I型RIP或其片段，多肽B ;以及
[0062](i)至少一種能抑制病毒進入的多肽A ;和/或
[0063](ii)至少一種CAP或其片段，多肽C。
[0064]根據本發明第一方面的融合蛋白也可以包括變體或衍生物。術語「變體」和「衍生物」如上定義。多肽A可以是Θ防禦素，其類似物或片段。
[0065]陽離子抗微生物肽(CAP)可以是在病毒融合抑制，病毒基因抑制，病毒膜中斷和/或病毒進入抑制中起關鍵作用的抗病毒CAP。CAP最大可以100個胺基酸長。CAP可以大多為動物來源。然而，也有來源於植物的CAP，包括但不限於環肽(cyclotides)。例如可以作為融合抑制物作用的細菌CAP可以包括但不限於Siamycin，NP-06和短桿菌肽(Gramicidin)A。可以作為融合抑制物作用的植物CAP可以包括環狀桿菌素(Circulin)A、B7Kalata BI和B8 ;可以作為進入抑制物作用的植物CAP可以包括Kalata B8 ;可以作為病毒基因抑制物作用的植物CAP可以包括銀杏抗菌蛋白基因(Ginkbilobin)，a -Basrubin,Lunatusin和防禦蛋白樣蛋白(Sesquin)。可以作為病毒膜中斷物作用的植物CAP可以包括環狀桿菌素(Circulin) A、C 和 D, Tricyclon A 和環紫菌素(cycloviolacin) H4。可以作為融合抑制物作用的動物CAP可以包括鱟肽(Polyphemusin) I和II，hfl_B5，內源性抗微生物多肽(Protegrins)(豬 Cathelicidin)，大鼠防禦素 NP1，NP2，NP3 和 NP4，人 β -防禦素 I 和 II，Temporin A, Temporin-LTc, Temporin-Pta, Caerinl.1, Ranatuerin6 和 9,爬行動物防禦素以及毒魚豆素(Piscidin) I和2 ;可以作為進入抑制物作用的動物CAP可以包括乳鐵素B，兔中性粒細胞-1，皮質穩定素Illa，兔中性粒細胞-3A，兔α -防禦素，Retrocyclin-1, Ret rocyclin-2, Retrocyclin-3,人 α -防禦素 HNP-1, 2, 3,4, 5 和 6,人β-防禦素III (HBD3)，恆河猴小防禦素(minidefensin) (RTD-1, Θ防禦素)，RTD-2恆河猴Θ防禦素，RTD-3恆河猴Θ防禦素，人中性粒細胞肽-2，人中性粒細胞肽-3和人中性粒細胞肽-4 ;可以作為病毒基因抑制物作用的動物CAP:殺菌肽(Cecropin) A，蜂毒肽(Melittin), EP5-1,馬加寧(Magainin) 2, hepcidin TH1-5 和 Epinecidin-1 ;可以作為病毒膜中斷物作用的動物CAP可以包括Π引哚菌肽(Indolicidin), Cathelicidin-4,人中性粒細胞妝 _1，LL_37Cathelicidin,皮抑菌妝(Dermaseptin) SI, S4 和 S9, Maximinl, 3,4 和5, Brevininl, Ranatuerin2P,6 和 9, Esculentin2P, Esculentin-lArb, Caerinl.1, 1.9 和4.1, Brevinin-2-相關，Maculatinl.3, Maximin H5 以及毒魚豆素(Piscidin) I 和 2。其他 CAP 可以包括 Mundticin KS 恩特洛黴素(Enterocin) CRL-35，Lunatusin, FK_13(GI_20為衍生物)，速普肽(Tachyplesin) I, a -MSH,抗病毒蛋白Υ3,毒魚豆素3, Palustrin_3AR,Ponericin L2, Spinigerin, Melectin, Clavanin B,牛 cathelicidin BMAP-27, BMAP-28,膝鼠cathelicidin CAP11,沙克乳桿菌細菌素(Sakacin) 5X,菌絲黴素(Plectasin),真菌防禦素，GLK-19,乳鐵蛋白(Lf)肽 2, Kalata B8, Tricyclon A, _蜆抗病毒肽(Alloferon)l，Uperin3.6,Dahlein5.6, Ascaphin-8,人富組蛋白(Histatin)5,豚鼠中性粒細胞 CAP2 和CAP1,厚殼貽貝抗菌肽(Mytilin) B和C,EP5_1和六肽(合成)皮質穩定素(Corticostatin)IV兔中性粒細胞2。
