EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒的製作方法

2023-08-07 23:09:21

專利名稱：EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及生物技術領域，尤其是涉及一種EB病毒EA-IgG、 VCA-IgA抗體聯 檢滲濾法試劑盒。
背景技術：
鼻咽癌(NPC)是上皮細胞來源地惡性腫瘤，在世界各地廣泛存在。在我國南方，特 別是珠江三角洲及香港地區，是世界上鼻咽癌的高發區。我國約有80%以上的健康成人是 EB病毒攜帶者。在東南亞和北非也有較高的發病率。早期鼻咽癌放療後5年生存率可達 80-90% ，而晚期鼻咽癌的生存率僅為20% 。因此加強鼻咽癌的二級預防，即早發現、早診斷 和早治療是提高鼻咽癌患者存活率的關鍵。 鼻咽癌的發生與EB病毒(Epstein-Barr， EBV)感染密切相關，通過檢測EBV的抗 體早期診斷NPC是提高NPC患者存活率的一個重要手段。 研究表明，鼻咽癌病人在臨床症狀出現平均前三年時，就可觀察到其血清中多種 抗EB病毒抗原抗體的含量顯著升高，因而目前臨床上篩查鼻咽癌患者最常用的手段即免 疫血清學檢測EB病毒感染。其中臨床上普遍使用的檢測指標有EA-IgG、VCA-IgA等。由於 不同鼻咽癌病人的抗體譜不完全相同，因此多種抗原抗體的聯合檢測可進一步提高其診斷 性能。有實驗表明，多種抗體聯檢的敏感度和特異性均較抗體單檢有所提高，而且可以用於 鼻咽癌高發區健康人群篩查的風險評估。 目前在臨床上應用的對血清EB病毒抗體的檢測方法常為免疫螢光法和免疫酶標 法。免疫螢光法檢測EB抗體雖靈敏度和特異性較好，但是其結果判斷帶有主觀性，不易標 準化。ELISA與螢光法比較更快速方便，且易於標準化，但是耗時較長。 如何高效快速的對多種EB病毒的抗體進行檢測，是目前研究的一個熱點。膠體金 免疫滲濾法在ELISA基礎上應運而生，其原理是以硝酸纖維素膜為載體，此方法檢測抗體 簡單快速，不需其他儀器設備，幾分鐘即可用肉眼觀察檢測結果，目前已在臨床檢測中取得 了廣泛的應用，且在整個免疫學檢測範圍內也有廣泛的應用。採用膠體金免疫滲濾技術聯 合檢測EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體，在臨床上有很高的實用檢測意義，但目前尚未有將其 應用於EB病毒抗體聯合檢測試劑盒。

發明內容本實用新型的目的在於提供一種EB病毒EA-IgG、 VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑 為實現上述目的，本實用新型可採取下述技術方案 本實用新型所述的EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒，包括盒體，所 述盒體由卡蓋和卡座扣合而成，在所述卡座內的定位槽中固定有硝酸纖維素膜，在其上間 隔設置的位點上點制有EB病毒的EA、 VCA抗原和羊抗鼠IgG抗體，在所述硝酸纖維素膜的 下方墊有吸水濾紙，在與所述位點相對應的卡蓋上開設有觀察窗口 。[0010] 所述盒體的形狀為矩形、三角形或正方形，開設在卡蓋上的觀察窗口為圓形或正方形。 本實用新型的優點在於利用了膠體金免疫滲濾法的原理，使EB病毒的兩種抗原、 抗體在同一滲濾裝置(硝酸纖維素膜，即NC膜)上進行反應、洗滌，並通過肉眼觀察各斑點 的顯色情況，從而對EB病毒的EA-IgG、 VCA-IgA抗體進行快速檢測；操作簡便、迅速、準確， 可適用於大規模血液檢查，更有利於鼻咽癌患者的早期發現和診斷。 本實用新型試劑盒與ELISA試劑盒相比，其優點在於 1、同時檢測多種抗體EB病毒兩種抗體的聯合檢測提高了檢測的靈敏度和特異 性，對鼻咽癌的診斷有很好的臨床意義。 2、反應時間短整個實驗可在3-5分鐘內完成，適合大規模的快速血檢；該試劑盒 檢測步驟少，但敏感度卻與需1-2小時完成的ELISA相仿； 3、檢測過程中不需其他儀器設備，因此檢測結果也不受儀器的影響，同時不受反 應環境的影響，加入膠體金標記物即可顯色，操作簡便；4、所需檢測標本量小，需要的血 液量僅30iU，只採集指尖血或耳血即可；而ELISA檢測一個指標需100 iil血清，採血量 大。
本實用新型試劑盒與傳統膠體金試劑盒相比，其優點在於 1、同時檢測EB病毒的兩種抗原，靈敏度和特異性均較單檢高； 2、外形多變且美觀，使用方便，適合家庭自助檢測，有利於鼻咽癌病症的早發現和
早診斷。

