一種膽甾醇衍生物及其製備方法與應用的製作方法
2023-08-12 17:25:16
專利名稱：一種膽甾醇衍生物及其製備方法與應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種膽甾醇衍生物，特別是涉及一種具有殺蟲作用的19位甲基氧 化為羧基的膽甾醇衍生物及其製備方法與應用。
背景技術：
自20世紀60年代以來，已經從柳珊瑚中分離獲得了許多結構新穎的活性 化合物，主要包括二萜類、甾體類、生物鹼類等，其生物活性包括抗腫瘤、抗 菌、抗病毒、酶抑制作用等。對柳珊瑚的化學成分研究已經成為海洋天然產物 研究的一個熱門領域。
到目前為止，國內外未見對蕾二歧燈芯柳珊瑚D/c/wre//a geww"cea (valenciennes)的化學成分的相關報導。更未見從蕾二歧燈芯柳珊瑚中分離得到 19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，也未見從其它生物中分離得到這種衍生 物。
發明內容
本發明的目的在於提供一種來源於蕾二歧燈芯柳珊瑚的19位甲基氧化為羧 基的膽甾醇衍生物及其製備方法與作為殺蟲劑在生物農藥中的應用，它能滿足 現有技術的上述需求。
一種19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，其特徵在於它的結構式為
式中Ri為烴基，R2為醯基。上述19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的製備方法，其特徵在於先將蕾 二歧燈芯柳珊瑚用醇提取，將所得提取液減壓濃縮得到浸膏，將該浸膏懸浮於 水中，用有機溶劑萃取；將所得萃取液減壓濃縮後運用矽膠柱層析色譜、凝膠 色譜和製備高效液相色譜分離純化，得到19位甲基氧化為羧基的膽甾醇類化合 物。
上述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物在製備生物農藥殺蟲劑中的應用。
本發明從我國南海蕾二歧燈芯柳珊瑚中獲得19位甲基氧化為羧基的膽甾醇 衍生物，該衍生物具有殺蟲活性，可用於開發生物農藥殺蟲劑，應用前景廣闊。
具體實施例方式
製備本發明的化合物時，採取下述各步驟 (1)生物樣品的提取取新鮮的生物樣品蕾二歧燈芯柳珊瑚2850 g，用自來水清 洗，除去泥沙，將該樣品粉碎後先用3L 95% (質量百分數，下同)乙醇浸提3 次，每次ld。合併3次提取液，旋轉蒸發至幹，用2L甲醇脫鹽3次，減壓濃 縮得總浸膏。總浸膏用500mL水稀釋後，用等體積石油醚、乙酸乙酯和正丁醇 分別萃取6次，減壓濃縮萃取液得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏，各浸膏 密封保存於4'C冰箱中備用。
所述的乙醇可改為甲醇、異丙醇或正丁醇。 (2)分離提取物各相萃取浸膏，首先經過減壓矽膠柱層析(VLC)將各相浸膏 按照其極性大小分成極性相近的幾個部分，然後經過矽膠柱層析色譜、凝膠色 譜和製備高效液相色譜分離和純化，得到本發明的化合物。所得化合物的波譜 數據列於表1。表1化合物1的核磁共振波譜數據
Position& ^/ in'H-'H COSYHMBC
133.8 (t)2.60 (1H, r 1.51 (1H, in), m)H-2一
233.1 (t)1.93 (2H, r 1.42 (1H, in), m)H-l, H-3—
71.1(d)3.55 (1H, im)H-2, H-4—
444.3(t)2.48 (1H, r 1.78 (1H, in)， m)H-3—
134.8 (s)一——
6124.7 (d)5.66 (1H, d,5.8)H-7C-7, C-10
31.0 (t)1.42 (1H, r 1.25 (1H，n),H-6， H-8—
832.1(d)1.71 OH,'m)H-7，H-9,H-14—
948.8 (d)1.05 (1H, im)H-l, H-8, H-ll—
1050.8 (s)———
1120.4 (t)1.34 (1H, r 1.15 (IH，n), m)H-9， H-12_
1239.6 (t)2.01 (1H, r 1.15 (1H, in), m)H-ll—
1342.4 (s)———
1456.4 (d)0.93 (1H, im)H-8, H-15一
1524.1 (t)1.61 OH, r 1.08 (IH，n)， m)H-14, H-16—
1628.2 (t)1.80 (1H, r 1.25 (1H， in), m)H-15, H-17—
1756.2 (d)1.15 (1H, itn)H-16, H-20—
1811.8 (q)0.61 (3H，s)C-12, C-13, C-14
19174.3 (s)一_
2035.7 (d)1.39 (IH， im)11-1 一, H-21, H-22_
2118.6 (q)0.90 (3H, s)H-20C-17, C-20, C-22