[0066]I 型 RIP 可以:
[0067](i )作為RNA N-糖苷酶作用，該酶水解真核生物核糖體中283_1^應普遍保守的八疊球菌(sarcin) /菌麻毒蛋白(ricin)結構域(S/R結構域)4324位置處的腺苷N-C糖苷鍵並使其不能進行蛋白合成，由此功能性阻斷翻譯，
[0068](ii)通過其多核苷酸:腺苷糖苷酶活性的方式直接作用於病毒顆粒或病毒核酸，和/或
[0069](iii)作為DNA糖基化酶/嘌呤(AP)裂解酶作用，該酶能夠不可逆放鬆HIV-1超螺旋DNA並催化雙鏈的斷裂，形成無活性產物。
[0070]特別地，I型 RIP 可以選自由 a-Ebulitin，β-Ebulitin，Y -Ebulitin,Nigritin fl，Nigritin f2，Amarandin-S,覓抗病毒 /RIP, Amarandin-l，Amarandin-2,覓色素(Amaranthin)，濱藜(Atriplex patens) RIP，甜菜 RIP，β -vulgin,雞冠花 RIP，藜 RIP，CAP30B，菠菜(Spinacea oleracea) RIP，Quinqueginsin，Asparin-1, Asparin-2，麥仙翁毒蛋白(Agrostin),石竹素(Dianthin) 29，DAP-30，DAP-32，石竹素30，石竹(Dianthus chinensis) RIPl，石竹 RIP2，石竹 RIP3，剪秋羅苷(Lychnin)，Petroglaucin,Petrograndin,巖生肥阜草(Saponaria ocymoides) RIP，Vacuolas 阜草素(saporin)，阜草素-1，皂草素_2，皂草素_3，皂草素-5，皂草素-6，皂草素-7，皂草素-9，麥藍菜(Vaccariahispanica) RIP，Benincasin，a-Benincasin，β-Benincasin，Hispin，Byrodin IiByrodinII，大腸桿菌素(Colocin) I，大腸桿菌素 2，黃瓜(Cucumis figarei) RIP, Melonin,南瓜(C.moschata)RIP，Cucurmosin，廣香銷素(Moschatin)，廣香銷素I，廣香銷素II，廣香銷素III，廣香銷素IV，廣香銷素V，Pepocin，絞股藍毒蛋白(Gynostemmin) I，絞股藍毒蛋白II，絞股藍毒蛋白III，絞股藍毒蛋白IV，絞股藍毒蛋白V，絞股藍(Gynostemma pentaphyllum)RIP, Gypsophilin, Lagenin, Luffaculin，Luffangulin,絲瓜素(Luffin)-α，絲瓜素-B，MOR-1, MOR-1I,木鱉子苷(Momordin) II，α -苦瓜素(Momorcharin), β _ 苦瓜素，Y δ-苦瓜素，Y -苦瓜素，木鱉根蛋白(Momorcochin)，木鱉根蛋白-S，佛手瓜蛋白(Sechiumin), Momorgro svin，蛇瓜毒蛋白(Trichoanguin)，a -Kirilowin, β -Kirilowin,α _ 天花粉蛋白(trichosanthin)，TAP-29，括樓素(Trichokirin)，Trichomislin，天花粉蛋白，Karasurin-A，Karasurin-B，馬乾鈴蛋白(Trichomaglin)，Trichobakin，巴豆毒蛋白(Crotin) 2，巴豆毒蛋白3，Euserratinl, Euserratin2,抗病毒蛋白GAP-31，白樹毒素(Gelonin)，沙盒樹(Hura crepitans) RIP,麻瘋樹毒蛋白(Curcin)，麻瘋樹(Jathropacurcas) RIP, Mapalmin，Manutinl, Manutin2，a -pisavin, Charibdin，風信子(Hyacinthusorientalis) RIP，Musaminl, Musamin2，Musamin3，Musamin4，荷蘭鸞尾(Iris hollandica)RIP， Cleroendrum aculeatum RIP， CIP-29， CIP-34， Crip-31, Bouganin，三角梅(Bougainvilla