亞碲酸鉀雞蛋鹽水保菌增菌培養基的製作方法
2023-08-07 17:28:46
專利名稱：亞碲酸鉀雞蛋鹽水保菌增菌培養基的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種應用於「醫學微生物學」中「微生物檢驗」方面「致病性細菌(白喉棒狀桿菌)」檢驗的培養基。
背景技術：
在本項技術發明之前，白喉棒狀桿菌的檢驗是採集病人、疑似病人或帶菌者的咽拭子，將咽拭子直接接種亞碲酸鉀血瓊脂平板培養基或雞蛋斜面培養基或呂氏血清斜面培養基。雞蛋斜面培養基或呂氏血清斜面培養基是將純雞蛋液或血清在試管中加熱凝固成斜坡狀，亞碲酸鉀血瓊脂平板是將蛋白腖、葡萄糖、牛肉浸膏、兔血等溶解和混入蒸餾水再加入凝固劑瓊脂粉製成的平板狀的培養基。這些培養基存在一些缺點一是雞蛋斜面培養基或呂氏血清斜面培養基的製備十分繁瑣，需要在85℃的溼熱條件下分三天消毒三次，每次消毒後將培養基培養24小時；二是用雞蛋斜面培養基或呂氏血清斜面培養基將樣本培養後，雜菌太多，每一個樣本都需要用革蘭氏染色和異染顆粒染色後，進行顯微鏡檢查，工作量特別大，無法用於幾十人以上的大樣本檢驗；三是亞碲酸鉀血瓊脂平板培養基體積大，量大時難以運輸，且玻璃平皿在運輸時容易損壞；四是上述這些培養基在接種樣本後必須即時培養，當實驗室離採樣現場較遠時就不便培養了，這時樣本中的細菌就會逐漸死亡，而降低了以後的檢出目的菌的可能性；五是上述這些培養基都是固體培養基，它們對細菌培養時只產生單個菌落，不具有增菌作用，因此樣本中含菌量較少時就無法檢出。
發明內容
為克服現有技術的不足之處，本發明的目的在於提供一種製作簡單、使用方便、易獲得結果的新型培養基。
為達到上述目的，本發明採取的技術方案是運用雞蛋中的蛋白防止目的菌的死亡和營養雙重作用、亞碲酸鉀防止非目的菌的大量繁殖、改成液體培養基，使其具有保菌、增菌雙重作用，在培養前先增菌，增菌後再進行分離培養。經過實驗研究，我們確定了保菌增菌培養基的配方及各成份的體積百分比為雞蛋75％、生理鹽水23％、1％的亞碲酸鉀溶液2％。
由於此培養基同時具有保菌、增菌的作用，取得了一些有益效果在遠距離採樣時可以避免目的菌的死亡、在正式檢驗前使目的菌先行擴增，增大了樣本中目的菌的含菌量，可以提高目的菌的檢出率。解決了在遠離實驗室的現場採樣後運輸問題，可防止目的菌死亡、防止採樣器材的破損，在樣本中目的菌含量很低能夠提高目的菌的檢出率、降低了在大量樣本檢驗時的勞動強度--無需將每一個樣本都用革蘭氏染色和異染顆粒染色後進行顯微鏡檢查、無需製備繁瑣的雞蛋斜面培養基或呂氏血清斜面培養基。
具體實施例方式
配製亞碲酸鉀溶液稱取分析純亞碲酸鉀1克，溶於100毫升蒸餾水中，隔水加熱煮沸15分鐘滅菌，冷卻後備用。
配製生理鹽水稱取分析純氯化鈉0.85克，溶於100毫升蒸餾水中，裝入乾淨的鹽水瓶中，蓋好，121℃滅菌15分鐘，冷卻後備用。
準備打蛋及過濾器具取1000毫升洗淨的三角燒瓶一隻，裝入洗淨的、直徑5毫米左右的玻璃珠100隻，封口；另取紗布一片，摺疊成8層(邊長15釐米以上)，與玻璃漏鬥一起放入器械盒中，包好；再包好數隻洗淨的1000毫升燒瓶幾隻、15×150毫米的試管若干、10毫升的吸管數根，全部放入高壓鍋中，121℃滅菌15分鐘，冷卻、烘乾後備用。
消毒雞蛋取鮮雞蛋若干，將其浸入75％的消毒酒精中，同時浸泡帶柄金屬環(用粗的長鐵絲做成)和不鏽鋼鑷子，浸泡5分鐘。
製備雞蛋液用浸泡後的金屬環取出一隻雞蛋，用鑷子在雞蛋的大頭輕輕地開一直徑3釐米左右的孔，將全部內容物倒入滅菌的帶小玻璃珠的三角燒瓶中。重複操作至夠用為止。封好三角燒瓶之口，用力振蕩，直至蛋黃全部打碎、攪勻。將打碎、攪勻的雞蛋用紗布過濾後裝入另一隻三角燒瓶中，蓋好備用。
配製亞碲酸鉀雞蛋鹽水培養基取上述製備的雞蛋液300毫升、滅菌生理鹽水92毫升、滅菌亞碲酸鉀溶液8毫升，充分混勻後，用無菌的10毫升吸管分裝於無菌的試管中，每管2毫升，塞好試管後即可按常規方法使用。
權利要求
1.「亞碲酸鉀雞蛋鹽水保菌增菌培養基」是借鑑雞蛋培養基等研製的，原有的雞蛋培養基中不含亞碲酸鉀，而且是固體性的，含亞碲酸鉀的培養基中則不含雞蛋，本項發明在原有的雞蛋培養基中增加了亞碲酸鉀，並將其由固體性改為液體性，其配方及各成份的體積百分比為雞蛋75％、生理鹽水23％、1％的亞碲酸鉀溶液2％。
全文摘要
「亞碲酸鉀雞蛋鹽水保菌增菌培養基」應用於「醫學微生物學」中「微生物檢驗」方面的「細菌(白喉棒狀桿菌)」檢驗，是一種液體培養基，用雞蛋、生理鹽水和亞碲酸鉀溶液配製而成，其中的蛋白質具有防止目的菌死亡和營養雙重作用、亞碲酸鉀可防止非目的菌繁殖，同時具有保菌、增菌的作用，解決了目的菌死亡、採樣器材的破損問題；提高了目的菌的檢出率；降低了勞動強度。
文檔編號C12N1/20GK1563343SQ20041001444
公開日2005年1月12日 申請日期2004年3月25日 優先權日2004年3月25日
發明者邵榮標 申請人:鹽城市疾病預防控制中心