酵母中海藻糖含量的測定方法

2023-07-08 16:15:06 1

酵母中海藻糖含量的測定方法
【專利摘要】本發明涉及一種酵母中海藻糖含量的測定方法，屬於食品添加劑及其檢測方法領域。所述的酵母中海藻糖含量的測定方法,包括以下步驟：(1)標準溶液配製：精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然後稀釋至質量濃度分別為3.00g/100ml、1.50g/100ml、1.00g/100ml、0.50g/100ml、0.10g/100ml、0.05g/100ml和0.01g/100ml的標準溶液，備用。(2)樣品準備：取膏狀酵母抽提物5g，加水定容至100ml，3000r/min離心分離10min，上清液用0.45μm膜過濾後，備用。(3)分析過程：在一定的色譜條件下分析標準溶液和樣品溶液，根據標準溶液濃度Y與色譜峰面積x的關係，繪製標準曲線。再根據標準曲線和樣品峰面積計算樣品的濃度。本發明所述的測定方法採用高效液相色譜法，本方法具有簡單快速、靈敏度高、重現性好、結果準確可靠等特點。因此，本發明所述的測定方法適用於生產過程及其應用廠家的監測及檢測。
【專利說明】酵母中海藻糖含量的測定方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及一種酵母中海藻糖含量的測定方法，屬於食品添加劑及其檢測方法領域。

【背景技術】
[0002]海藻糖是廣泛存在於動植物體內的一種非還原性雙糖，它是一種優良保鮮劑和防腐劑，已被廣泛用於食品、化妝品、藥品、保健品、酶和疫苗等的穩定保存。海藻糖對生物體組織和生物大分子具有的非特異性保護作用，即生物體在極端乾燥條件下可將體內99%的水脫去而不死亡，並能將生命保持數年乃至數十年以上，一旦條件適宜又可復活過來。20世紀90年代以來，隨著對海藻糖特異性認識的逐步深入，有關其生物學功能、生產方法及應用的研究報導和專利不斷湧現，已逐漸成為國際上研究和開發的熱點。測定酵母中海藻糖的主要方法有蒽酮比色法和酶水解法兩種，蒽酮法基於糖和蒽酮的顯色反應原理，但在遇到能與蒽酮反應的其他物質時，常使測定值偏大；有人採用海藻糖酶水解法測定海藻糖含量，但也有一定的限制。因此，建立一種簡便、快速、準確測定酵母中海藻糖含量的方法很有必要。


【發明內容】

[0003]本發明旨在提供一種簡便、快速、準確測定酵母中海藻糖含量的方法。
[0004]本發明所述的酵母中海藻糖含量的測定方法，包括以下步驟:
(I)標準溶液配製:
精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然後稀釋至質量濃度分別為3.00g/100mlU.50g/100ml、l.00g/100mU0.50g/100ml、0.lOg/lOOmU0.05g/100ml 和0.0lg/lOOml的標準溶液，備用。
[0005](2)樣品準備:
取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml, 3000r/min離心分離1min,上清液用
0.45 μ m膜過濾後,備用。
[0006](3)分析過程:
在一定的色譜條件下分析標準溶液和樣品溶液，根據標準溶液濃度Y與色譜峰面積X的關係，繪製標準曲線。再根據標準曲線和樣品峰面積計算樣品的濃度。
[0007]優選的，本發明所述的色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型，8mmIDX300mmL，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細微顆粒雜質和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min,柱溫70°C，進樣量20 μ L。
[0008]本發明所述的檢測方法採用高效液相色譜法，經測定，海藻糖標準溶液濃度在
0.01-3.00g/100ml範圍內，Y=98.623Χ-0.4041，濃度與峰面積呈較好的線性關係，其相關係數為0.9995，該KS-801柱可作為標準曲線對酵母抽提物中的海藻糖組分進行色譜分析。
[0009]本發明所述的測定方法採用高效液相色譜法，本方法具有簡單快速、靈敏度高、重現性好、結果準確可靠等特點。因此，本發明所述的測定方法適用於生產過程及其應用廠家的監測及檢測。

【具體實施方式】
[0010]實施例一:
(I)標準溶液配製:
精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然後稀釋至質量濃度分別為3.00g/100mlU.50g/100ml、l.00g/100mU0.50g/100ml、0.lOg/lOOmU0.05g/100ml 和0.0lg/lOOml的標準溶液，備用。
[0011](2)樣品準備:
取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml, 3000r/min離心分離1min,上清液用0.45 μ m膜過濾後,備用。
[0012](3)分析過程:
在一定的色譜條件下(色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型(8mmIDX300mmL)，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細微顆粒雜質和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min，柱溫70°C，進樣量20 μ L)分析標準溶液和樣品溶液，根據標準溶液濃度Y與色譜峰面積X的關係，繪製標準曲線。經測定，海藻糖標準溶液濃度在
0.01-3.00g/100ml範圍內，Y=98.623Χ-0.4041，濃度與峰面積呈較好的線性關係，其相關係數為0.9995。再根據標準曲線和樣品峰面積計算樣品的濃度。
[0013]通過對本發明所述的檢測方法，檢測由安琪酵母公司提供的酵母抽提物(含約10 %的海藻糖)進行檢測，檢測結果為酵母中海藻糖純度為10.25 %，海藻糖在酵母中含量為7.16% (折幹)。
【權利要求】
1.酵母中海藻糖含量的測定方法，包括以下步驟: (1)標準溶液配製:精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然後稀釋至質量濃度分別為 3.00g/100ml、l.50g/100ml、l.00g/100ml、0.50g/100ml、0.10g/100ml、0.05g/100ml和0.0lg/lOOml的標準溶液，備用； (2)樣品準備:取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml,3000r/min離心分離1min,上清液用0.45 μ m膜過濾後,備用； (3)分析過程:在一定的色譜條件下分析標準溶液和樣品溶液，根據標準溶液濃度Y與色譜峰面積X的關係，繪製標準曲線； 再根據標準曲線和樣品峰面積計算樣品的濃度。
2.如權利要求1所述的酵母中海藻糖含量的測定方法，其特徵在於所述的色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型，8mmIDX300mmL，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細微顆粒雜質和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min，柱溫70°C，進樣量 20 μ L。
【文檔編號】G01N30/02GK104316612SQ201410574056
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月24日 優先權日:2014年10月24日
【發明者】李勇, 劉文斌 申請人:西安米億生物科技有限公司