spectbilis)RIP，雜交(紅)葉子花(Bougainvillea x buttiana)抗病毒蛋白 I (BBAP1)，蘋果酸酶(ME1)，ME2，MAP-S，美洲商陸抗病毒蛋白(PAPa-l)，PAPa-2，PAP-a，PAP-L PAP-1I, PAP-S, PD-SI, DP-S2，Dodecandrin，抗病毒蛋白 PAP，PIP, PIP2，八蕊商陸(Phytolacca octandra)抗病毒蛋白，八蕊商陸抗病毒蛋白II，大麥(Hordeum vuIgare)RIP-1，大麥RIP-1I，大麥亞種大麥翻譯抑制劑II，黑麥(Secale cerealdRIP，麥芽凝集素(Tritin)，二倍體多年生大會草(Zea diploperemis) RIP I，二倍體多年生大會草RIP II，蘋果(Malus X domestica)RIP，苦瓜抗HIV蛋白(MAP30)，大戟科多花白樹蛋白(Geloniummultiflorum) (GAP31),美洲商陸抗病毒蛋白(PAP),闊葉寄芋蛋白(Mirabilis expansa)I (ME1)，蘋果酸酶(ME2)，雜交(紅)葉子花抗病毒蛋白I (BBAP1)，噬菌體MUl，betavulgin(Bvg)，麻瘋樹毒蛋白 2，皂草素 6，玉米 RIP (B-32)，菸草 RIP (TRIP), Beetin (BE)，BE27，紫茉莉抗病毒蛋白(MAP)，天花粉蛋白(TCS)，α-絲瓜素，α-苦瓜素(α-MMC)，β-MMC絲瓜素，Ocymoidin, Bryodin, Pepopsin, β -天花粉蛋白，樟腦水楊酸鈉(Camphorin), YLP,島藤喊(Insularin),大麥 RIP,麥芽凝集素，Lamjarin,和草燕(Volvariella volvacea) RIP組成的組。
[0071]根據本發明任一方面的融合蛋白可以是能夠廣譜應用的抗微生物化合物，並且不像本領域已知的某些化合物，其可以不受原料供應的任何限制來經濟地生產。根據本發明任一方面的融合蛋白因此可以不受原料供應的任何限制來經濟地大規模生產。
[0072]為了獲得廣譜的活性，根據本發明任一方面的融合蛋白可以能以多種不同途徑，這就是說，以病毒進入抑制，病毒融合抑制，病毒整合酶抑制和病毒翻譯抑制來幹擾病毒感染和傳播過程。融合肽因此可以具有多功能性能。由此可以從根據本發明任一方面的融合蛋白來生產全新類型的抗病毒藥物。可以從作為融合抗病毒蛋白表達的多肽A，B和C獲得的組合和排列的數量潛在的數以萬計。
[0073]特別地，融合蛋白可以包括選自式1-XIII組成的組的至少一種結構式:
[0074]式1:A-B-C，
[0075]式II:A-B-C-C,
[0076]式III:A-B,
[0077]式IV:A-C-B,.
[0078]式V: C-A-B,
[0079]式VI:C-B-A
[0080]式VI1:C-B，
[0081]式VII1:B-A-C，
[0082]式IX:B-A-C-C,
[0083]式X: B-C-A,
[0084]式XI:B-A-C,
[0085]式XI1:B-C，
[0086]式XII1:B-A，
[0087]式XIV =C-C-B-C-C,
[0088]式XV: C-B-C。
[0089]其中多肽A可以為Θ防禦素，其類似物或片段，多肽B可以為I型RIP，或其片段，而多肽C可以為CAP，或其片段；而-可以為直接連接或連接肽。
[0090]特別地，連接肽可以包括多肽序列:[VPXVG]n，(SEQ ID NO:11)，其中X為未知的或其他胺基酸而η為每個連接肽中SEQ ID Ν0:11的重複數。例如，η可以是1，2，3，4或5。更特別地，SEQ ID NO:11中X為G而η為2。
[0091]特別地，融合蛋白可以包括式1:
[0092]A-B-C-[0093]其中多肽A為Θ防禦素，其類似物或片段，多肽B可以為I型RIP，或其片段，而多肽C可以為CAP，或其片段，而-可以為直接連接或連接肽。
[0094]更特別地，多肽A可以通過至少一個SEQ ID NO:11的第一連接肽與多肽B融合。甚至更特別地，多肽A可以通過SEQ ID N0:11的肽與多肽B融合，其中X為G而η為2。多肽B可以不用中間的連接肽直接連接到多肽C。式I中的多肽C可以在不連接B的游離段包括第二連接肽。第二連接肽可以包括式SEQ ID NO=Il0甚至更具體的，在第二連接肽中X為G而η為2。
