一種用於生物源性人工骨去抗原的製備方法
2023-12-03 08:44:51 2
專利名稱：一種用於生物源性人工骨去抗原的製備方法
技術領域：
本發明涉及醫學骨外科中骨移植用活性生物源性人工骨材料技術領域，具體的說是涉及到一種用於生物源性人工骨去抗原的製備方法。
臨床上降低免疫反應常用的技術有以下幾種(1)深低溫冷凍法或冷凍乾燥法是目前應用的最廣的異體骨處理和貯存方法，可有效降低異種、異體骨免疫原性，其中以凍幹法的作用更明顯。但此法降解骨基質的酶以及與遲發性過敏反應有關的細胞內外蛋白質同時也被保存了下來，從而導致骨基質內骨誘導物質的降解，損害了骨的誘導成骨活性，同時仍可誘發不同程度的免疫反應。
(2)脫鈣法脫鈣骨具有較強的骨誘導力，可以誘導血管周圍未分化的間充質細胞及骨髓基質細胞向成軟骨細胞及成骨細胞分化，但此法降低骨的機械強度。
(3)抗原提取法即氯仿甲醇液等有機溶劑脫脂，鹽酸脫鈣，H2O2脫蛋白，凍幹和滅菌處理，如Urist所創的AAA骨。此法既除去了抗原性又保留了誘導成骨的能力，但由於人們擔心氯仿/甲醇的毒性，臨床應用受到限制。
(4)輻照法、放射線法處理可較好的降低異體(種)骨的抗原性，但過強的輻射劑量對異體(種)的機械強度有損害。
(5)煮沸法、高壓、煅燒及甲醛、硫柳汞法處理以上方法雖可降低骨的免疫原性，但嚴重破壞了骨的生物學性能，或殘餘毒性較大，或影響骨的誘導成骨活性，目前均已少用。
例如中國專利CN11880115A就公開了一種脫脂去抗原製備骨移植材料的方法，採用的是化學處理和脫鈣法去抗原，就存在著上述的缺點。
本發明的具體方案是利用表面活性劑脫脂的原理，將待處理的生物源性人工骨骨組織放入表面活性劑溶液中，經充分溼潤、滲透，使溶液進入骨組織內部，脂肪組織隨之脫落，表面活性劑把脫落下來的脂肪及有機物質乳化分散於溶液中，經三蒸水漂洗脫去。其特點是包括下列步驟1、將生物源性人工骨骨塊製成所需大小2、用系列表面活性劑製成總濃度為20％-60％的脫脂液，其配製方法如下a、用陰離子表面活性劑1％-70％烷基苯磺酸鈉(ABS)和1％-80％脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉(AES)配比b、用1％-10％非離子表面活性劑與1％-90％陰、陽、兩性離子型表面活性劑配比c、用1％-90％兩性離子表面活性劑和1％-90％陰、陽、兩性離子表面活性劑配比3、將待處理的骨塊浸泡於所配置的脫脂液中4、在溫度為20-60℃，功率為60％-100％條件下超聲振蕩洗滌或攪拌24-240小時5、用三蒸水振蕩洗滌10-20次6、凍幹2-200小時7、真空包裝，核素輻射或環氧乙烷消毒滅菌上述表面活性劑種類可以是陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑。
3、將待處理的骨塊浸泡於所配置的脫脂液中4、在溫度為20-60℃，功率為60％-100％條件下超聲振蕩洗滌或攪拌24-240小時5、用三蒸水振蕩洗滌10-20次6、凍幹2-200小時7、真空包裝，核素輻射或環氧乙烷消毒滅菌
權利要求
1.一種用於生物源性人工骨去抗原的製備方法，將待處理的生物源性人工骨骨組織放入表面活性劑溶液中，經充分溼潤、滲透，使溶液進入骨組織內部，脂肪組織隨之脫落，表面活性劑把脫落下來的脂肪及有機物質乳化分散於溶液中，經三蒸水漂洗脫去。其特點是包括下列步驟(1)將生物源性人工骨骨塊製成所需大小(2)用系列表面活性劑製成總濃度為20％-60％的脫脂液，其配製方法如下d、用陰離子表面活性劑1％-70％烷基苯磺酸鈉(ABS)和1％-80％脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉(AES)配比e、用1％-10％非離子表面活性劑與1％-90％陰、陽、兩性離子型表面活性劑配比f、用1％-90％兩性離子表面活性劑和1％-90％陰、陽、兩性離子表面活性劑配比(3)將待處理的骨塊浸泡於所配置的脫脂液中(4)在溫度為20-60℃，功率為60％-100％條件下超聲振蕩洗滌或攪拌24-240小時(5)用三蒸水振蕩洗滌10-20次(6)凍幹2-200小時(7)真空包裝，核素輻射或環氧乙烷消毒滅菌
2.根據權利要求1所述的製備方法，上所述表面活性劑種類可以是陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑。
全文摘要
本發明公開了一種用於生物源性人工骨去抗原的製備方法，將待處理的生物源性人工骨骨組織放入由系列表面活性劑製備的溶液中，經充分溼潤、滲透，使溶液進入骨組織內部，脂肪組織隨之脫落，分散於表面活性劑溶液中，經三蒸水漂洗脫去。採用的表面活性劑符合衛生安全標準，可在體內生物降解，無毒無害；並具有更好脫脂的效果，能有效的降低骨的抗原性；處理過的異體異種骨機械性能更強，生產過程無汙染、產品無毒性物質殘留且儲存運輸方便。
文檔編號A61L27/36GK1463756SQ02120968
公開日2003年12月31日 申請日期2002年6月6日 優先權日2002年6月6日
發明者孫磊, 田偉, 尹大慶, 王戈平, 黃嘯原, 陳磊, 高新生, 傑永生, 陶劍峰, 禇黎, 劉竟成 申請人:北京市創傷骨科研究所