天麻的組培快繁方法與流程

2023-07-30 12:41:21 1

本發明涉及植物組織培養技術領域，尤其是一種天麻的組培快繁方法。

背景技術：

天麻，學名為Gastrodia elata Bl.，又名赤箭、獨搖芝、離母、合離草、神草、鬼督郵、木浦、明天麻、定風草、白龍皮等，是蘭科天麻屬多年生草本植物。根狀莖肥厚，無綠葉，蒴果倒卵狀橢圓形，常以塊莖或種子繁殖，其根莖入藥用以治療頭暈目眩、肢體麻木、小兒驚風等症，是名貴中藥，與瓊珍靈芝合用治療頭痛失眠。

天麻的繁殖方式主要為塊莖繁殖、種子繁殖，生產上一般採用塊莖繁殖。

但塊莖繁殖效率很低，難以滿足天麻植物規模化生產的需求。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種天麻的組培快繁方法，這種方法可以解決繁殖率低的問題。

為了解決上述問題，本發明採用的技術方案是：

這種天麻的組培快繁方法，其特徵在於包括以下步驟：

A、配置培養基：包括愈傷組織誘導培養基、分化培養基、生根壯苗培養基；

愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基本培養基，添加0.3毫克/升～0.5毫克/升2，4-二氯苯氧醋酸、5克/升～10克/升香蕉汁、1克/升～2克/升殼聚糖；

分化培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升赤黴素、0.1毫克/升～0.2毫克/升萘乙酸、2克/升～5克/升活性炭、3克/升～6克/升黃瓜汁；

生根壯苗培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.3毫克/升～0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升～0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升～0.45毫克/升半胱氨酸0.2毫克/升～0.25毫克/升檸檬酸；

B、選取天麻腋芽作為外植體，將所述腋芽浸泡於濃度為1％的次氯酸鈉溶液中浸泡10分鐘～20分鐘，用無菌水清洗3次～5次；

C、接種於愈傷組織誘導培養基，控制光照為1600LUX～1900LUX，溫度為23℃～25℃，培養至產生愈傷組織；

D、接種於分化培養基，控制光照為1700LUX～1900LUX，溫度為22℃～26℃，培養至產生原球莖；

E、接種於生根壯苗培養基，控制光照為1500LUX～1780LUX，溫度為22℃～26℃，培養至長出3～5片葉子，並且苗高3釐米～5釐米；

F、煉苗培養，移栽入大田。

由於採用了上述技術方案，本發明與現有技術相比具有如下有益效果：

本發明以腋芽作為外植體進行快速繁殖，培養周期短，生根壯苗率高達92.5％；可大規模繁殖天麻苗，具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳述：

實施例1

本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟：

選取天麻腋芽作為外植體，將所述腋芽浸泡於濃度為1％的次氯酸鈉溶液中浸泡10分鐘，用無菌水清洗4次；接種於愈傷組織誘導培養基，控制光照為1600LUX～1650LUX，溫度為23℃～25℃，培養至產生愈傷組織；接種於分化培養基，控制光照為1790LUX～1830LUX，溫度為22℃～26℃，培養至產生原球莖；接種於生根壯苗培養基，控制光照為1500LUX～1523LUX，溫度為22℃～26℃，培養至長出3片葉子，並且苗高4釐米；煉苗培養，移栽入大田。

愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基本培養基，添加0.3毫克/升2，4-二氯苯氧醋酸、7.5克/升香蕉汁、1克/升殼聚糖；

分化培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.25毫克/升赤黴素、0.1毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、3克/升黃瓜汁；

生根壯苗培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升天冬氨酸、0.45毫克/升半胱氨酸、0.23毫克/升檸檬酸。

採用本實施例方法培養天麻，生根壯苗率為91.8％。

實施例2

本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟：

選取天麻腋芽作為外植體，將所述腋芽浸泡於濃度為1％的次氯酸鈉溶液中浸泡15分鐘，用無菌水清洗5次；接種於愈傷組織誘導培養基，控制光照為1780LUX～1815LUX，溫度為23℃～25℃，培養至產生愈傷組織；接種於分化培養基，控制光照為1700LUX～1715LUX，溫度為22℃～26℃，培養至產生原球莖；接種於生根壯苗培養基，控制光照為1765LUX～1780LUX，溫度為22℃～26℃，培養至長出4片葉子，並且苗高5釐米；煉苗培養，移栽入大田。

愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基本培養基，添加0.4毫克/升2，4-二氯苯氧醋酸、10克/升香蕉汁、1.5克/升殼聚糖；

分化培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.3毫克/升赤黴素、0.15毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、5克/升黃瓜汁；

生根壯苗培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.3毫克/升萘乙酸、0.2毫克/升天冬氨酸、0.4毫克/升半胱氨酸、0.25毫克/升檸檬酸。

採用本實施例方法培養天麻，生根壯苗率為92.5％。

實施例3

本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟：

選取天麻腋芽作為外植體，將所述腋芽浸泡於濃度為1％的次氯酸鈉溶液中浸泡20分鐘，用無菌水清洗3次；接種於愈傷組織誘導培養基，控制光照為1860LUX～1900LUX，溫度為23℃～25℃，培養至產生愈傷組織；接種於分化培養基，控制光照為1870LUX～1900LUX，溫度為22℃～26℃，培養至產生原球莖；接種於生根壯苗培養基，控制光照為1500LUX～1520LUX，溫度為22℃～26℃，培養至長出5片葉子，並且苗高3釐米；煉苗培養，移栽入大田。

愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基本培養基，添加0.5毫克/升2，4-二氯苯氧醋酸、5克/升香蕉汁、2克/升殼聚糖；

分化培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.25毫克/升赤黴素、0.2毫克/升萘乙酸、2克/升活性炭、6克/升黃瓜汁；

生根壯苗培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加0.4毫克/升萘乙酸、0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升半胱氨酸、0.2毫克/升檸檬酸。

採用本實施例方法培養天麻，生根壯苗率為92.2％。