[0095]多肽A可以是脊椎動物或無脊椎動物來源的Θ防禦素。特別地，Θ防禦素可以來自細菌，真菌，哺乳動物，兩棲類或爬行動物。哺乳動物可以是非人靈長類動物和/或無脊椎動物可以是鱟和/或昆蟲。Θ防禦素可以選自由來自獼猴的分別為SEQ ID NOs:15-20的恆河猴小防禦素(minidefensin) (RTD-1), RTD-2, RTD-3, Retrocyclin-1, Retrocyclin-2,Retrocyclin-3 等組成的組(Tang YQ, 1999; Leonava L, 2001; Wang W,2004)。
[0096]Θ防禦素可以是合成的並可以選自由序列分別為SEQ ID NOs:21_33的retrocyclin 同源物 RC100-RC108 和 RCl 10-RC114 組成的組(Cole 等 Λ, 2002:PNAS,V99(4):1813-1818;ffang 等人，2003:J.1mmunol.170:4708-4716)。 Retrocyclin (RC)100-108和RC110-114的序列示於下面表Ia中。
[0097]
【權利要求】
1.一種融合蛋白，其包含至少一種I型核糖體失活蛋白(RIP)或其片段，多肽B ;以及 (i)至少一種能抑制病毒進入的多肽A ;和/或 (?)至少一種陽離子抗微生物肽(CAP)或其片段，多肽C。
2.根據權利要求1所述的融合蛋白，其中所述多肽A為Θ防禦素，其類似物或片段。
3.根據權利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包括結構A-B-C，A-C-B,C-A-B，C-B-A，B-A-C，B-C-A, A-B-C-C, A-B，B-A，B-C，C-B，C-B-C,或 C-C-B-C-C。
4.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含多肽A，B和C。
5.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中所述多肽A，B和C直接相互連接。
6.根據權利要求1到5任一項所述的融合蛋白，其在所述多肽A，B和C每個之間進一步包含至少一個連接肽。
7.根據權利要求6所述的融合蛋白，其中所述連接肽具有SEQID NO=Il0
8.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中所述多肽A選自由恆河猴小防禦素(RTD-1), RTD-2, RTD-3, Retrocyclin-1, Retrocyclin-2, Retrocyclin-3,合成的Retrocyclin 同源物 RC100, RC101, RC102, R`C103, RC104, RC105, RC106, RC107, RC108,RCl 10，RC111, RCl 12，RCl 13 和 RCl 14 組成的組。
9.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中I型RIP(多肽B)選自由Ebulitins，Nigritins, Amarandins,覓抗病毒 /RIP,覓色素，濱藜 RIP,甜菜 RIP, β -vulgin,雞冠花 RIP7 藜 RIP, CAP30B,菠菜 RIP, Quinqueginsin, Asparins,麥仙翁毒蛋白，石竹素，DAPs,石竹的，剪秋羅苷，Petroglaucin, Petrograndin,巖生肥阜草 RIP, Vacuolas 阜草素，阜草素，麥藍菜 RIP, Benincasins, Hispin, Byrodins,大腸桿菌素，Cucumis f igareiRIP, Melonin,南瓜RIP, Cucurmosin,磨香蛾素，Pepocin,絞股藍毒蛋白，絞股藍RIP,Gypsophilin, Lagenin, Luffaculin, Luffangulin,絲瓜素，MORs,木鰵子苷 II,苦瓜素，木鰵根蛋白，木鰵根蛋白-S,佛手瓜蛋白，Momorgrosvin,蛇瓜毒蛋白，Kiri lowin, α -天花粉蛋白，ΤΑΡ-29,括樓素，Trichomislin,天花粉蛋白，Karasurin,馬乾鈴蛋白，Trichobakin,巴豆毒蛋白，Euserratin抗病毒蛋白GAP-31，白樹毒素，沙盒樹RIP，麻瘋樹毒蛋白，麻瘋樹 