2236.2 (t)1.35 (2H， im)H-20, H-23—
2323.4 (t)1.63 (1H, r 1.69 (1H,n), m)H-22, H-24_
2441.1 (t)1.63 (1H, i 1.72 (IH，n), m)H-23一
2582.6 (s)—一
26, 2726.1 (q)1.42 (6H,s)—C-24. C-25
-OAc170.5 (s)———
-OAc22.5 (q)1.96 (3H,s)—C-28
-OCH351.7 (q)3.71 (3H,s)—C-19本實施例製得的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的結構式為
本發明的化合物對滷蟲致死活性實驗
取卣蟲卵15 mg置於500 mL三角瓶中，加入處理過的海水300 mL，用充 氣泵緩緩充氣，25'C水浴中孵化48 h，除去卵殼及未孵化的卵，獲得滷蟲幼體，
備用o
卣蟲致死活性實驗依照Solis的改良法，取24孔培養板，每孔加lmL含滷 蟲幼體的溶液(每孔20個滷蟲)，製成測試培養板。將粗提物、各有機相浸膏 及各單體化合物，用DMSO/水配置成2 mg/mL的溶液，加入培養板孔中，每個 粗提物及各相浸膏樣品設置100 pg/mL， 50 pg/mL， 10 pg/mL三個終濃度，各化 合物設置50 pg/mL， 25 pg/mL, 10 pg/mL三個終濃度。每個濃度的樣品又各設三 個平行樣。培養24h後，記錄滷蟲死亡個數。滷蟲致死活性採用校正死亡率表 示校正死亡率％=[(對照組存活率一樣品組存活率)/對照組存活率^100%
本發明的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物在50pg/mL對滷蟲的致死率 為94.4%，在濃度為25^ig/mL下的致死率為57.9n/。，表現出強烈的滷蟲致死活性。
實驗表明，本發明的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物對滷蟲表現出強 的致死活性，因此可將其作為生物農藥殺蟲劑。
式中Ri為甲基，R2為乙醯基。
權利要求
1. 一種19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，其特徵在於結構式為式中R1為烴基，R2為醯基。
2. 權利要求1所述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的製備方法，其特徵在於 先用醇提取蕾二歧燈芯柳珊瑚，將提取液減壓濃縮得到浸膏，將該浸膏懸浮於水中， 用有機溶劑萃取；將所得萃取液減壓濃縮後用矽膠柱層析色譜、凝膠色譜和製備高效 液相色譜進行分離，得到19位甲基氧化為羧基的膽甾醇類衍生物。
3. 如權利要求1所述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的製備方法，其特徵在 於所述的烴基為甲基、乙基、丙基、正丁基、異丁基、苯基、節基或對溴苯甲基；所 述的醯基為乙醯基、丙醯基、丁醯基、苯甲醯基、對溴苯甲醯基或鄰溴苯甲醯基；所 述的有機溶劑為正丁醇、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或環己烷。
4. 權利要求1所述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物在製備生物農藥殺蟲中的 應用。
5. 如權利要求2所述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的製備方法，其特徵在 於所述的有機溶劑為正丁醇、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚或環己烷。
6. 如權利要求2所述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的製備方法，其特徵在 於所述的醇為乙醇、甲醇、異丙醇或正丁醇。
全文摘要
一種19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物及其製備方法與應用，製備時先用醇提取蕾二歧燈芯柳珊瑚，將提取液減壓濃縮得到浸膏，將該浸膏懸浮於水中，用有機溶劑萃取；將所得萃取液減壓濃縮後用矽膠柱層析色譜、凝膠色譜和製備高效液相色譜進行分離，得到19位甲基氧化為羧基的膽甾醇類衍生物。本發明來源於蕾二歧燈芯柳珊瑚的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物具有較強的殺蟲活性，可用於開發農業用生物農藥，應用前景廣闊。
文檔編號A01N45/00GK101434634SQ20081023840
公開日2009年5月20日 申請日期2008年12月7日 優先權日2008年12月7日
發明者劉海燕, 牟海津, 王長雲, 管華詩, 邵長倫 申請人:中國海洋大學