圖1、圖2、圖3是本實用新型的盒體結構示意圖。
具體實施方式
如圖1、2、3所示，所述的EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒，包括盒 體l，所述盒體l由卡蓋和卡座扣合而成，在所述卡座內的定位槽中固定有硝酸纖維素膜2， 在其上相距一定距離的位點3上點制有EB病毒的EA、 VCA抗原和羊抗鼠IgG抗體，在所述 硝酸纖維素膜2的下方墊有吸水濾紙，在與所述位點3相對應的卡蓋上開設有面積小於定 位槽面積的觀察窗口 4，這樣可以使硝酸纖維素膜2和濾紙在定位槽中固定穩固；為方便家 庭使用，所述盒體1的形狀可以為矩形、三角形、正方形或其他一些幾何形狀，開設在卡蓋 上的觀察窗口 4也可以為圓形、梅花形或正方形等其他幾何形狀。 本發明的試劑盒檢測方法如下 1、將試劑盒從冷藏環境中取出，水平放置，室溫(18 25°C )平衡30分鐘； 2、每個裝置上加入待測樣本30 iil ; 3、待標本被吸乾後加入緩衝液6滴(300ul); 4、加入金標液2滴(100ul); 5、待液體被吸乾後加入緩衝液6滴； 6、待膜上液體吸乾後5min肉眼觀察結果，質控點顯示紅色斑點，觀察相應檢測位 置有無紅色的斑點，出現紅色斑點判為該樣本EB病毒抗體在體內呈陽性，無紅色斑點即判
4為陰性。
權利要求一種EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒，包括盒體(1)，其特徵在於所述盒體(1)由卡蓋和卡座扣合而成，在所述卡座內的定位槽中固定有硝酸纖維素膜(2)，在其上間隔設置的位點(3)上點制有EB病毒的EA、VCA抗原和羊抗鼠IgG抗體，在所述硝酸纖維素膜(2)的下方墊有吸水濾紙，在與所述位點(3)相對應的卡蓋上開設有觀察窗口(4)。
2. 根據權利要求1所述的EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒，其特徵在 於所述盒體(1)的形狀為矩形、三角形或正方形，開設在卡蓋上的觀察窗口 (4)為圓形或 正方形。
專利摘要本實用新型公開了一種EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗體聯檢滲濾法試劑盒，包括盒體，所述盒體由卡蓋和卡座扣合而成，在所述卡座內的定位槽中固定有硝酸纖維素膜，在其上相距一定距離的位點上點制有EB病毒的EA、VCA抗原和羊抗鼠IgG抗體，在所述硝酸纖維素膜的下方墊有吸水濾紙，在與所述位點相對應的卡蓋上開設有觀察窗口。本實用新型利用了膠體金免疫滲濾法的原理，使EB病毒的兩種抗原、抗體在同一滲濾裝置(NC膜)上進行反應，並通過肉眼觀察各斑點的顯色情況，從而對EB病毒的EA-IgG、VCA-IgA抗體進行快速檢測；操作簡便、迅速、準確，可適用於大規模血液檢查，更有利於鼻咽癌患者的早期發現和診斷。
文檔編號G01N33/569GK201497742SQ200920091659
公開日2010年6月2日 申請日期2009年7月17日 優先權日2009年7月17日
發明者付光宇, 劉功成, 吳學煒, 張銀, 李奎, 李桂林, 李靜輝, 王菁, 苗蘭芳, 項立紅 申請人:鄭州安圖綠科生物工程有限公司