RIP, Mapalmin, Manutins, a -pisavin, Charibdin,風信子 RIP, Musamin,荷蘭鳶尾RIP, Cleroendrum aculeatum RIP, CIPs), Crip-31, Bouganin,三角梅 RIP,雜交(紅)葉子花抗病毒蛋白I (BBAP1)，蘋果酸酶，MAP-S，美洲商陸抗病毒蛋白(PAP)，PD-SI, DP-S2，Dodecandrin, PIP, PIP2，八蕊商陸抗病毒蛋白，大麥RIP，大麥亞種大麥翻譯抑制劑II，黑麥RIP，麥芽凝集素，二倍體多年生大芻草RIPs，蘋果RIP，苦瓜抗HIV蛋白，大戟科多花白樹蛋白，闊葉寄芋蛋白1，噬菌體MUl，betavulgin (Bvg)，麻瘋樹毒蛋白2，皂草素6，玉米RIP(B-32)，菸草RIP (TRIP), Beetins，紫茉莉抗病毒蛋白(MAP)，天花粉蛋白(TCS)，絲瓜素，苦瓜素，Ocymoidin, Bryodin, Pepopsin, β -天花粉蛋白，樟腦水楊酸鈉，YLP,島藤鹼,大麥RIP，麥芽凝集素，Lamjarin，和草菇RIP組成的組。
10.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中CAP蛋白(多肽C)選自由環肽，Siamycins, NP-06,短桿菌肽A,環狀桿菌素，Kalatas,銀杏抗菌蛋白基因，a-Basrubin,Lunatusin,防禦蛋白樣蛋白，Tricyclon A, Cycloviolacins,當肽，hfl-B5,內源性抗微生物多肽(豬 Cathelicidin)，大鼠防禦素，人 β -防禦素,Temporins, Caerins, Ranatuerins,爬行動物防禦素，毒魚豆素，乳鐵素B,兔中性粒細胞,兔α-防禦素，Retrocyclins,人α _防禦素，人β _防禦素III (HBD3),恆河猴minidefensin (RTD-1, Θ防禦素),恆河猴Θ防禦素，人中性粒細胞肽，殺菌肽As，蜂毒肽，EP5-1，馬加寧2s，雜種(CE-MA)，hepcidinTH1-5, Epinecidin-1, 口引哚菌肽，Cathelicidin-4, LL_37Cathelicidin,皮抑菌肽，Maximins, Brevinins, Ranatuerins, Esculent ins, Maculat in 1.3, Maximin H5 和毒魚豆素，Mundticin KS 恩特洛黴素 CRL-35，Lunatusin, FK-13 (G1-20 為衍生物)，速普肽，a-MSH，抗病毒蛋白 Υ3, Palustrin_3AR, Ponericin L2, Spinigerin, Melectin, Clavanin B,牛抗菌肽，豚鼠cathelicidin CAPlI，沙克乳桿菌細菌素5X，菌絲黴素，真菌防禦素，GLK-19，乳鐵(Lf)肽2,1?蜆抗病毒肽I, Uperin3.6, Dahlein5.6, Ascaphin-8,人富組蛋白5,豚鼠中性粒細胞，厚殼貽貝抗菌肽，EP5-1，六肽(合成)皮質穩定素IV兔中性粒細胞2，Aureins,Latarcin,菌絲黴素，Cycloviolins, Varv 妝 E, Palicourein, VHL-1,和 Buforins 組成的組。
11.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其中所述I型RIP為MAP30，所述CAP為皮抑菌肽而所述多肽A為Retrocyclin。
12.根據權利要求11所述的融合蛋白，其中所述皮抑菌肽為皮抑菌肽I而所述Retrocyclin 為 RetrocyclinlOl。
13.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，包括胺基酸序列SEQID N0:1。
14.根據前面權利要求任一項所述的融合蛋白，其適合口服施用。
15.一種分離的核酸分子，其能夠表達根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白。·
16.一種質粒或載體，其包含根據權利要求15所述的核酸分子。
17.一種宿主細胞，其包含根據權利要求15所述的核酸分子和/或根據權利要求16所述的質粒或載體。
18.—種生產根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白的方法，包括在表達融合蛋白的條件下培養根據權利要求17所述的宿主細胞。
19.一種藥物組合物，其包含根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白。
20.根據權利要求19所述的藥物組合物，其中所述組合物適合口服施用。
21.根據權利要求19或權利要求20所述的藥物組合物，其進一步包括至少一種藥學可接受載體，賦形劑，稀釋劑和/或表面活性劑。
22.根據權利要求21所述的藥物組合物，其中所述表面活性劑選自由熊去氧膽酸鈉，甘氨醯熊去氧膽酸鈉，熊去氧膽酸鉀，甘氨醯熊去氧膽酸鉀，熊去氧膽酸亞鐵，甘氨醯熊去氧膽酸亞鐵，熊去氧膽酸銨，甘氨醯熊去氧膽酸銨，牛磺熊去氧膽酸鈉，N-甲基甘氨醯熊去氧膽酸鈉，牛磺熊去氧膽酸鉀，N-甲基甘氨醯熊去氧膽酸鉀，牛磺熊去氧膽酸亞鐵，N-甲基甘氨醯熊去氧膽酸亞鐵，牛磺熊去氧膽酸銨，N-甲基甘氨醯熊去氧膽酸銨，N-甲基牛磺熊去氧膽酸鈉，N-甲基牛磺熊去氧膽酸鉀，N-甲基牛磺熊去氧膽酸亞鐵，N-甲基牛磺熊去氧膽酸銨，膽酸鈉，去氧膽酸鈉，膽酸鉀，去氧膽酸鉀，膽酸亞鐵，去氧膽酸亞鐵，膽酸銨，去氧膽酸銨，鵝去氧膽酸鈉，甘氨醯膽酸鈉，鵝去氧膽酸鉀，甘氨醯膽酸鉀，鵝去氧膽酸亞鐵，甘氨醯膽酸亞鐵，鵝去氧膽酸銨，甘氨醯膽酸銨，牛磺膽酸鈉，N-甲基甘氨醯膽酸鈉，牛磺膽酸鉀，N-甲基甘氨醯膽酸鉀，牛磺膽酸亞鐵，N-甲基甘氨醯膽酸亞鐵，牛磺膽酸銨，N-甲基甘氨醯膽酸銨，N-甲基牛磺膽酸鈉，甘氨醯去氧膽酸鈉，N-甲基牛磺膽酸鉀，甘氨醯去氧膽酸鉀，N-甲基牛磺膽酸亞鐵，甘氨醯去氧膽酸亞鐵，N-甲基牛磺膽酸銨，甘氨醯去氧膽酸銨，牛磺去氧膽酸鈉，N-甲基甘氨醯去氧膽酸鈉，牛磺去氧膽酸鉀，N-甲基甘氨醯去氧膽酸鉀，牛磺去氧膽酸亞鐵，N-甲基甘氨醯去氧膽酸亞鐵，牛磺去氧膽酸銨，N-甲基甘氨醯去氧膽酸銨，N-甲基牛磺去氧膽酸鈉，N-甲基甘氨醯鵝去氧膽酸鈉，N-甲基牛磺去氧膽酸鉀，N-甲基甘氨醯鵝去氧膽酸鉀，N-甲基牛磺去氧膽酸亞鐵，N-甲基甘氨醯鵝去氧膽酸亞鐵，N-甲基牛磺去氧膽酸銨，N-甲基甘氨醯鵝去氧膽酸銨，N-甲基牛磺鵝去氧膽酸鈉，N-甲基牛磺鵝去氧膽酸鉀，N-甲基牛磺鵝去氧膽酸亞鐵，N-甲基牛磺鵝去氧膽酸銨，熊去氧膽酸乙酯，熊去氧膽酸丙酯，甘氨醯鵝去氧膽酸鈉，甘氨醯鵝去氧膽酸鉀，甘氨醯鵝去氧膽酸亞鐵，甘氨醯鵝去氧膽酸銨，牛磺鵝去氧膽酸鈉，牛磺鵝去氧膽酸鉀，牛磺鵝去氧膽酸亞鐵，牛磺鵝去氧膽酸銨，和去氧膽酸鈉組成的組。
23.根據權利要求21所述的藥物組合物，其中所述表面活性劑為去氧膽酸鈉。
24.一種在有需要的脊椎動物和無脊椎動物中治療和/或防止微生物感染的方法，包括給脊椎動物和無脊椎動物施用有效量的根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白或根據權利要求19到23任一項所述的藥物組合物。
25.根據權利要求24所述的方法，其中所述微生物感染為病毒感染。
26.根據權利要求24或25所述的方法，其中所述脊椎動物為哺乳動物，魚類或鳥類。
27.根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白或根據權利要求19到23任一項所述的藥物組合物在醫藥中的用途。
28.根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白或根據權利要求19到23任一項所述的藥物組合物在脊椎動物，無脊椎動物或植物中治療和/或防止微生物感染中的用途。
29.根據權利要求28所述的融合蛋白和/或藥物組合物，其中所述微生物感染為病毒感染。
30.根據權利要求1到14任一項所述的融合蛋白或根據權利要求19到23任一項所述的藥物組合物，在製備用於在脊椎動物或無脊椎動物中治療和/或防止微生物感染的藥物中的用途。
31.根據權利要求30所述的用途，其中所述微生物感染為病毒感染。
【文檔編號】C12N15/11GK103429621SQ201280011838
【公開日】2013年12月4日 申請日期:2012年1月9日 優先權日:2011年1月7日
【發明者】艾格·穆罕默德薩加夫·阿布巴卡爾, 英煥·甕 申請人:威聯生物製藥私人有限公司